本文關(guān)鍵詞：國產(chǎn)β-淀粉樣蛋白聚合寡聚體的方法及效果初探

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【摘要】：目的探討國產(chǎn)人源性β-淀粉樣蛋白(Aβ)聚合寡聚體的方法及其聚合效果。方法 Aβ40、Aβ42室溫條件分別溶解于純度≥99.0%的六氟異丙醇中,使Aβ濃度至1 mmol/L、20 min;高純氮處理使六氟異丙醇完全揮發(fā)后,添加純度≥99.5%的二甲基亞砜,使Aβ濃度至6 mmol/L,30℃水浴超聲10 min;添加含0.05%十二烷基硫酸鈉的磷酸鹽緩沖液(0.02 mol/L,p H7.4),Aβ濃度至120μmol/L;再用上述緩沖液分別稀釋Aβ至40、80μmol/L,形成3種濃度梯度。37℃恒溫搖床100 r/pmin行聚合反應2、12、24、48、72、96和120 h;SDS-PAGE,銀染處理,分別考察上述條件的聚合效果。結(jié)果 3種濃度的Aβ40寡聚體聚合效果有很大差異:40μmol/L聚合48、120 h,80μmol/L聚合12 h有較明顯的二十二聚體出現(xiàn),120μmol/L聚合≥12 h,有四聚體至十聚體形成。但3種濃度Aβ40形成寡聚體又有一定相似性:均有大量的單體、二聚體、三聚體存在,隨著聚合時間延長,寡聚體總量及高分子量寡聚體形成量并未明顯增加。3種濃度的Aβ42聚合效果有明顯區(qū)別:隨著聚合濃度升高,十二聚體、二十一聚體的形成量逐漸下降,相同聚合時間內(nèi),隨著濃度的升高,四聚體至十聚體形成量逐漸增加;但3種濃度的Aβ42聚合也有相似處:均存在大量的單體、二聚體、三聚體,隨著聚合時間的延長,四聚體至十聚體形成量有增加趨勢,此與Aβ40聚合效果有明顯差異。結(jié)論采用常用的方法均能使國產(chǎn)Aβ40、Aβ42形成寡聚體;總體來講,相對于聚合時間,聚合濃度對形成高分子量的Aβ寡聚體種類影響較大。
【作者單位】： 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院輸血研究所;貴州泰邦生物制品有限公司;
【關(guān)鍵詞】： β-淀粉樣蛋白 聚合 寡聚體 聚合時間 聚合濃度
【基金】：四川省科技支撐計劃項目(2014SZ0123)
【分類號】：R943
【正文快照】： 2002年,人靜脈注射免疫球蛋白(intravenous immuno-globulin,IVIG)被發(fā)現(xiàn)含有天然存在的β-淀粉樣蛋白(amy-loid-beta protein,Aβ)抗體[1]。由于Aβ沉積形成的老年斑是阿爾茨海默癥(Alzheimer's disease,AD)患者腦組織重要的病理特征,再基于“Aβ淀粉樣蛋白學說”[2],近年來,

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1 ;專利文獻[J];日用化學品科學;2009年01期

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1 陳媛梅;;C_(28)的環(huán)狀寡聚體的結(jié)構(gòu)與穩(wěn)定性[A];中國化學會第九屆全國量子化學學術(shù)會議暨慶祝徐光憲教授從教六十年論文摘要集[C];2005年

2 李瀟;詹傳郎;王要兵;姚建年;;吡啶酰亞胺寡聚體[A];中國化學會第26屆學術(shù)年會光化學分會場論文集[C];2008年

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1 劉國軍;硫代α-氨氧基酸和極性側(cè)鏈α-氨氧基酸寡聚體合成、構(gòu)象研究及其初步應用[D];復旦大學;2007年

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本文編號：1018292