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Ⅰ型單純皰疹病毒感染內(nèi)耳神經(jīng)元的體外實驗研究

發(fā)布時間:2022-02-21 17:59
  第一部分 Ⅰ型單純皰疹病毒感染螺旋神經(jīng)元的體外實驗研究目的:建立Ⅰ型單純皰疹病毒(Herpes Simplex Virus-1, HSV-1)在體外螺旋神經(jīng)元培養(yǎng)體系中的裂解性感染(lytic infection)模型及潛伏感染(latent infection)再激活(Viral reactivation)模型。方法:出生4-6天的Sprague-Dawley大鼠,解剖出蝸軸,進行消化分離后種植于96孔板內(nèi)。一部分神經(jīng)元培養(yǎng)4天后直接加入表達內(nèi)源性綠色熒光蛋白(Green Fluorescent Protein, GFP)的低滴度HSV-1,形成裂解性感染,相差顯微鏡及熒光顯微鏡下觀察神經(jīng)元及膠質(zhì)細胞形態(tài)變化和GFP表達情況:另一部分培養(yǎng)的神經(jīng)元在第二天加入含有阿昔洛韋(Acyclovir, ACV)的培養(yǎng)液,第4天加入HSV-1后并繼續(xù)培養(yǎng)于含有ACV的培養(yǎng)液中,形成潛伏感染,第8天撤去ACV,將培養(yǎng)液換成含有曲古抑菌素(Trichostatin A, TSA)的培養(yǎng)液,熒光顯微鏡下每日觀察GFP表達情況,計數(shù)呈GFP陽性的96孔板的孔數(shù)。搜集裂解性感染模型及潛伏感染模型的細胞上清... 

【文章來源】:復旦大學上海市211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:78 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 Ⅰ型單純皰疹病毒感染螺旋神經(jīng)元的體外實驗研究
    材料與方法
    結(jié)果
        1. 螺旋神經(jīng)元體外培養(yǎng)
        2. 螺旋神經(jīng)元的HSV-1裂解性感染
        3. 螺旋神經(jīng)元的HSV-1潛伏感染
        4. 螺旋神經(jīng)元的HSV-1潛伏感染再激活
    討論
    小結(jié)
第二部分 非甾體消炎藥對Ⅰ型單純皰疹病毒感染體外培養(yǎng)前庭神經(jīng)元的影響
    材料與方法
    結(jié)果
        1. 生理狀態(tài)下前庭神經(jīng)元即可表達COX-1和COX-2
        2. 相差顯微鏡下前庭神經(jīng)元的辨認
        3. HSV-1誘導前庭神經(jīng)元COX的表達
        4. 前庭神經(jīng)元培養(yǎng)體系NSAIDs藥物對HSV-1復制的抑制作用呈濃度依賴性
        5. 外源性PGE_2能一定程度逆轉(zhuǎn)NSAIDs藥物的抑制作用
        6. 吲哚美辛對前庭神經(jīng)元內(nèi)呈潛伏感染的HSV-1再激活的影響
    討論
    小結(jié)
全文總結(jié)
    一. 內(nèi)容總結(jié)
    二. 研究創(chuàng)新點
參考文獻
縮略詞
綜述
    參考文獻
研究生期間發(fā)表論文
致謝



本文編號:3637779

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