本文關鍵詞：甲苯磺丁脲等9種CYP探針藥物體內(nèi)肝清除率預測

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【摘要】：多種藥物在個體和種族間的代謝呈現(xiàn)出顯著差異性,對于治療指數(shù)比較窄的藥物,若不能預估其個體差異,就可能導致嚴重的毒性反應,甚至死亡。如果一個藥物在用于臨床之前,其在人群中的安全治療范圍可以預測,藥物開發(fā)的效率將會得到改善。目前體外體內(nèi)外推法(IVIVE,in vitro-in vivo extrapolation)使研究人員有機會在研究體內(nèi)藥代動力學之前獲得藥物體內(nèi)代謝的定量數(shù)據(jù)。體外體內(nèi)外推法(IVIVE),是用數(shù)學模型由藥物體外性質(zhì)(藥物溶出的速率或程度)或體外藥動學預測其體內(nèi)特性(血藥濃度或藥物吸收量)或體內(nèi)藥動學的方法。由藥物的體外內(nèi)在清除率Clint,in vitro預測體內(nèi)肝清除率(CLh)是IVIVE的重要研究之一。目前應用較多的體外清除率數(shù)據(jù)主要來源于肝微粒、肝細胞、肝切片等。肝微粒體的體外內(nèi)在清除率(Clint,in vitro)是體外數(shù)據(jù)的主要來源之一。隨著研究的不斷深入,IVIVE的研究方法日趨增多,本研究總結(jié)以往的預測方法,選擇其中應用較廣的三種方法(Obach-fup,Rb法、Berezhkovskiy-fup,app,Rb法與Poulin-fuliver,Rb法)預測9種CYP探針藥物(CYP1A2探針非那西汀、CYP2A6探針-香豆素、CYP2B6探針-安非他酮、CYP2C8探針-紫杉醇、CYP2C9探針-甲苯磺丁脲、CYP2C19探針-奧美拉唑鈉、CYP2D6探針-右美沙芬、CYP2E1探針-氯唑沙宗、CYP3A探針-咪達唑侖)的體內(nèi)肝清除率。并采用平均折合誤差(Average-fold error,afe)評價藥物體內(nèi)肝清除率預測的準確度,當afe值在0.5-2.0范圍內(nèi)時預測準確。本研究還考慮了藥物微粒體蛋白游離率(藥物在微粒體混合體系中的游離率(fum))對預測準確度afe的影響,測定了藥物在本實驗室條件下的fum值。以評價fum對預測準確度afe的影響。預測體內(nèi)肝清除率的參數(shù)主要有每克肝微粒體蛋白的含量(MPPGL)、肝臟重量(LW),肝血流量(Qh)和體重(BW)等五個參數(shù),目前體內(nèi)CLh預測的研究,普遍采用這些參數(shù)的平均值進行預測,忽略了參數(shù)個體值的變異,以致無法預知藥物在體內(nèi)代謝的個體差異。本研究采用五種參數(shù)的個體值,預測藥物的體內(nèi)肝清除率,考察五種參數(shù)個體值的變異對預測結(jié)果個體差異的影響。同時,研究還考慮了預測方法對預測結(jié)果個體差異的影響。以期,為預測藥物體內(nèi)肝清除率的個體差異提供依據(jù),為預測藥物臨床治療范圍的研究提供參考。方法1藥物微粒體蛋白體游離率(fum)的測定測定5種探針藥物的fum(紫杉醇與咪達唑侖因文獻報道的fum值,與本實驗室所用的微粒體蛋白濃度一致,研究不再測定)。首先,在空白體系(不含人肝微粒體)中,采用超濾法測定藥物在高中低三個濃度下通過超濾膜的比率;再在不同濃度的微粒體蛋白體系(非那西汀-0.3mg/ml,香豆素-0.3mg/ml,甲苯磺丁脲-0.5mg/ml,奧美拉唑鈉-0.5mg/ml,右美沙芬-0.2mg/ml)中,測定高中低三個濃度的超濾液中游離藥物的濃度;最后,用藥物在空白體系中的通過率校正計算得到混合肝微粒體體系中實際游離藥物的濃度,以計算藥物的fum值。2數(shù)據(jù)的收集收集本實驗室測定的105例樣本的體外內(nèi)在清除率(Clint,in vitro)、每克肝臟微粒體蛋白的含量(MPPGL)、肝臟重量(LW),肝血流量(Qh),體重(BW)/體表面積(BSA)等五種參數(shù)。3體內(nèi)肝清除率(CLh)的預測采用Obach-fup,Rb法、Berezhkovskiy-fup,app,Rb法與Pouli-fuliver,Rb法等三種方法預測藥物的體內(nèi)肝清除率CLh,評估預測方法對藥物體內(nèi)CLh預測準確度的影響;引入藥物的fum值預測藥物的體內(nèi)肝清除率,評價其對預測準確度的影響。4體內(nèi)CLh個體差異的預測及其影響因素采用Clint in vitro、MPPGL、LW、Qh、BW等五種參數(shù)的個體值預測藥物的體內(nèi)肝清除率,評價五種參數(shù)個體值的差異對預測結(jié)果個體差異的影響。采用三種預測方法預測藥物體內(nèi)CLh的個體差異,評價預測方法對預測準確度的影響。5預測準確性(afe)評價預測的準確性是用平均折合誤差afe(Average-fold error)值評價。兩倍的預測精密度限制是允許的,對應afe值是0.5-2.0。一個方法預測完全準確的afe值是1。6統(tǒng)計方法采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對各項數(shù)據(jù)資料進行統(tǒng)計學分析。對于非正態(tài)分布的數(shù)據(jù),采取非參數(shù)檢驗進行相關分析。檢驗水準α為0.05,P0.05認為有統(tǒng)計學意義。結(jié)果1藥物微粒體蛋白游離率(fum)1.1藥物超濾膜的通過率空白體系(不含人肝微粒體)中,香豆素、甲苯磺丁脲在三個濃度的通過率一致,平均通過率分別為88.94%、93.86%、79.4%,計算這三個藥物的fum值時,采用平均通過率進行計算。而右美沙芬在高中低三個濃度的通過率不同,且隨濃度增加通過率與有增加趨勢,分別為94.45%(320μM)、88.40%(40μM)、80.56%(10μM),非那西汀在高中低的游離率分別為:94.44%(400μM)、95.79%(50μM)、86.97(12.5μM)%,與奧美拉唑鈉79.0%(7.832μM)、76.0%(62.5μM)、83.2%(250μM),因此,計算非那西汀、右美沙芬與奧美拉唑鈉fum值時采用其對應濃度的通過率。1.2藥物微粒體蛋白游離率(fum)5種探針藥物分別在其高中低三個濃度所測的fum值,沒有統(tǒng)計學差異,取三個濃度的平均值做為該藥物的微粒體蛋白游離率fum。非那西汀(0.3mg/ml)、香豆素(0.3mg/ml)、噢美拉唑鈉(0.5mg/ml)、甲苯磺丁脲(0.5mg/ml)、右美沙芬(0.2mg/ml)在對應微粒體蛋白濃度下的fum值分別為:97.22%、94.01%、90.8%、97.66%、93.36%。五種探針藥物在特定的微粒體蛋白濃度體系中的游離率較大,均大于90%。2預測的9種CYP探針藥物體內(nèi)CLh2.1三種方法預測藥物的體內(nèi)肝清除率9種CYP探針藥物,安非他酮與氯唑沙宗均是口服制劑,沒有靜脈給藥的體內(nèi)清除率數(shù)據(jù),本研究不做其預測的準確度評價。其他7種探針藥物采用Obach-fup,Rb法甲苯磺丁脲與咪達唑侖兩個藥物的預測值在體內(nèi)清除率的2倍范圍內(nèi)(其afe值分別為0.57、2.03),預測準確;Berezhkovskiy-fup,app,Rb法的預測結(jié)果,只有咪達唑侖預測準確,其afe值為2.03;采用Poulin-fuliver,Rb法預測,預測結(jié)果均在2倍范圍之外。三種方法,Obach-fup,Rb法預測準確度較高。2.3 fum值對預測準確度的影響三種方法的預測準確度方面,咪達唑侖(afe值≥2),當加入fum值預測時,afe值增大,預測準確度降低;其他6個藥物(預測值低于實測值),當加入fum值預測時,afe增大,預測準確度增加(甲苯磺丁脲Obach-fup,Rb法雖預測準確(afe值為0.57),但仍屬偏低預測)。對于預測不準確的探針藥物,采用fum值校正后,未達到預測準確性的要求,即預測結(jié)果在體內(nèi)觀測值得2倍范圍之外。3預測探針藥物體內(nèi)CLh的個體差異范圍3.1五種參數(shù)對預測CLh個體差異的影響對于第2部分預測準確的甲苯磺丁脲與咪達唑侖,兩個藥物的CLh的個體差異分別為49.7倍、21.3倍,其95%PI的差異分別為25.0倍、5.1倍。五種參數(shù)個體值的差異,對預測結(jié)果個體差異影響最大的是MPPGL(個體差異分別為:2.5倍與12.5倍)與Clint,in vitro(個體差異范圍為:24.2倍,24.7倍),其次是體重、肝重與肝血流量(個體差異范圍都約在2倍范圍內(nèi))。其中肝血流量的個體值差異對預測結(jié)果個體差異影響最小。3.2預測方法與fum值對體內(nèi)CLh個體差異的影響同一方法預測9種CYP探針藥物的體內(nèi)CLh,采用fum值校正后,甲苯磺丁脲與紫杉醇的個體差異沒有變化,其他5種探針藥物預測結(jié)果的個體差異倍數(shù)均減小。未加入fum值預測時,不同方法之間,預測結(jié)果的個體差異也不同,除甲苯磺丁脲外,其余探針藥物體內(nèi)CLh個體差異最大的是Obach-fup,Rb法預測的,其次是Berezhkovskiy-fupapp,Rb法,CLh個體差異最小的是Poulin-fuliver,Rb法。這個結(jié)果,在加入fum值校正的結(jié)果中,也可以見到。結(jié)論1.藥物微粒蛋白游離率(fum)較大,藥物體內(nèi)肝清除率預測準確性不依賴于fum值的校正,但fum值可以改善藥物的預測準確度。2.三種方法預測9種探針藥物CLh,Obach-fup,RB法預測準確度較高,9種CYP探針藥物中甲苯磺丁脲與咪達唑侖預測準確。3.甲苯磺丁脲與咪達唑侖預測的體內(nèi)肝清除率CLh個體差異較大(21.3-49.7倍),預測參數(shù)(Clint in vitro、MPPGL、LW、Qh、BW)個體值的變異對預測結(jié)果的個體差異有影響,Clint in vitro、MPPGL影響較大;預測的體內(nèi)肝清除率CLh的個體差異也受預測方法與fum值的影響。
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R96

【參考文獻】

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1 吳行偉;高洪志;李海燕;李媛媛;曲恒燕;梁宇光;王曉芳;郝光濤;;注射用紫杉醇脂質(zhì)體與市售紫杉醇注射液在中國腫瘤患者中的藥動學特征比較研究[J];中國藥學雜志;2010年23期

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本文編號：1139566