Ⅰ型單純皰疹病毒感染內耳神經元的體外實驗研究
發(fā)布時間:2022-02-21 17:59
第一部分 Ⅰ型單純皰疹病毒感染螺旋神經元的體外實驗研究目的:建立Ⅰ型單純皰疹病毒(Herpes Simplex Virus-1, HSV-1)在體外螺旋神經元培養(yǎng)體系中的裂解性感染(lytic infection)模型及潛伏感染(latent infection)再激活(Viral reactivation)模型。方法:出生4-6天的Sprague-Dawley大鼠,解剖出蝸軸,進行消化分離后種植于96孔板內。一部分神經元培養(yǎng)4天后直接加入表達內源性綠色熒光蛋白(Green Fluorescent Protein, GFP)的低滴度HSV-1,形成裂解性感染,相差顯微鏡及熒光顯微鏡下觀察神經元及膠質細胞形態(tài)變化和GFP表達情況:另一部分培養(yǎng)的神經元在第二天加入含有阿昔洛韋(Acyclovir, ACV)的培養(yǎng)液,第4天加入HSV-1后并繼續(xù)培養(yǎng)于含有ACV的培養(yǎng)液中,形成潛伏感染,第8天撤去ACV,將培養(yǎng)液換成含有曲古抑菌素(Trichostatin A, TSA)的培養(yǎng)液,熒光顯微鏡下每日觀察GFP表達情況,計數呈GFP陽性的96孔板的孔數。搜集裂解性感染模型及潛伏感染模型的細胞上清...
【文章來源】:復旦大學上海市211工程院校985工程院校教育部直屬院校
【文章頁數】:78 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 Ⅰ型單純皰疹病毒感染螺旋神經元的體外實驗研究
材料與方法
結果
1. 螺旋神經元體外培養(yǎng)
2. 螺旋神經元的HSV-1裂解性感染
3. 螺旋神經元的HSV-1潛伏感染
4. 螺旋神經元的HSV-1潛伏感染再激活
討論
小結
第二部分 非甾體消炎藥對Ⅰ型單純皰疹病毒感染體外培養(yǎng)前庭神經元的影響
材料與方法
結果
1. 生理狀態(tài)下前庭神經元即可表達COX-1和COX-2
2. 相差顯微鏡下前庭神經元的辨認
3. HSV-1誘導前庭神經元COX的表達
4. 前庭神經元培養(yǎng)體系NSAIDs藥物對HSV-1復制的抑制作用呈濃度依賴性
5. 外源性PGE_2能一定程度逆轉NSAIDs藥物的抑制作用
6. 吲哚美辛對前庭神經元內呈潛伏感染的HSV-1再激活的影響
討論
小結
全文總結
一. 內容總結
二. 研究創(chuàng)新點
參考文獻
縮略詞
綜述
參考文獻
研究生期間發(fā)表論文
致謝
本文編號:3637779
【文章來源】:復旦大學上海市211工程院校985工程院校教育部直屬院校
【文章頁數】:78 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 Ⅰ型單純皰疹病毒感染螺旋神經元的體外實驗研究
材料與方法
結果
1. 螺旋神經元體外培養(yǎng)
2. 螺旋神經元的HSV-1裂解性感染
3. 螺旋神經元的HSV-1潛伏感染
4. 螺旋神經元的HSV-1潛伏感染再激活
討論
小結
第二部分 非甾體消炎藥對Ⅰ型單純皰疹病毒感染體外培養(yǎng)前庭神經元的影響
材料與方法
結果
1. 生理狀態(tài)下前庭神經元即可表達COX-1和COX-2
2. 相差顯微鏡下前庭神經元的辨認
3. HSV-1誘導前庭神經元COX的表達
4. 前庭神經元培養(yǎng)體系NSAIDs藥物對HSV-1復制的抑制作用呈濃度依賴性
5. 外源性PGE_2能一定程度逆轉NSAIDs藥物的抑制作用
6. 吲哚美辛對前庭神經元內呈潛伏感染的HSV-1再激活的影響
討論
小結
全文總結
一. 內容總結
二. 研究創(chuàng)新點
參考文獻
縮略詞
綜述
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