本文關(guān)鍵詞：艾塞那肽對高糖誘導(dǎo)的心肌細胞抗炎作用機制的探討

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【摘要】：目的:用高糖刺激原代心肌細胞來模擬糖尿病時持續(xù)的高血糖對心肌細胞的損傷,用艾塞那肽處理后來觀察高糖環(huán)境下的心肌細胞內(nèi)的炎癥因子水平,SIRT1、p-38、NF-κB蛋白的表達情況,探討艾塞那肽是否對高糖導(dǎo)致的心肌細胞的損傷有保護作用以及其可能的機制。方法:1.乳鼠心肌細胞的分離、培養(yǎng)與實驗分組:原代心肌細胞培養(yǎng)48h后,首度換液后,再培養(yǎng)至細胞80%-90%融合時,將細胞分為五組:正常組(含5.5mmol/L D-Glucose的DMEM),模型組(DMEM+24.5mmol/L的D-Glucose,即30mmol/L的HG溶液),小劑量組(10nmol/L的exendin-4),大劑量組(20nmol/L的exendin-4),對照組(DMEM+24.5mmol/L的D-Mannitol);大劑量組與小劑量組的藥物均用30mmol/L的葡萄糖溶液配制。各組細胞均培養(yǎng)24h后收集細胞培養(yǎng)液上清液及細胞。2.指標檢測:用ELISA試劑盒檢測炎癥因子IL-6,TNF-α的含量,western blot檢測SIRT1,p-p38,NF-κB蛋白的表達,RT-PCR來檢測SIRT1m RNA的表達。結(jié)果:1.炎癥因子IL-6,TNF-α的含量:高糖可以誘導(dǎo)心肌細胞中的炎癥因子IL-6,TNF-α的含量增加(p0.01,p0.01),給予艾塞那肽處理后,心肌細胞內(nèi)IL-6(p0.05,p0.05),TNF-α(p0.05,p0.01)的含量顯著減少,說明艾塞那肽能減輕炎癥因子的產(chǎn)生;2.p-p38蛋白的表達:高糖可以使心肌細胞中的p-p38蛋白的表達上調(diào)(p0.01),給予艾塞那肽后,p-p38蛋白表達顯著減少(p0.05,p0.05);3.NF-κB蛋白的表達:與正常組相比,高糖組的NF-κB p65的表達明顯增加(p0.05),給予艾塞那肽后,NF-κB p65的蛋白表達量明顯低于高糖組(p0.05);4.SIRT1m RNA和蛋白的表達:在高糖的刺激下,心肌細胞內(nèi)的SIRT1m RNA(p0.05)和蛋白(p0.05)的表達均下調(diào),給予艾塞那肽后,SIRT1m RNA(p0.05,p0.05)和蛋白(p0.05,p0.01)的表達與高糖組相比明顯升高。結(jié)論:1.艾塞那肽對高糖誘導(dǎo)的心肌細胞的損傷有保護作用,能減少炎癥因子的產(chǎn)生;2.艾塞那肽對高糖誘導(dǎo)的心肌細胞的損傷的保護作用機制可能是通過下調(diào)p-p38,NF-κB p65蛋白的表達,上調(diào)SIRT1的表達。
【學(xué)位授予單位】：湖北科技學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R96

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本文編號：1282734