本文關(guān)鍵詞：三唑類殺菌劑對(duì)雄性秀麗線蟲生殖功能的影響及作用機(jī)制

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【摘要】：研究目的本研究利用秀麗線蟲研究三唑類殺菌劑對(duì)雄性秀麗線蟲生殖功能的影響,探討三唑類殺菌劑對(duì)精子發(fā)生、精子形成及交配行為過程的損傷作用及其生殖毒性作用機(jī)制。研究方法1觀察后代數(shù)目、世代時(shí)間及雜交后代數(shù)目,評(píng)價(jià)三唑類殺菌劑對(duì)雄性秀麗線蟲繁殖能力的影響。2觀察生殖細(xì)胞及精細(xì)胞數(shù)目、有絲分裂區(qū)細(xì)胞增殖及減數(shù)分裂進(jìn)入,評(píng)價(jià)三唑類殺菌劑對(duì)雄性秀麗線蟲精子發(fā)生的影響,并測(cè)定生殖細(xì)胞增殖與分化信號(hào)通路TGF-β(daf-7, daf-1,daf-4,daf-3,and daf-5)與IGF-1(daf-2,age-1,akt-1,akt-2,and daf-16)相關(guān)基因的表達(dá)水平。3觀察精子大小與形態(tài)、精子體外活化以及精子轉(zhuǎn)移,評(píng)價(jià)三唑類殺菌劑對(duì)雄性秀麗線蟲精子形成過程的影響,并測(cè)定精子活化相關(guān)信號(hào)通路SWM-1(swm-1,try-5,spe-6,spe-4.fer-1)相關(guān)基因的表達(dá)水平。4觀察雄性線蟲交配行為接觸雌雄同體數(shù)、轉(zhuǎn)動(dòng)次數(shù)、排卵孔定位率以及交配效率的改變,評(píng)價(jià)三唑類殺菌劑對(duì)交配行為的影響,并測(cè)定交配行為相關(guān)基因的表達(dá)水平。研究結(jié)果1三唑類殺菌劑對(duì)雄性秀麗線蟲繁殖力的影響戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑(0.1、1.0和10.0μg/L)染毒后后代數(shù)目在10.0μg/L濃度組與雜交后代數(shù)目在1.0、10.0μg/L濃度組均減少,而世代時(shí)間各濃度組與對(duì)照組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2三唑類殺菌劑對(duì)雄性秀麗線蟲精子發(fā)生的影響戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑染毒后雄性線蟲的總生殖細(xì)胞數(shù)、有絲分裂數(shù)、減數(shù)分裂細(xì)胞數(shù)及精細(xì)胞數(shù)目在10.0μg/L濃度組與對(duì)照組相比均減少,氟環(huán)唑暴露后精細(xì)胞數(shù)目在1.0μg/L濃度時(shí)也減少。有絲分裂細(xì)胞數(shù)的減少也說明戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑抑制生殖細(xì)胞增殖。戊唑醇、氟環(huán)唑進(jìn)入減數(shù)分裂的概率在10.0μg/L濃度組時(shí)降低,而丙硫菌唑各濃度組與對(duì)照組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,說明戊唑醇及氟環(huán)唑抑制生殖細(xì)胞增殖并提前進(jìn)入分化過程。此外,戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑激活TGF-β及IGF-1通路誘導(dǎo)其基因的相對(duì)表達(dá)量增加。3三唑類殺菌劑對(duì)雄性秀麗線蟲精子形成的影響戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑染毒后精細(xì)胞直徑與橫截面積在0.1、1.0和10.0μg/L暴露濃度與對(duì)照組相比均降低；戊唑醇、氟環(huán)唑精子活化率在10.0μg/L濃度組與對(duì)照組相比下降,而丙硫菌唑各濃度組與對(duì)照組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑精子形態(tài)、精子轉(zhuǎn)移率各濃度組與對(duì)照組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。此外,戊唑醇與氟環(huán)唑激活SWM-1信號(hào)通路誘導(dǎo)基因表達(dá)量增加。4三唑類殺菌劑對(duì)雄性秀麗線蟲交配行為的影響戊唑醇染毒劑量為10.0μg/L時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)次數(shù)增加,氟環(huán)唑濃度為1.0μg/L與丙硫菌唑濃度為10.0μg/L時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)次數(shù)減少；戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑暴露組染毒濃度為10.0μg/L時(shí)雄蟲排卵孔定位效率均降低,而且氟環(huán)唑在染毒濃度為0.1μg/L時(shí)觀察到降低；氟環(huán)唑與丙硫菌唑染毒濃度為10.0μg/L時(shí)交配效率降低,而戊唑醇暴露后雄蟲交配效率未觀察到明顯變化；接觸反應(yīng)率未觀察到異常變化。此外,雄性秀麗線蟲交配行為相關(guān)基因osm-5,lov-1, pkd-2,unc-29,unc-103表達(dá)量在戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑染毒后,出現(xiàn)不同程度的增加。結(jié)論戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑激活TGF-p及IGF-1通路,影響生殖細(xì)胞發(fā)育,導(dǎo)致生殖細(xì)胞數(shù)目減少,精子細(xì)胞數(shù)降低,損傷精子發(fā)生過程；戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑引起精子大小變小,并且戊唑醇與氟環(huán)唑激活SWM-1通路影響精子活化,引起活化精子數(shù)目降低,損傷精子形成過程;戊唑醇、氟環(huán)唑及丙硫菌唑誘導(dǎo)基因osm-5、lov-1、pkd-2、unc-29、unc-103表達(dá)量增加,影響雄蟲轉(zhuǎn)動(dòng)、排卵孔定位及交配效率,損傷交配行為,導(dǎo)致后代數(shù)目降低。
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R96

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號(hào)：1256513