葡聚糖接枝型Protein A介質(zhì)的層析性能提升
發(fā)布時(shí)間:2017-11-07 19:13
本文關(guān)鍵詞:葡聚糖接枝型Protein A介質(zhì)的層析性能提升
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【摘要】:Sepharose 4FF微球經(jīng)環(huán)氧活化后與葡聚糖溶液反應(yīng),得葡聚糖接枝型瓊脂糖微球,再經(jīng)環(huán)氧活化和偶聯(lián)耐堿型Protein A配基,得葡聚糖接枝型高載量Protein A介質(zhì),測(cè)定了介質(zhì)在線清洗穩(wěn)定性能,并進(jìn)行了熱力學(xué)研究.結(jié)果表明,與常規(guī)Protein A介質(zhì)相比,葡聚糖接枝型Protein A介質(zhì)的最高流速提高約32%,對(duì)抗體h Ig G的動(dòng)態(tài)載量為60.6 mg/m L,分別為常規(guī)介質(zhì)和Mab Select Su Re介質(zhì)載量的123%和95%;經(jīng)40次清洗后,葡聚糖接枝型Protein A介質(zhì)動(dòng)態(tài)載量為原始載量的92%,遠(yuǎn)高于常規(guī)介質(zhì)的84%,與Mab Select Su Re穩(wěn)定性基本一致.3種介質(zhì)對(duì)抗體的結(jié)合均為熵驅(qū)動(dòng)過程,葡聚糖接枝型Protein A介質(zhì)的吸附熱介于Mab Select Su Re和常規(guī)Protein A介質(zhì)之間.
【作者單位】: 中國(guó)礦業(yè)大學(xué)(北京)化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院;中國(guó)科學(xué)院過程工程研究所生化工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;北京石油化工學(xué)院應(yīng)用化學(xué)系;國(guó)家江蘇先進(jìn)生物與化學(xué)制造協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):213062026;21206175;21476241) 國(guó)家科技支撐計(jì)劃資助項(xiàng)目(編號(hào):2013BAB01B03) 國(guó)家重大儀器基金資助項(xiàng)目(編號(hào):2013YQ14040502) 國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):2014AA021006) 北京市大學(xué)生畢業(yè)論文提升基金資助項(xiàng)目(編號(hào):BIPT-SPBYSJ201502)
【分類號(hào)】:R945
【正文快照】: 治療性單克隆抗體(單抗)憑借其良好的治療效果在醫(yī)藥領(lǐng)域越來越受到重視.Protein A介質(zhì)親和層析[1]因操作簡(jiǎn)單、高效等優(yōu)勢(shì)已成為抗體藥物研發(fā)和生產(chǎn)階段的核心純化步驟.為提高單抗純化效率、降低純化成本,高載量、良好的傳質(zhì)性能和穩(wěn)定性能一直是研究者追求的目標(biāo),這些性能與
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1 陳曉虹;吳建國(guó);曹傳平;唐亮;曾賢;范佳君;李玉彬;趙麗麗;劉增田;程凡亮;張繼環(huán);馬連明;宋華;白文;鞠佃文;;一種可用于大規(guī)模單克隆抗體純化的新型Protein A填料[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2014年02期
,本文編號(hào):1153738
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