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組織塊半懸浮培養(yǎng)法分離培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞

發(fā)布時(shí)間:2017-07-07 17:25

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【摘要】:目的利用組織塊半懸浮培養(yǎng)法分離培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞。方法分離大鼠視網(wǎng)膜并剪碎,將4~5個(gè)碎塊半懸浮培養(yǎng),培養(yǎng)基為含有體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清并滴加重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子的DMEM/F12培養(yǎng)液,獲得的細(xì)胞用Ⅷ因子相關(guān)抗體鑒定,并使用傳統(tǒng)凍存及復(fù)蘇的方法保存。結(jié)果 24 h組織塊生長固定在培養(yǎng)皿中,6 d可見細(xì)胞從組織塊邊緣游出,并可見多個(gè)細(xì)胞集落,16 d基本鋪滿培養(yǎng)皿。Ⅷ因子相關(guān)抗體染色陽性,細(xì)胞可持續(xù)生長并傳代。結(jié)論用組織塊半懸浮培養(yǎng)法可以簡便的獲得視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞,所獲細(xì)胞性狀穩(wěn)定,可用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學(xué)附屬無錫人民醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠 視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞 免疫組織化學(xué) 細(xì)胞鑒定
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助(編號(hào):81400415) 江蘇省自然科學(xué)基金資助(編號(hào):SBK201222073)~~
【分類號(hào)】:R774.1
【正文快照】: 眼底病是近年來眼科研究的熱點(diǎn),視網(wǎng)膜血管人民醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)。內(nèi)皮細(xì)胞(retinal vascular endothelial cell,RVEC)在1.1.2主要試劑及儀器DMEM/F12培養(yǎng)基、Hanks各種眼底病發(fā)病中都起著關(guān)鍵的作用。因此,簡便平衡鹽溶液(美國Hyclone公司),胎牛血清(Gibco),而有效地分

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孫旭芳,曾水清,王宇哲,李曉青,胡燕華;血管抑素體外對(duì)兔視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞增生的抑制[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年05期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉洪雷;劉軍;張自峰;周健;王雨生;惠延年;;TNF-α對(duì)培養(yǎng)視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞與周細(xì)胞PDGF-B/PDGFR-β表達(dá)的作用[J];國際眼科雜志;2008年12期

2 燕建軍;彭輝燦;王俞方;吳橙香;劉照耀;;銀杏葉提取物對(duì)高糖環(huán)境下人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、凋亡的影響[J];國際眼科雜志;2008年12期

3 熊欣;彭琦;鄭燕林;;水蛭提取物對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF受體-2表達(dá)的影響[J];國際眼科雜志;2009年01期

4 羅賢令;彭輝燦;劉,

本文編號(hào):531156


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