本文關(guān)鍵詞：間苯三酚類衍生物治療帕金森氏病作用和機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 帕金森氏病 間苯三酚類衍生物 神經(jīng)炎癥 多巴胺能神經(jīng)元 神經(jīng)炎癥 間苯三酚類衍生物 蛋白質(zhì)組學(xué) Src激酶 PTEN

【摘要】：第一部分：間苯三酚類衍生物對(duì)帕金森氏病模型的神經(jīng)保護(hù)作用研究帕金森氏病(Parkinson's Disease,PD)是最常見(jiàn)的神經(jīng)退行性疾病之一,主要病理特征為患者中腦多巴胺能神經(jīng)元進(jìn)行性變性死亡以及細(xì)胞內(nèi)路易氏小體的形成,導(dǎo)致黑質(zhì)-紋狀體多巴胺能系統(tǒng)功能減退,從而使患者出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)障礙。間苯三酚類衍生物WYD1-8和WYD7-6是由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所植化室合成得到的新型化合物,前期研究提示兩個(gè)化合物均有較好的抑制炎癥作用,相關(guān)內(nèi)容已申請(qǐng)化合物專利保護(hù)。本研究在前期研究工作的基礎(chǔ)上,采用經(jīng)典的1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6- tetrahydropyridine, MPTP)建立體內(nèi)PD模型及經(jīng)典致炎劑脂多糖(Lipopolysacchride,LPS)建立體外神經(jīng)炎癥模型,進(jìn)一步考察WYD1-8和WYD7-6的神經(jīng)保護(hù)及抑制神經(jīng)炎癥作用。體內(nèi)采用小鼠腹腔注射MPTP致亞急性PD模型,考察WYD1-8和WYD7-6的神經(jīng)保護(hù)作用。結(jié)果顯示,化合物WYD1-8和WYD7-6均能明顯改善MPTP致小鼠亞急性帕金森氏病的運(yùn)動(dòng)障礙,并對(duì)小鼠黑質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元具有較強(qiáng)的保護(hù)作用,提高小鼠紋狀體內(nèi)多巴胺(Dopamine, DA)含量。WYD1-8和WYD7-6可顯著抑制黑質(zhì)內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞活化,減少炎癥因子白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(Tumornecrosis factor-α, TNF-α)的釋放。應(yīng)用LPS刺激原代中腦混合培養(yǎng)體系作為體外神經(jīng)炎癥模型,進(jìn)一步考察WYD1-8和WYD7-6神經(jīng)保護(hù)及抑制神經(jīng)炎癥作用。研究發(fā)現(xiàn),化合物WYD1-8和WYD7-6能明顯抑制LPS誘導(dǎo)的原代中腦混合培養(yǎng)體系中小膠質(zhì)細(xì)胞活化,減少其活化標(biāo)志物離子鈣結(jié)合受體蛋白1 (Ionized calcium binding adapter molecule 1, Iba-1)表達(dá)及炎癥因子IL-1β和TNF-α的釋放。WYD1-8和WYD7-6能提高體系中酪氨酸羥化酶(Tyrosine hydroxylase, TH)表達(dá)水平,保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元。本研究證實(shí)了WYD1-8和WYD7-6具有較強(qiáng)的神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)炎癥抑制作用,其治療PD作用與其抑制小膠質(zhì)細(xì)胞過(guò)度活化劑保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元密切相關(guān)。本研究表明化合物WYD1-8和WYD7-6是具有良好前景的治療PD的候選化合物。第二部分：間苯三酚類衍生物WYD7-6抑制神經(jīng)炎癥作用機(jī)制研究本論文第一部分研究結(jié)果表明,間苯三酚類衍生物WYD7-6神經(jīng)保護(hù)作用與其抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活化介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥相關(guān)。然而其抑制神經(jīng)炎癥的具體機(jī)制尚不十分清楚。因此本部分研究?jī)?nèi)容我們對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行了初步探討。應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)方法,對(duì)WYD7-6處理后的MPTP加丙磺舒致小鼠慢性PD模型中腦總蛋白進(jìn)行分析比較。通過(guò)Western blot法驗(yàn)證以及查閱相關(guān)文獻(xiàn),我們重點(diǎn)考察了Akt信號(hào)通路的上游調(diào)控分子第十號(hào)染色體缺失的磷酸酶張力蛋白同源物基因編碼蛋白(Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 3-phosphatase and dual-specificity protein phosphatase, PTEN)及其相關(guān)信號(hào)通路。應(yīng)用LPS刺激BV2小膠質(zhì)細(xì)胞株作為神經(jīng)炎癥模型,首先考察PTEN與神經(jīng)炎癥的關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)小膠質(zhì)細(xì)胞中的PTEN被抑制后,LPS引起的炎癥通路激活以及炎癥因子釋放均增加,說(shuō)明PTEN在調(diào)控神經(jīng)炎癥中發(fā)揮負(fù)性調(diào)控作用。PTEN的活性主要受到其上游磷酸酶的調(diào)控,蛋白質(zhì)組學(xué)定量結(jié)果及Western blot驗(yàn)證結(jié)果顯示,非受體酪氨酸蛋白激酶Src在不同處理組中腦中表達(dá)變化最明顯,因此我們對(duì)Src激酶進(jìn)行進(jìn)一步研究。應(yīng)用siRNA干擾技術(shù)干擾Src激酶的表達(dá)后,LPS引起的炎癥反應(yīng)減少,說(shuō)明Src激酶參與炎癥反應(yīng)的發(fā)生。Src激酶表達(dá)降低后,LPS誘導(dǎo)的PTEN及Akt磷酸水平均降低,表明Src激酶對(duì)炎癥的調(diào)節(jié)作用可能是通過(guò)對(duì)PTEN及Akt通路的調(diào)控來(lái)實(shí)現(xiàn)的。應(yīng)用LPS刺激BV2作為神經(jīng)炎癥模型,考察WYD7-6對(duì)于Src/PTEN/Akt通路的影響。結(jié)果表明,WYD7-6可抑制Src激酶介導(dǎo)的炎癥信號(hào)通路激活。在中腦原代培養(yǎng)體系中,干擾Src表達(dá)后,加入LPS、1-甲基-4-苯基-吡啶離子(1-methyl-4-phenylpyridinium, MPP+)以及α-突觸核蛋白(a-synuclein)等刺激劑間接或直接損傷神經(jīng)元,考察WYD7-6是否通過(guò)抑制Src激酶發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。結(jié)果顯示,干擾Src表達(dá)后,WYD7-6的神經(jīng)保護(hù)作用被削弱,表明Src介導(dǎo)了WYD7-6抑制神經(jīng)炎癥的作用。體外應(yīng)用c-Src激酶抑制劑篩選試劑盒檢測(cè)WYD7-6對(duì)c-Src激酶的直接抑制作用,結(jié)果顯示W(wǎng)YD7-6并不能直接抑制酶活性,表明Src激酶并不是WYD7-6的直接作用靶點(diǎn),WYD7-6可能通過(guò)調(diào)節(jié)Src激酶上游蛋白分子從而抑制Src激酶及其下游信號(hào)通路的激活。本部分機(jī)制研究表明Src/PTEN/Akt信號(hào)通路在WYD7-6發(fā)揮抑制神經(jīng)炎癥作用中有重要作用。進(jìn)一步機(jī)制研究表明WYD7-6并不直接作用于Src激酶,可能是通過(guò)其他上游調(diào)控蛋白發(fā)揮調(diào)控作用,需要進(jìn)行進(jìn)一步探索。
【關(guān)鍵詞】：帕金森氏病 間苯三酚類衍生物 神經(jīng)炎癥 多巴胺能神經(jīng)元 神經(jīng)炎癥 間苯三酚類衍生物 蛋白質(zhì)組學(xué) Src激酶 PTEN
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：

• 英文縮略詞表(Abbreviation)5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 第一部分：間苯三酚類衍生物對(duì)帕金森氏病模型的神經(jīng)保護(hù)作用研究11-34
• 前言11-12
• 材料與方法12-21
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-29
• 1. WYD1-8和WYD7-6改善MPTP致小鼠PD模型的運(yùn)動(dòng)障礙21-23
• 2. WYD1-8和WYD7-6提高M(jìn)PTP致小鼠PD模型紋狀體內(nèi)多巴胺含量23
• 3. WYD1-8和WYD7-6抑制MPTP致小鼠PD模型黑質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元損傷23-24
• 4. WYD1-8和WYD7-6降低MPTP致小鼠PD模型中腦內(nèi)炎癥因子含量24-25
• 5. WYD1-8和WYD7-6抑制LPS誘發(fā)原代中腦混合培養(yǎng)體系中小膠質(zhì)細(xì)胞活化25-26
• 6. WYD1-8和WYD7-6降低LPS誘發(fā)原代中腦混合培養(yǎng)體系中炎癥因子的釋放26-27
• 7. WYD1-8和WYD7-6保護(hù)LPS誘發(fā)原代中腦混合培養(yǎng)體系中多巴胺能神經(jīng)元損傷27-29
• 討論29-31
• 小結(jié)31-32
• 參考文獻(xiàn)32-34
• 第二部分：間苯三酚類衍生物WYD7-6抑制神經(jīng)炎癥作用機(jī)制研究34-55
• 前言34
• 材料與方法34-41
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果41-49
• 1. 差異蛋白質(zhì)組學(xué)尋找WYD7-6抑制神經(jīng)炎癥的作用靶點(diǎn)41-43
• 2. PTEN抑制劑增加LPS誘導(dǎo)的Akt磷酸化水平及炎癥因子TNF-α釋放量43-44
• 3. 干擾Src激酶后降低LPS誘導(dǎo)的炎癥因子TNF-α釋放量44-45
• 4. 干擾Src激酶后降低LPS誘導(dǎo)的PTEN及Akt磷酸化45-46
• 5. WYD7-6抑制LPS誘導(dǎo)的Src/PTEN/Akt信號(hào)通路激活46-47
• 6. WYD7-6通過(guò)Src激酶發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用47-48
• 7. WYD7-6對(duì)c-Src酶活性直接無(wú)抑制作用48-49
• 討論49-51
• 小結(jié)51-52
• 參考文獻(xiàn)52-55
• 文獻(xiàn)綜述55-65
• 參考文獻(xiàn)61-65
• 致謝65-67
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷67-68

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 凌海燕;10例帕金森氏病伴焦慮抑郁臨床分析[J];健康心理學(xué)雜志;2000年02期

2 ;四川治療帕金森氏病達(dá)到國(guó)際水平[J];醫(yī)學(xué)信息;2000年03期

3 鐘靜玫,丁里,武紹遠(yuǎn),張金章;帕金森氏病合并進(jìn)行性脊肌萎縮癥1例報(bào)道[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;2001年02期

4 黃蘊(yùn)嫻;殺蟲(chóng)劑可能導(dǎo)致帕金森氏病[J];農(nóng)藥科學(xué)與管理;2001年01期

5 李留芝;帕金森氏病人的心理問(wèn)題分析及對(duì)策[J];現(xiàn)代護(hù)理;2002年02期

6 劉原;西藏地區(qū)首例帕金森氏病丘腦腹外側(cè)核毀損術(shù)患者的護(hù)理體會(huì)[J];西藏科技;2002年01期

7 張杰,韓卓俊;西藏地區(qū)帕金森氏病丘腦腹外側(cè)核毀損術(shù)的治療與護(hù)理[J];西藏科技;2003年12期

8 劉秋華;黃勤;黃新;張鑒文;黃進(jìn)能;胡栓貴;朱壽鴻;李亞平;洪翰明;黃珩紗;;酷似帕金森氏病的特發(fā)性甲狀旁腺機(jī)能減退癥2例分析[J];中國(guó)誤診學(xué)雜志;2007年26期

9 姬松波;;帕金森氏病腦干聽(tīng)覺(jué)誘發(fā)電位變化[J];中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2009年02期

10 劉長(zhǎng)仁;林桂花;郭慶煥;;單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉治療帕金森氏病個(gè)案報(bào)道[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2009年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 符曉蘇;陳伶;;帕金森氏病伴發(fā)抑郁研究進(jìn)展[A];第十二屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合精神疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

2 劉迎暉;呂健;;“細(xì)胞刀”治療帕金森氏病的健康教育[A];全國(guó)外科護(hù)理學(xué)術(shù)會(huì)議暨專題講座論文匯編[C];2000年

3 張留莎;陳佐明;;帕金森氏病與抑郁[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

4 王偉祥;靳瑞領(lǐng);劉景隆;李春華;董子祺;;綜合療法治療帕金森氏病個(gè)例報(bào)導(dǎo)[A];中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)腦血管病康復(fù)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

5 蔣家啟;陳慶良;;帕金森氏病患者的圍術(shù)期處理[A];2008年第七次華東六省一市麻醉學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省麻醉學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2008年

6 楊虹;趙藝?yán)?許順良;鄭旭寧;臧玉峰;王玨;;早期帕金森氏病靜息狀態(tài)腦活動(dòng)局部一致性的改變[A];2012年浙江省放射學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2012年

7 老膺榮;朱泉;;帕金森氏病中醫(yī)思辨[A];2005全國(guó)中醫(yī)腦病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2005年

8 王維;于小平;毛俊;劉晟;;實(shí)驗(yàn)性帕金森氏病的影像學(xué)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第一次全國(guó)介入醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

9 楊春;谷玲;張延軍;;血漿β-內(nèi)啡肽定量檢測(cè)對(duì)帕金森氏病臨床診治的價(jià)值[A];2003年全國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2003年

10 Peter Chung;;靈芝孢子對(duì)帕金森氏病的保護(hù)作用[A];2004靈芝專題研討會(huì)論文摘要集[C];2004年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李志良;咖啡防帕金森氏病[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

2 記者　 杜華斌;遺傳性帕金森氏病研究有重大進(jìn)展[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

3 本報(bào)實(shí)習(xí)生 朱黎麗;帕金森氏病患者應(yīng)堅(jiān)持適當(dāng)體育鍛煉[N];中國(guó)消費(fèi)者報(bào);2005年

4 馮 凱;針灸治療帕金森氏病取得新突破[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

5 ;基因與帕金森氏病危險(xiǎn)密不可分[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2000年

6 副主任醫(yī)師 王素丹;帕金森氏病早期易誤診[N];保健時(shí)報(bào);2004年

7 特約記者 程守勤;帕金森氏病治療莫失良機(jī)[N];家庭醫(yī)生報(bào);2003年

8 王文斗;西藥讓帕金森氏病老人更痛苦[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2007年

9 張?zhí)锟?人類能與環(huán)境和平相處嗎[N];大眾科技報(bào);2001年

10 葉學(xué);治帕金森氏病方[N];民族醫(yī)藥報(bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 李曉紅;臍帶血多能干細(xì)胞對(duì)帕金森氏病的治療潛能[D];山東大學(xué);2012年

2 于芙蓉;帕金森氏病病變的機(jī)理研究與分子伴侶的保護(hù)作用癲癇相關(guān)基因的功能研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2003年

3 馬開(kāi)利;α-synuclein核輸入機(jī)制及功能的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 操勝男;間苯三酚類衍生物治療帕金森氏病作用和機(jī)制的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

2 朱耀祖;氯胺酮對(duì)構(gòu)建6-OHDA誘導(dǎo)的帕金森氏病大鼠模型的影響機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2010年

3 康君芳;經(jīng)顱磁刺激對(duì)帕金森氏病患者的運(yùn)動(dòng)誘發(fā)電位的研究[D];浙江大學(xué);2007年

4 盧海燕;BDNF基因RNA干擾在帕金森氏病發(fā)病機(jī)制中的作用觀察[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

5 田偉;百草枯誘導(dǎo)C57小鼠帕金森氏病的保護(hù)性研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2008年

6 張紅華;帕金森氏震顫的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)[D];浙江工商大學(xué);2015年

7 葉民;帕金森氏病的發(fā)病機(jī)制及干預(yù)因素的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2002年

8 王艷;醌氧化還原酶NQO1對(duì)多巴胺細(xì)胞的保護(hù)作用及其對(duì)帕金森氏病防治作用的研究[D];華東師范大學(xué);2011年

，

本文編號(hào)：1114117