微小RNA-410對(duì)細(xì)胞色素P450 3A5基因表達(dá)水平的調(diào)控的研究
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【摘要】:目的研究微小RNA-410(miRNA)對(duì)細(xì)胞色素P450 3A5(CYP3A5)表達(dá)的特異調(diào)控。方法用Targetscan、miRanda和Pictar等靶基因預(yù)測(cè)軟件預(yù)測(cè)可能作用CYP3A5基因的miRNA,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和篩選。用Hep G2細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),miR-410 mimic轉(zhuǎn)染組予以miR-410 mimic(類(lèi)似物)轉(zhuǎn)染48 h,miR-410inhibitor轉(zhuǎn)染組予以miR-410 inhibitor(抑制藥),空白對(duì)照組加入等量的細(xì)胞培養(yǎng)液轉(zhuǎn)染48 h。用實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)和Western-blot鑒定CYP3A5 mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)。結(jié)果 miR-410在很大程度與CYP3A5mRNA的3'-UTR結(jié)合。與空白對(duì)照組的CYP3A5蛋白質(zhì)表達(dá)水平為2.61±0.53相比,miR-410 mimic轉(zhuǎn)染組為1.47±0.13,miR-410 inhibitor轉(zhuǎn)染組為3.50±0.65,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。miR-410 mimic轉(zhuǎn)染組和miR-410 inhibitor轉(zhuǎn)染組的CYP3A5 mRNA的表達(dá)水平分別為1.81±0.11和1.82±0.41,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 miR-410參與CYP3A5蛋白表達(dá)的調(diào)控,是一種轉(zhuǎn)錄后調(diào)控機(jī)制。
【作者單位】: 中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院臨床藥理中心;中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81273594);國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81470535,81370359) 中南大學(xué)博士自主探索創(chuàng)新項(xiàng)目(2016zzts153)
【分類(lèi)號(hào)】:R96
【正文快照】: 細(xì)胞色素P450(CYP450)具有基因多態(tài)性和表型多態(tài)性等特點(diǎn),是造成藥物代謝個(gè)體差異的重要原因,其中細(xì)胞色素P450 3A5(CYP3A5)參與很多常用藥物在人體內(nèi)的代謝[1-3]。CYP的表達(dá)主要取決于其細(xì)胞中微小RNA(miRNA)的水平[4]。本文用miRNA靶點(diǎn)預(yù)測(cè)軟件對(duì)最有可能調(diào)控CYP3A5表達(dá)的mi
【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1223860
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