本文關(guān)鍵詞：表達(dá)人抗凝血蛋白的豬內(nèi)皮細(xì)胞與抗凝藥物對(duì)人血小板聚集的影響

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【摘要】：目的:凝血功能紊亂一直是困擾異種器官利用的關(guān)鍵因素。本實(shí)驗(yàn)觀察表達(dá)人抗凝血蛋白的豬動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(p AEC)與抗凝藥物對(duì)人外周血中血小板聚集的影響,為克服異種移植中可能出現(xiàn)的血栓性微血管病(Thrombotic microangiopathy,TMA)與消耗性凝血病(Consumptive coagulopathy,CC)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:①抗凝血藥物對(duì)血小板聚集的影響將抗凝藥物(肝素、低分子肝素、水蛭素)濃度為1 IU/m L,5IU/ml加入到WT-p AEC中,通過血小板聚集檢測(cè)儀,檢測(cè)不同濃度的抗凝藥物對(duì)血小板聚集的影響。②表達(dá)人抗凝血蛋白的豬動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(p AEC)對(duì)人外周血血小板聚集的影響。a用流式細(xì)胞儀檢測(cè)表達(dá)人抗凝血蛋白(α-1,3-半乳糖苷基因敲除[GTKO]、人類補(bǔ)體蛋白調(diào)節(jié)基因[CD46,CD55]、血栓調(diào)節(jié)蛋白基因[TBM]、內(nèi)皮C蛋白受體基因[EPCR])的豬動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞中基因表達(dá)水平;b將轉(zhuǎn)基因豬動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞分為GTKO-p AEC,GTKO/CD46/CD55-p AEC,GTKO/CD46/TBM-p AEC,GTKO/CD46/EPCR-p AEC四組,陽性對(duì)照組為野生型(WT-p AEC),陰性對(duì)照組為人動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(h AEC);c通過血小板聚集檢測(cè)儀,檢測(cè)各種動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)血小板聚集的影響。③表達(dá)人抗凝血蛋白的p AEC與抗凝藥物共同作用時(shí),對(duì)人血小板聚集的影響。將不同濃度的抗凝藥物加入到效果最好的轉(zhuǎn)基因p AEC中通過血小板聚集檢測(cè)儀,檢測(cè)其對(duì)血小板聚集的影響。結(jié)果:①抗凝藥物(肝素、低分子肝素、水蛭素)都能抑制人外周血血小板聚集,1IU/ml的低分子肝素、水蛭素僅能部分抑制人血小板聚集(聚集率分別為15%、29%)。5IU/ml的低分子肝素、水蛭素與1IU/ml的肝素都幾乎能完全抑制人血小板聚集(聚集率分別為3%、4%)。②表達(dá)人抗凝血蛋白的豬動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞GTKO-p AEC,GTKO/CD46/CD55-p AEC,GTKO/CD46/TBM-p AEC,GTKO/CD46/EPCR-p AEC對(duì)人外周血血小板聚集有抑制作用(聚集率分別為44%、39%、27%、33%),其中GTKO/CD46/TBM-p AEC的抑制效果最佳(27%)。③GTKO/CD46/TBM-p AEC與抗凝藥物共同作用人血小板聚集,其聚集率可降至4%。結(jié)論:①抗凝藥物(肝素、低分子肝素、水蛭素)都能抑制人外周血血小板聚集。②表達(dá)人抗凝血蛋白的豬動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞可以明顯降低人血小板聚集率。③在抗凝藥物存在的條件下,表達(dá)人抗凝血蛋白的豬動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞所引起的血小板聚集率可以降低至與人動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的聚集率相類似水平。
【關(guān)鍵詞】：轉(zhuǎn)基因 血小板 血小板聚集 異種移植
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 第1章 緒論9-11
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料11-13
• 第3章 實(shí)驗(yàn)方法13-17
• 第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-25
• 第5章 討論25-29
• 第6章 結(jié)論29-31
• 參考文獻(xiàn)31-39
• 附錄39-41
• 文獻(xiàn)綜述41-49
• 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果49-50
• 附件50-76
• 致謝76

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

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本文編號(hào)：1081253