銜接蛋白AP-2在不同發(fā)育時(shí)期小鼠耳蝸毛細(xì)胞中的表達(dá)
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更多相關(guān)文章: 銜接蛋白 內(nèi)毛細(xì)胞 年齡相關(guān)性聽力損失 小鼠
【摘要】:目的通過檢測(cè)不同發(fā)育階段小鼠耳蝸毛細(xì)胞銜接蛋白AP-2蛋白的表達(dá),初步探討其在聽覺發(fā)生、形成中的作用。方法選用出生后7日(P7)、15日(P15)、35日(P35)及16月齡小鼠各20只,分別代表新生小鼠、聽覺發(fā)育階段小鼠、聽覺發(fā)育成熟小鼠及老年小鼠,對(duì)其進(jìn)行ABR檢測(cè),用免疫熒光標(biāo)記技術(shù)結(jié)合激光共聚焦顯微鏡觀察各發(fā)育階段小鼠耳蝸AP-2蛋白的定位與表達(dá),用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)小鼠耳蝸AP-2基因mRNA的表達(dá)。結(jié)果 P15、P35及16月齡小鼠ABR反應(yīng)閾分別為18.67±1.21、13.83±1.47、37.83±7.68dB nHL,P7組小鼠未引出反應(yīng)波形。在小鼠內(nèi)耳發(fā)育不同階段均有不同程度的AP-2蛋白表達(dá),主要定位于耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞胞漿,集中表達(dá)于內(nèi)毛細(xì)胞基底部與帶狀突觸靠近傳入神經(jīng)元區(qū)域,P7、P15、P35及16月齡組小鼠耳蝸AP-2蛋白熒光染色密度值分別為190.91±17.27、494.06±27.63、838.41±38.23和682.65±72.22;AP-2mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為0.53±0.09、1.03±0.02、1.00±0.09和1.03±0.06;與新生小鼠相比較,隨小鼠聽覺的產(chǎn)生和形成,耳蝸AP-2蛋白表達(dá)水平逐漸升高(P0.01),免疫熒光染色提示老年性聾小鼠AP-2蛋白在內(nèi)毛細(xì)胞的表達(dá)量較P35小鼠減少(P0.05),但qRT-PCR分析AP-2基因mRNA的表達(dá)水平與成熟小鼠(P15)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論在小鼠聽覺發(fā)育成熟階段,隨小鼠日齡增加耳蝸AP-2蛋白表達(dá)逐漸增強(qiáng),提示AP-2蛋白的表達(dá)水平可能與聽覺的發(fā)生、形成和維持密切相關(guān)。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;
【關(guān)鍵詞】: 銜接蛋白 內(nèi)毛細(xì)胞 年齡相關(guān)性聽力損失 小鼠
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81470694,30973301,81271080) 重慶市自然基金(CSTC2009BB5170)聯(lián)合資助
【分類號(hào)】:R764
【正文快照】: 耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞帶狀突觸是進(jìn)行聲音編碼的解剖和功能的基本結(jié)構(gòu),聽覺的產(chǎn)生與維持依賴于此內(nèi)毛細(xì)胞突觸活性區(qū)域(active zones,AZs)釋放神經(jīng)遞質(zhì),由此完成機(jī)械-電換能作用[1]。突觸囊泡與突觸前膜融合釋放神經(jīng)遞質(zhì)進(jìn)行聽信號(hào)的傳遞,但是如果沒有有效的胞吞作用,細(xì)胞膜就會(huì)因?yàn)?
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,本文編號(hào):551516
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