本文關(guān)鍵詞：利用酶法制備菲律賓蛤仔抗腫瘤肽的研究

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【摘要】：為確定酶解法提取菲律賓蛤仔(Ruditapes philippinarum)抗腫瘤活性多肽的最佳工藝條件,選用5種蛋白酶在相同的料液比、酶解時間和酶添加量、各自最適溫度和pH的條件下酶解菲律賓蛤仔。通過甲醛電位滴定法和Cell counting kit-8(CCK-8)方法分別測定了菲律賓蛤仔酶解液氨基態(tài)氮含量和酶解多肽的抗腫瘤活性,分析了氨基態(tài)氮含量與A549抑制率之間的相關(guān)性。在單因素試驗的基礎(chǔ)上,以人非小細胞肺癌A549抑制率為指標,正交分析優(yōu)化酶解工藝條件。結(jié)果顯示,菲律賓蛤仔的5種酶解產(chǎn)物中,風(fēng)味蛋白酶的酶解液中氨基態(tài)氮含量最高,而胃蛋白酶獲得的酶解多肽抗腫瘤活性最高。胃蛋白酶酶解菲律賓蛤仔正交實驗確定酶解最佳工藝條件為:料液比(w/w)1∶1,pH 2.0,酶解時間1 h,酶添加量2 000 U/g,酶解溫度37℃。當設(shè)定最佳酶解工藝獲得的酶解多肽濃度為20 mg/m L時,其對A549的抑制率為99.83%。研究表明,酶的種類對菲律賓蛤仔酶解液氨基態(tài)氮含量和酶解多肽的抗腫瘤活性有較大影響,菲律賓蛤仔酶解液中氨基態(tài)氮含量與A549抑制率沒有直接的正相關(guān)性。
【作者單位】： 華僑大學(xué)生物化工學(xué)院;福建省水產(chǎn)研究所國家海水魚類加工技術(shù)研發(fā)分中心福建省海洋生物增養(yǎng)殖與高值化利用重點實驗室福建省海洋生物資源開發(fā)利用協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 菲律賓蛤仔 酶解多肽 A 抗腫瘤活性
【基金】：福建省科技重大專項(2014NZ0001-1) 福建省海洋高新產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項([2013]014) 依托平臺福建省海洋經(jīng)濟創(chuàng)新發(fā)展區(qū)域示范項目(2014FJPT01) 廈門南方海洋研究中心項目(14PZY017NF17) 海洋經(jīng)濟創(chuàng)新發(fā)展區(qū)域示范項目(12PYY001SF08)
【分類號】：R943
【正文快照】： 非小肺癌目前的發(fā)病率較高[1-4]。近年來,隨著生物分離純化技術(shù)的發(fā)展,人們不斷發(fā)現(xiàn)具有抑制非小肺癌增殖的天然化合物。如:黃大川等[5]從僧帽牡蠣中提取出一種具有抑制A549細胞增殖作用的低分子活性肽BPO-L;孟翠麗等[6]發(fā)現(xiàn)雷氏大疣蛛毒素具有較強的細胞毒性,可直接殺死A549，

本文編號：1070847