甲苯磺丁脲等9種CYP探針?biāo)幬矬w內(nèi)肝清除率預(yù)測
發(fā)布時(shí)間：2017-11-04 13:14
本文關(guān)鍵詞：甲苯磺丁脲等9種CYP探針?biāo)幬矬w內(nèi)肝清除率預(yù)測
更多相關(guān)文章： IVIVE 探針?biāo)幬?/b> 人肝微粒體 肝模型 藥物微粒體蛋白游離率fum 個(gè)體差異
【摘要】：多種藥物在個(gè)體和種族間的代謝呈現(xiàn)出顯著差異性,對于治療指數(shù)比較窄的藥物,若不能預(yù)估其個(gè)體差異,就可能導(dǎo)致嚴(yán)重的毒性反應(yīng),甚至死亡。如果一個(gè)藥物在用于臨床之前,其在人群中的安全治療范圍可以預(yù)測,藥物開發(fā)的效率將會(huì)得到改善。目前體外體內(nèi)外推法(IVIVE,in vitro-in vivo extrapolation)使研究人員有機(jī)會(huì)在研究體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)之前獲得藥物體內(nèi)代謝的定量數(shù)據(jù)。體外體內(nèi)外推法(IVIVE),是用數(shù)學(xué)模型由藥物體外性質(zhì)(藥物溶出的速率或程度)或體外藥動(dòng)學(xué)預(yù)測其體內(nèi)特性(血藥濃度或藥物吸收量)或體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)的方法。由藥物的體外內(nèi)在清除率Clint,in vitro預(yù)測體內(nèi)肝清除率(CLh)是IVIVE的重要研究之一。目前應(yīng)用較多的體外清除率數(shù)據(jù)主要來源于肝微粒、肝細(xì)胞、肝切片等。肝微粒體的體外內(nèi)在清除率(Clint,in vitro)是體外數(shù)據(jù)的主要來源之一。隨著研究的不斷深入,IVIVE的研究方法日趨增多,本研究總結(jié)以往的預(yù)測方法,選擇其中應(yīng)用較廣的三種方法(Obach-fup,Rb法、Berezhkovskiy-fup,app,Rb法與Poulin-fuliver,Rb法)預(yù)測9種CYP探針?biāo)幬?CYP1A2探針非那西汀、CYP2A6探針-香豆素、CYP2B6探針-安非他酮、CYP2C8探針-紫杉醇、CYP2C9探針-甲苯磺丁脲、CYP2C19探針-奧美拉唑鈉、CYP2D6探針-右美沙芬、CYP2E1探針-氯唑沙宗、CYP3A探針-咪達(dá)唑侖)的體內(nèi)肝清除率。并采用平均折合誤差(Average-fold error,afe)評價(jià)藥物體內(nèi)肝清除率預(yù)測的準(zhǔn)確度,當(dāng)afe值在0.5-2.0范圍內(nèi)時(shí)預(yù)測準(zhǔn)確。本研究還考慮了藥物微粒體蛋白游離率(藥物在微粒體混合體系中的游離率(fum))對預(yù)測準(zhǔn)確度afe的影響,測定了藥物在本實(shí)驗(yàn)室條件下的fum值。以評價(jià)fum對預(yù)測準(zhǔn)確度afe的影響。預(yù)測體內(nèi)肝清除率的參數(shù)主要有每克肝微粒體蛋白的含量(MPPGL)、肝臟重量(LW),肝血流量(Qh)和體重(BW)等五個(gè)參數(shù),目前體內(nèi)CLh預(yù)測的研究,普遍采用這些參數(shù)的平均值進(jìn)行預(yù)測,忽略了參數(shù)個(gè)體值的變異,以致無法預(yù)知藥物在體內(nèi)代謝的個(gè)體差異。本研究采用五種參數(shù)的個(gè)體值,預(yù)測藥物的體內(nèi)肝清除率,考察五種參數(shù)個(gè)體值的變異對預(yù)測結(jié)果個(gè)體差異的影響。同時(shí),研究還考慮了預(yù)測方法對預(yù)測結(jié)果個(gè)體差異的影響。以期,為預(yù)測藥物體內(nèi)肝清除率的個(gè)體差異提供依據(jù),為預(yù)測藥物臨床治療范圍的研究提供參考。方法1藥物微粒體蛋白體游離率(fum)的測定測定5種探針?biāo)幬锏膄um(紫杉醇與咪達(dá)唑侖因文獻(xiàn)報(bào)道的fum值,與本實(shí)驗(yàn)室所用的微粒體蛋白濃度一致,研究不再測定)。首先,在空白體系(不含人肝微粒體)中,采用超濾法測定藥物在高中低三個(gè)濃度下通過超濾膜的比率;再在不同濃度的微粒體蛋白體系(非那西汀-0.3mg/ml,香豆素-0.3mg/ml,甲苯磺丁脲-0.5mg/ml,奧美拉唑鈉-0.5mg/ml,右美沙芬-0.2mg/ml)中,測定高中低三個(gè)濃度的超濾液中游離藥物的濃度;最后,用藥物在空白體系中的通過率校正計(jì)算得到混合肝微粒體體系中實(shí)際游離藥物的濃度,以計(jì)算藥物的fum值。2數(shù)據(jù)的收集收集本實(shí)驗(yàn)室測定的105例樣本的體外內(nèi)在清除率(Clint,in vitro)、每克肝臟微粒體蛋白的含量(MPPGL)、肝臟重量(LW),肝血流量(Qh),體重(BW)/體表面積(BSA)等五種參數(shù)。3體內(nèi)肝清除率(CLh)的預(yù)測采用Obach-fup,Rb法、Berezhkovskiy-fup,app,Rb法與Pouli-fuliver,Rb法等三種方法預(yù)測藥物的體內(nèi)肝清除率CLh,評估預(yù)測方法對藥物體內(nèi)CLh預(yù)測準(zhǔn)確度的影響;引入藥物的fum值預(yù)測藥物的體內(nèi)肝清除率,評價(jià)其對預(yù)測準(zhǔn)確度的影響。4體內(nèi)CLh個(gè)體差異的預(yù)測及其影響因素采用Clint in vitro、MPPGL、LW、Qh、BW等五種參數(shù)的個(gè)體值預(yù)測藥物的體內(nèi)肝清除率,評價(jià)五種參數(shù)個(gè)體值的差異對預(yù)測結(jié)果個(gè)體差異的影響。采用三種預(yù)測方法預(yù)測藥物體內(nèi)CLh的個(gè)體差異,評價(jià)預(yù)測方法對預(yù)測準(zhǔn)確度的影響。5預(yù)測準(zhǔn)確性(afe)評價(jià)預(yù)測的準(zhǔn)確性是用平均折合誤差afe(Average-fold error)值評價(jià)。兩倍的預(yù)測精密度限制是允許的,對應(yīng)afe值是0.5-2.0。一個(gè)方法預(yù)測完全準(zhǔn)確的afe值是1。6統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對各項(xiàng)數(shù)據(jù)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。對于非正態(tài)分布的數(shù)據(jù),采取非參數(shù)檢驗(yàn)進(jìn)行相關(guān)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α為0.05,P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1藥物微粒體蛋白游離率(fum)1.1藥物超濾膜的通過率空白體系(不含人肝微粒體)中,香豆素、甲苯磺丁脲在三個(gè)濃度的通過率一致,平均通過率分別為88.94%、93.86%、79.4%,計(jì)算這三個(gè)藥物的fum值時(shí),采用平均通過率進(jìn)行計(jì)算。而右美沙芬在高中低三個(gè)濃度的通過率不同,且隨濃度增加通過率與有增加趨勢,分別為94.45%(320μM)、88.40%(40μM)、80.56%(10μM),非那西汀在高中低的游離率分別為:94.44%(400μM)、95.79%(50μM)、86.97(12.5μM)%,與奧美拉唑鈉79.0%(7.832μM)、76.0%(62.5μM)、83.2%(250μM),因此,計(jì)算非那西汀、右美沙芬與奧美拉唑鈉fum值時(shí)采用其對應(yīng)濃度的通過率。1.2藥物微粒體蛋白游離率(fum)5種探針?biāo)幬锓謩e在其高中低三個(gè)濃度所測的fum值,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,取三個(gè)濃度的平均值做為該藥物的微粒體蛋白游離率fum。非那西汀(0.3mg/ml)、香豆素(0.3mg/ml)、噢美拉唑鈉(0.5mg/ml)、甲苯磺丁脲(0.5mg/ml)、右美沙芬(0.2mg/ml)在對應(yīng)微粒體蛋白濃度下的fum值分別為:97.22%、94.01%、90.8%、97.66%、93.36%。五種探針?biāo)幬镌谔囟ǖ奈⒘ｓw蛋白濃度體系中的游離率較大,均大于90%。2預(yù)測的9種CYP探針?biāo)幬矬w內(nèi)CLh2.1三種方法預(yù)測藥物的體內(nèi)肝清除率9種CYP探針?biāo)幬?安非他酮與氯唑沙宗均是口服制劑,沒有靜脈給藥的體內(nèi)清除率數(shù)據(jù),本研究不做其預(yù)測的準(zhǔn)確度評價(jià)。其他7種探針?biāo)幬锊捎肙bach-fup,Rb法甲苯磺丁脲與咪達(dá)唑侖兩個(gè)藥物的預(yù)測值在體內(nèi)清除率的2倍范圍內(nèi)(其afe值分別為0.57、2.03),預(yù)測準(zhǔn)確;Berezhkovskiy-fup,app,Rb法的預(yù)測結(jié)果,只有咪達(dá)唑侖預(yù)測準(zhǔn)確,其afe值為2.03;采用Poulin-fuliver,Rb法預(yù)測,預(yù)測結(jié)果均在2倍范圍之外。三種方法,Obach-fup,Rb法預(yù)測準(zhǔn)確度較高。2.3 fum值對預(yù)測準(zhǔn)確度的影響三種方法的預(yù)測準(zhǔn)確度方面,咪達(dá)唑侖(afe值≥2),當(dāng)加入fum值預(yù)測時(shí),afe值增大,預(yù)測準(zhǔn)確度降低;其他6個(gè)藥物(預(yù)測值低于實(shí)測值),當(dāng)加入fum值預(yù)測時(shí),afe增大,預(yù)測準(zhǔn)確度增加(甲苯磺丁脲Obach-fup,Rb法雖預(yù)測準(zhǔn)確(afe值為0.57),但仍屬偏低預(yù)測)。對于預(yù)測不準(zhǔn)確的探針?biāo)幬?采用fum值校正后,未達(dá)到預(yù)測準(zhǔn)確性的要求,即預(yù)測結(jié)果在體內(nèi)觀測值得2倍范圍之外。3預(yù)測探針?biāo)幬矬w內(nèi)CLh的個(gè)體差異范圍3.1五種參數(shù)對預(yù)測CLh個(gè)體差異的影響對于第2部分預(yù)測準(zhǔn)確的甲苯磺丁脲與咪達(dá)唑侖,兩個(gè)藥物的CLh的個(gè)體差異分別為49.7倍、21.3倍,其95%PI的差異分別為25.0倍、5.1倍。五種參數(shù)個(gè)體值的差異,對預(yù)測結(jié)果個(gè)體差異影響最大的是MPPGL(個(gè)體差異分別為:2.5倍與12.5倍)與Clint,in vitro(個(gè)體差異范圍為:24.2倍,24.7倍),其次是體重、肝重與肝血流量(個(gè)體差異范圍都約在2倍范圍內(nèi))。其中肝血流量的個(gè)體值差異對預(yù)測結(jié)果個(gè)體差異影響最小。3.2預(yù)測方法與fum值對體內(nèi)CLh個(gè)體差異的影響同一方法預(yù)測9種CYP探針?biāo)幬锏捏w內(nèi)CLh,采用fum值校正后,甲苯磺丁脲與紫杉醇的個(gè)體差異沒有變化,其他5種探針?biāo)幬镱A(yù)測結(jié)果的個(gè)體差異倍數(shù)均減小。未加入fum值預(yù)測時(shí),不同方法之間,預(yù)測結(jié)果的個(gè)體差異也不同,除甲苯磺丁脲外,其余探針?biāo)幬矬w內(nèi)CLh個(gè)體差異最大的是Obach-fup,Rb法預(yù)測的,其次是Berezhkovskiy-fupapp,Rb法,CLh個(gè)體差異最小的是Poulin-fuliver,Rb法。這個(gè)結(jié)果,在加入fum值校正的結(jié)果中,也可以見到。結(jié)論1.藥物微粒蛋白游離率(fum)較大,藥物體內(nèi)肝清除率預(yù)測準(zhǔn)確性不依賴于fum值的校正,但fum值可以改善藥物的預(yù)測準(zhǔn)確度。2.三種方法預(yù)測9種探針?biāo)幬顲Lh,Obach-fup,RB法預(yù)測準(zhǔn)確度較高,9種CYP探針?biāo)幬镏屑妆交嵌‰迮c咪達(dá)唑侖預(yù)測準(zhǔn)確。3.甲苯磺丁脲與咪達(dá)唑侖預(yù)測的體內(nèi)肝清除率CLh個(gè)體差異較大(21.3-49.7倍),預(yù)測參數(shù)(Clint in vitro、MPPGL、LW、Qh、BW)個(gè)體值的變異對預(yù)測結(jié)果的個(gè)體差異有影響,Clint in vitro、MPPGL影響較大;預(yù)測的體內(nèi)肝清除率CLh的個(gè)體差異也受預(yù)測方法與fum值的影響。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R96
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 吳行偉;高洪志;李海燕;李媛媛;曲恒燕;梁宇光;王曉芳;郝光濤;;注射用紫杉醇脂質(zhì)體與市售紫杉醇注射液在中國腫瘤患者中的藥動(dòng)學(xué)特征比較研究[J];中國藥學(xué)雜志;2010年23期
，本文編號(hào)：1139566
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/1139566.html
最近更新
教材專著
