本文關(guān)鍵詞：氯通道阻斷劑對(duì)bFGF誘導(dǎo)下的晶狀體上皮細(xì)胞增殖和遷移的影響

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【摘要】：目的: 觀察氯通道阻斷劑NPPB和DIDS對(duì)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）誘導(dǎo)的晶狀體上皮細(xì)胞HLE-B3增殖及遷移的影響。 方法: 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的晶狀體上皮細(xì)胞（HLE B-3）為研究對(duì)象，用10μg/L bFGF作用的細(xì)胞作為bFGF對(duì)照組；常規(guī)培養(yǎng)的晶狀體上皮細(xì)胞作為空白對(duì)照組；實(shí)驗(yàn)組即不同濃度氯通道阻斷劑NPPB（50、100、150μmol/L）及DIDS（10、50、100μmol/L）分別加入含10μg/L bFGF的HLE B-3細(xì)胞的培養(yǎng)液中共同作用24h、48h及72h。采用CCK-8法、免疫細(xì)胞化學(xué)法及PI單染流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)晶狀體上皮細(xì)胞增殖率、細(xì)胞增殖核抗原KI-67蛋白的表達(dá)率及細(xì)胞周期的變化，進(jìn)而觀察氯通道阻斷劑對(duì)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）誘導(dǎo)的晶狀體上皮細(xì)胞HLE-B3增殖的影響。 同樣取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的晶狀體上皮細(xì)胞（HLE B-3）為研究對(duì)象，用10μg/L bFGF作用的細(xì)胞作為bFGF對(duì)照組；常規(guī)培養(yǎng)的晶狀體上皮細(xì)胞作為空白對(duì)照組；實(shí)驗(yàn)組即用150μmol/L NPPB和100μmol/L DIDS，并通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)NPPB/DIDS對(duì)bFGF誘導(dǎo)的細(xì)胞遷移的影響。 結(jié)果: 1. CCK-8檢測(cè)表明加入10μg/L bFGF對(duì)HLE B-3細(xì)胞有明顯的促增殖的作用。在bFGF作用下，，氯通道阻斷劑NPPB和DIDS對(duì)晶狀體上皮細(xì)增殖的抑制表現(xiàn)為出劑量及時(shí)間依賴(lài)性（bFGF+NPPB組：F時(shí)間=305.282，F(xiàn)濃度=18.76，P=0.000；bFGF+DIDS組：F時(shí)間=94.436，F(xiàn)濃度=24.415，P=0.000）。 2.不同濃度的氯通道阻斷劑作用于bFGF誘導(dǎo)的晶狀體上皮細(xì)胞48h后，細(xì)胞內(nèi)Ki-67蛋白表達(dá)細(xì)胞數(shù)有不同程度下降，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（bFGF+NPPB組：F=580.3，P=0.000；bFGF+DIDS組：F=507.4,P=0.000），且呈濃度依賴(lài)性抑制Ki-67表達(dá)。其中150μmol/L NPPB組和100μmol/L DIDS組Ki-67的陽(yáng)性細(xì)胞率分別下降至（18.32±1.23）%和（11.21±1.02）%，與bFGF處理組相比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01，P0.01）。 3. PI染色流式細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果示與空白對(duì)照組和bFGF組相比，150μmol/LNPPB組和100μmol/L DIDS組細(xì)胞增殖能力下降，G0/G1期細(xì)胞比例升高（(F=390.754，P=0.000），S期比例減少（F=166.240，P=0.000）。 4. Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，150μmol/L NPPB及100μmol/L DIDS作用24-48h細(xì)胞遷移數(shù)較10μg/L bFGF處理組少，具有較明顯的抑制作用（F=56.039，578.746，P0.001）。且150μmol/L NPPB及100μmol/L DIDS作用24h后，細(xì)胞遷移抑制率分別為35.44%、54.43%（F=56.039，P0.001）。劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，氯通道阻斷劑150μmol/L NPPB及100μmol/L DIDS作用24h后能到有效地抑制10μg/L bFGF誘導(dǎo)的細(xì)胞橫向遷移，并呈時(shí)間依賴(lài)性。 結(jié)論: 10μg/L bFGF可以促進(jìn)HLE-3細(xì)胞增殖移行，而150μmol/L NPPB及100μmol/LDIDS作用24h能夠可以有效的抑制10μg/L bFGF誘導(dǎo)的LECs增殖及移行。即NPPB/DIDS作為氯通道阻斷劑，在一定范圍內(nèi)能夠抑制由bFGF誘導(dǎo)的人晶狀體上皮細(xì)胞增殖及移行，且呈時(shí)間、濃度雙重依賴(lài)性。
【關(guān)鍵詞】：細(xì)胞增殖 細(xì)胞遷移 氯通道 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 晶狀體上皮細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R779.66
【目錄】：

• 英文縮略語(yǔ)4-5
• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-21
• 材料12-14
• 方法14-21
• 結(jié)果與分析21-28
• 討論28-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 綜述36-46
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 致謝46

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 張光平;背景氯離子通道研究進(jìn)展[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1998年04期

2 申屠形超,姚克,沈凌,周燕,孫朝暉;bFGF對(duì)人晶狀體上皮細(xì)胞增殖的影響[J];眼科新進(jìn)展;2000年02期

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本文編號(hào)：579642