發(fā)布時間：2017-07-13 18:05

  本文關鍵詞：AChE缺失或抑制可減少碘酸鈉誘導的視網(wǎng)膜色素上皮及感光細胞凋亡與caspase3表達

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【摘要】：目的：本研究旨在研究AchE在碘酸鈉誘導的RPE及感光細胞凋亡中的表達情況，并探究AchE基因敲除與抑制劑對細胞凋亡的作用。 方法：對C57BL/6小鼠尾靜脈注射較高劑量NaIO3（50毫克/千克），分別在第6小時、第1天、3天、7天猝死取眼球進行蛋白印跡與免疫熒光。對小鼠分別灌胃給予不同劑量的多奈哌齊（0.5、2.5、12.5毫克/千克）預處理3天與不同劑量的柚皮苷（30、60毫克/千克）1天，，NaIO3注射后持續(xù)給藥3天，猝死小鼠取眼球進行蛋白印跡與免疫熒光。分別對AChE+/+和AChE+/-小鼠尾靜脈注射較低劑量NaIO3（25毫克/千克），在第3天猝死取眼球進行蛋白印跡與免疫熒光。采用TUNEL標記感光細胞凋亡情況，免疫熒光技術觀察Caspase3的表達情況，同時采用蛋白印跡技術檢測AchE的表達情況。 結果：較高劑量NaIO3注射顯著誘導細胞凋亡，TUNEL染色發(fā)現(xiàn)注射后6小時即出現(xiàn)RPE凋亡，隨后的感光細胞凋亡在第3天達到高峰，第7天有所回降。同時，蛋白印跡分析與免疫熒光結果表明AChE、Caspase3的表達也是顯著升高的。AChE+/-碘酸鈉注射組的TUNEL陽性細胞與AChE+/+碘酸鈉注射組相比具有明顯差異（P＜0.01）。與PBS灌胃組相比，給予乙酰膽堿酯酶抑制劑會顯著降低凋亡細胞的程度（P＜0.01）。而且不同濃度之間具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。免疫熒光顯示在AChE基因敲除與抑制劑抑制凋亡的同時可見caspases-3的激活受抑。 結論：AChE可能是個促凋亡因子，抑制AChE表達可減少感光細胞凋亡。AChE基因敲除與抑制劑主要抑制caspases-3的激活達到抑制凋亡的效果�？傊�，我們研究結果說明AChE抑制劑可能為將來臨床上治療視網(wǎng)膜退行性疾病提供一個思路。
【關鍵詞】：乙酰膽堿酯酶 細胞凋亡 乙酰膽堿酯酶抑制劑 碘酸鈉
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R774.1
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 中英文縮略詞表7-8
• 第1章 前言8-11
• 第2章 材料與方法11-20
• 2.1 材料11-15
• 2.1.1 動物及分組11-12
• 2.1.2 PCR 所需12
• 2.1.3 抗體12
• 2.1.4 免疫熒光染色所需12
• 2.1.5 溶液配制12-14
• 2.1.6 實驗儀器14-15
• 2.2 實驗方法15-19
• 2.2.1 PCR 分析15-16
• 2.2.2 冰凍切片16
• 2.2.3 免疫熒光染色16-17
• 2.2.4 TUNEL 標記17
• 2.2.5 蛋白印跡17-19
• 2.3 統(tǒng)計學分析19-20
• 第3章 結果20-29
• 3.1 小鼠基因型鑒定20
• 3.2 感光細胞凋亡時期與 AchE 、 Caspase3表達20-22
• 3.2.1 感光細胞凋亡時期20-22
• 3.2.2 不同時期 AchE 、Caspase3表達22
• 3.3 AchE基因敲除對凋亡的影響22-25
• 3.3.1 AchE 基因敲除后凋亡的變化22-24
• 3.3.2 AchE 基因敲除后 AchE 、Caspase 3 表達變化24-25
• 3.4 AchE 抑制劑對凋亡的影響25-29
• 3.4.1 AchE 抑制劑對凋亡的變化25-27
• 3.4.2 AchE 抑制劑對 Caspase3 表達變化27-29
• 第4章 討論29-34
• 第5章 結論34-35
• 致謝35-36
• 參考文獻36-39
• 綜述39-47
• 參考文獻45-47

【引證文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張堅;;奧沙利鉑對人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞增殖及凋亡的影響[J];新鄉(xiāng)醫(yī)學院學報;2015年11期

本文編號：537846