本文關(guān)鍵詞：人IL-29第43位Lys的定點突變及抗腫瘤活性初步分析

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【摘要】：為獲得人白介素-29(h IL-29)變異體并考察其對腫瘤細(xì)胞增殖的影響,基于對h IL-29成熟肽生物信息學(xué)的分析結(jié)果,通過大引物PCR方法將其肽鏈第43位賴氨酸(Lys)編碼基因進(jìn)行定點突變。將得到的h IL-29變異體基因插入質(zhì)粒p PIC9KM,構(gòu)建重組真核表達(dá)質(zhì)粒p PIC9KM-h IL-29~(mut43),導(dǎo)入畢赤酵母(Pichia pastoris)GS115,經(jīng)G418篩選得到高產(chǎn)菌株p PIC9KM-h IL-29~(mut43)/GS115,用甲醇誘導(dǎo)表達(dá)重組蛋白rh IL-29~(mut43)。檢測rh IL-29~(mut43)對腫瘤細(xì)胞增殖的影響,結(jié)果顯示該重組蛋白對結(jié)腸癌細(xì)胞HCT8、肺腺癌細(xì)胞A549、胃癌細(xì)胞SGC7901和肝癌細(xì)胞BEL7402的增殖均有抑制作用,且高濃度(1 000 ng/ml)下對上述4種腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用更強,增殖抑制率分別為(18.45±0.83)%、(27.14±2.99)%、(29.94±1.95)%和(25.22±0.42)%。與陰性對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。且其抑制增殖效應(yīng)強于野生型h IL-29和陽性對照藥人干擾素(IFN)-a2b。
【作者單位】： 江南大學(xué)生物工程學(xué)院;江南大學(xué)無錫醫(yī)學(xué)院;
【基金】：無錫市科技發(fā)展資金(CLE01N1412)
【分類號】：R96
【正文快照】： 白介素29(interleukin-29,IL-29)是由Kotenko等和Sheppard等于2003年共同發(fā)現(xiàn)的[1,2],又稱干擾素(IFN)-λ1,與IFN-λ2(IL-28A)和IFN-λ3(IL-28B)同屬于IFN-λ家族(Ⅲ型IFN)。IL-29受體(IFN-λR)是由IL-28R1和IL-10R2鏈組成的異二聚體復(fù)合物,其中IL-28R1為特異性結(jié)合亞基。IL-2

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