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脂質(zhì)體介導(dǎo)CK13基因?qū)θ吮茄拾〩NE1細(xì)胞放療前后細(xì)胞周期及凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-07-31 16:11

  本文關(guān)鍵詞:脂質(zhì)體介導(dǎo)CK13基因?qū)θ吮茄拾〩NE1細(xì)胞放療前后細(xì)胞周期及凋亡的影響


  更多相關(guān)文章: 細(xì)胞角蛋白13基因 鼻咽癌 動(dòng)物模型 細(xì)胞周期 凋亡 放射敏感性


【摘要】:目的: 觀察分析脂質(zhì)體介導(dǎo)CK13基因?qū)β闶笃は卤茄拾┮浦擦龇暖熐昂蠹?xì)胞周期及凋亡的影響,研究CK13基因在鼻咽癌治療中的價(jià)值。 方法: 本實(shí)驗(yàn)先培養(yǎng)細(xì)胞,再進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分成兩大組來進(jìn)行。 第一大組選用HNE1-CK13-A、HNE1-CK13-B、HNE1-pEGFP-N1和HNE1細(xì)胞株分別建立相對(duì)應(yīng)為A1、B1、O1、H1四組動(dòng)物模型(簡稱基因組),每組8只裸鼠。每天觀察裸鼠活動(dòng)及測(cè)量腫瘤大小。待腫瘤長至10mm×10mm左右時(shí),每組處死4只裸鼠并取出腫瘤。將每個(gè)腫瘤分成兩份,一份行HE染色觀察病理類型,另一份行流式細(xì)胞術(shù)分析腫瘤放療前細(xì)胞周期和凋亡的情況。當(dāng)天每組剩下的4只裸鼠用2Gy劑量射線照射治療,2天后再次同條件照射。第二次照射后24小時(shí)處死剩余裸鼠,用流式細(xì)胞儀分析腫瘤放療后細(xì)胞周期和凋亡的情況。 第二大組選用HNEl細(xì)胞株建立NPC動(dòng)物模型。每天觀察裸鼠活動(dòng)及測(cè)量腫瘤大小。待腫瘤長至10mm×10mm左右時(shí),隨機(jī)將裸鼠分成A2、B2、O2、H2四組(簡稱質(zhì)粒組),每組8只裸鼠,分別注射CK13-A、CK13-B、pEGFP-N1基因質(zhì)粒和PBS。第二天,每小組隨機(jī)抽取4只裸鼠予2Gy劑量射線照射治療并做好標(biāo)記。48小時(shí)后四組裸鼠重復(fù)注入質(zhì)粒和PBS。第二天將每組未標(biāo)記的裸鼠處死并取出腫瘤。將每個(gè)腫瘤分成兩份,一份行HE染色觀察病理類型,另一份行流式細(xì)胞術(shù)分析放療前細(xì)胞周期和凋亡的情況。當(dāng)天每組剩余的4只裸鼠再次放療。24小時(shí)后處死剩余裸鼠,用流式細(xì)胞儀分析腫瘤放療后細(xì)胞周期和凋亡的情況。 通過兩大組實(shí)驗(yàn)觀察CK13基因?qū)Ρ茄拾┮浦擦黾?xì)胞的細(xì)胞周期和凋亡的影響,分析其放療前后的變化,為下一步研究CK13基因提高放療敏感性的作用機(jī)制提供線索。 結(jié)果: 1、實(shí)驗(yàn)期間所有裸鼠無死亡情況,存活率為100%;種瘤后腋下均形成明顯肉眼可見的移植瘤,成瘤率為100%。 2、A1、B1組和A2、B2組裸鼠腫瘤放療后生長明顯變慢、停止甚至縮小,但未出現(xiàn)腫瘤消退,O1、H1組和O2、H2組僅生長減慢,體積比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 3、A1、B1組和A2、B2組移植瘤放療后瘤重比O1、H1組和O2、H2組輕(P0.05),且A1、B1組和A2、B2組抑瘤率較高。 4、兩大組移植瘤病檢顯示均為低分化鱗癌。 5、兩大組移植瘤細(xì)胞G2/M期的細(xì)胞數(shù)放療后比放療前均增加(P0.05),A1、B1組和A2、B2組G2/M期細(xì)胞數(shù)在放療前后比O1、H1組和O2、H2組均多,但在放療后增多更明顯(P0.05)。 6、兩大組移植瘤細(xì)胞凋亡率放療后比放療前均增加,但A1、B1組和A2、B2組比O1、H1組和O2、H2組增加更明顯(P0.05)。 結(jié)論: CK13基因聯(lián)合放療能使鼻咽癌HNE1細(xì)胞移植瘤生長變慢,停止甚至縮小。CK13基因能調(diào)控鼻咽癌移植瘤細(xì)胞周期的分布,使G2/M期細(xì)胞數(shù)增加,而G2/M期又是放療相對(duì)敏感的一個(gè)時(shí)期。CK13基因聯(lián)合放療比單純放療使鼻咽癌移植瘤細(xì)胞凋亡更多,能誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡。CK13基因可能通過改變細(xì)胞周期及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來提高鼻咽癌HNE1細(xì)胞的放射敏感性,可能成為鼻咽癌治療的一個(gè)新的靶基因。
【關(guān)鍵詞】:細(xì)胞角蛋白13基因 鼻咽癌 動(dòng)物模型 細(xì)胞周期 凋亡 放射敏感性
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R739.63
【目錄】:
  • 目錄4-5
  • 英文縮略詞5-7
  • 摘要7-9
  • ABSTRACT9-12
  • 前言12-16
  • 材料和方法16-26
  • 實(shí)驗(yàn)材料16-18
  • 實(shí)驗(yàn)方法18-26
  • 結(jié)果26-35
  • 討論35-40
  • 結(jié)論40-41
  • 參考文獻(xiàn)41-46
  • 綜述46-54
  • 參考文獻(xiàn)51-54
  • 碩士研究生在讀期間發(fā)表及投稿的論文54-55
  • 致謝55

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 魯大鵬;邢汝東;湯曉飛;張敏;立本行宏;尾崎登喜雄;;細(xì)胞角蛋白(CK)13及其基因在術(shù)后性上頜囊腫襯里上皮中的表達(dá)[J];北京口腔醫(yī)學(xué);2006年02期

2 魯大鵬;趙宵虹;賈海鷗;邢汝東;;細(xì)胞角蛋白(CK)13在鼻腭囊腫襯里上皮中的表達(dá)及其意義[J];北京口腔醫(yī)學(xué);2007年01期

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5 張玉霞;細(xì)胞周期調(diào)控研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊(cè);2001年05期

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7 賈海鷗;劉思思;劉三霞;魯大鵬;張敏;尾崎登喜雄;;CK18和CK13在含有纖毛柱狀細(xì)胞的根端囊腫襯里上皮中的表達(dá)[J];口腔頜面外科雜志;2009年02期

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本文編號(hào):599989

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