發(fā)布時間：2017-11-08 22:32

  本文關鍵詞：烏司他丁對血管內(nèi)皮細胞氧化應激損傷的保護作用及機制

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【摘要】：目的探討烏司他丁對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(ECV)-304氧化應激損傷的保護作用及機制。方法將實驗用ECV-304細胞分為5組:正常組不做任何處理;模型組及烏司他丁低、中、高劑量組均先以200μm H_2O_2誘導氧化應激損傷,之后烏司他丁低、中、高劑量組分別加入750、1 500、3 000 U/ml烏司他丁處理。ECV-304細胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中,將處于對數(shù)生長期的ECV-304細胞用于檢測。MTT法檢測細胞活力,二氯熒光素雙醋酸鹽(DCFH-DA)熒光定量法檢測細胞內(nèi)活性氧(ROS)水平,酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,Gries法檢測一氧化氮(NO)含量,流式細胞術檢測細胞凋亡率,分光光度法檢測含半胱天冬酶3(Caspase 3)活性,Western blot分析細胞中凋亡蛋白Bax、Bcl-2含量變化及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路的激活狀況。結(jié)果與正常組比較,模型組中ECV-304細胞活力下降,ROS及MDA含量上升,SOD和NO含量下降,Caspase 3活性上升,Bax表達量提高,Bcl-2、PI3K及磷酸化AKT(P-AKT)表達量下降,差異均具有統(tǒng)計學意義(P均0.01);與模型組比較,烏司他丁各給藥組均能顯著抑制上述模型組變化,差異均具有統(tǒng)計學意義(P均0.05)。結(jié)論烏司他丁通過抑制ROS等物質(zhì)的產(chǎn)生及細胞凋亡可抵抗H_2O_2誘導的ECV-304細胞氧化應激損傷,機制可能與PI3K/AKT信號通路有關。
【作者單位】： 北京市平谷區(qū)醫(yī)院重癥醫(yī)學科;
【分類號】：R96
【正文快照】： 血管內(nèi)皮細胞(vascular endothelial cell)是由單層內(nèi)皮細胞組成,介于血流和血管壁組織之間的具有維持血管壁完整性和血液循環(huán)功能的重要組織。在心臟、腦、腎等重要臟器的缺血再灌注損傷可以造成血管內(nèi)皮細胞嚴重的損傷,是威脅患者生命安全的重要風險之一,過度產(chǎn)生的活性氧(R

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