發(fā)布時間：2022-02-17 14:47

　　目的探討PI3K/Akt在通路在中耳膽脂瘤中的表達及意義。方法通過免疫組化檢測膽脂瘤組織中HIF-1α的表達;Spearman相關(guān)性分析HIF-1α與膽脂瘤患者骨質(zhì)破壞程度的相關(guān)性。同時培養(yǎng)膽脂瘤原代細胞（MEC）,檢測缺氧條件下MEC增殖速度的改變及給予PI3K/Akt通路抑制劑對MEC增殖的影響;Western blot檢測PI3K/Akt抑制劑對HIF-1α及PI3K/Akt通路關(guān)鍵蛋白磷酸化的影響。結(jié)果膽脂瘤中HIF-1α的表達為（++）及（+++）細胞比例明顯高于對照組（P<0.05）;膽脂瘤骨質(zhì)破壞程度與HIF-1α的表達呈正相關(guān)（P=0.012）（r值=16.286）;缺氧條件促進MCE增殖,LY294022在缺氧條件下抑制MEC的增殖;缺氧條件下HIF-1α、p-PI3K蛋白及p-Akt蛋白308、492位點都出現(xiàn)不同程度的升高。而給予LY294002干預(yù)后,p-PI3K及p-Akt-308、492位點及HIF-1α被明顯抑制。結(jié)論 PI3K/Akt信號通路在缺氧條件下調(diào)節(jié)膽脂瘤細胞的增殖,對HIF-1α具有正向調(diào)節(jié)作用;通過抑制PI3K/Akt信號通路可以減緩膽... 

【文章來源】：河北醫(yī)藥. 2020,42(15)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

HE染色后正常耳組織與膽脂瘤組織及HIF-1α的表達(HE×200)

中耳膽脂瘤是耳鼻喉科常見的疾病,是一種位于中耳的囊形結(jié)構(gòu),內(nèi)壁為復(fù)層鱗狀上皮,囊外通過纖維組織于骨壁或組織相連,在囊內(nèi)充滿脫落上皮組織、角化物及膽固醇結(jié)晶,因此稱為膽脂瘤。膽脂瘤雖非真性腫瘤,但由于其具有侵襲性、快速增殖、破壞骨質(zhì)結(jié)構(gòu)同時易復(fù)發(fā)的特性,可導致患者嚴重的聽力下降或喪失、前廳功能紊亂,甚至引起顱內(nèi)外并發(fā)癥,影響患者的生命健康。目前對于膽脂瘤形成機制主要有“上皮移行學說” “袋狀內(nèi)陷學說”、“鱗狀上皮化生學說”及“基質(zhì)細胞增殖學說”等[14,15],但具體機制并不明確,由于其具有腫瘤的特性,上皮細胞過度增殖、骨質(zhì)破壞吸收成為研究的重點。Yu等[16]通過對膽脂瘤的基質(zhì)和前基質(zhì)存在炎性細胞浸潤,同時隨著Toll樣受體(TLR)4和促炎細胞TNF-α和IL-β表達的增加,但治理路的侵襲能力、骨質(zhì)破壞能力及聽力喪失程度都顯著增高,Hmood等[17]通過對19例新鮮膽脂瘤組織進行前瞻性定量免疫組化研究發(fā)現(xiàn),Ki-67與CK17的表達較正常組織明顯升高,同時Ki-67與CK17的表達與骨侵蝕評分呈中度正相關(guān)。膽脂瘤內(nèi)大量的上皮細胞增殖氧耗量增大,而其內(nèi)部血管生成的速度不能滿足增殖細胞的需求,同時鼓室負壓袋狀內(nèi)陷,使膽脂瘤內(nèi)呈缺氧的狀態(tài)。在多種腫瘤如肺癌[18]、乳腺癌[19]、卵巢癌[20],缺氧已被證明與腫瘤細胞的增殖、耐藥、侵襲密切相關(guān),然而膽脂瘤作為假性腫瘤此方面的研究較少。HIF-1是細胞核組織在缺氧狀態(tài)下產(chǎn)生的一種氧依賴的轉(zhuǎn)錄因子,由HIF-1α與HIF-1β組成,其中HIF-1α是決定其轉(zhuǎn)錄活性的關(guān)鍵蛋白。在缺氧條件下,HIF-1已被證明可直接影響腫瘤細胞的增殖。Kim等[21]通過惡性間質(zhì)瘤(HMM)進行缺氧誘導后發(fā)現(xiàn),HMM細胞的體外克隆形成顯著增加,同時HMM的侵襲和轉(zhuǎn)移能力都顯著增效,在低密度細胞的增殖速度遠高于常氧條件。Bai等[22]在胃腸道間質(zhì)瘤(GIST)中發(fā)現(xiàn),在缺氧條件下HIF-1α通過上調(diào)FoxM1的表達,促進GIST細胞增殖、細胞周期進程、侵襲、轉(zhuǎn)移,在異種移植瘤中進一步證實了HIF-1α及HIF-1β的作用。本研究中,通過免疫組化檢測膽脂瘤組織中HIF-1α的表達發(fā)現(xiàn),膽脂瘤較正常耳組織HIF-1α的表達明顯升高,說明膽脂瘤中的缺氧環(huán)境能夠激活缺氧誘導因子HIF-1α的表達,同時將膽脂瘤在缺氧條件下培養(yǎng)后,增殖速度明顯高于常氧培養(yǎng),在缺氧條件下培養(yǎng)5 d、7 d后,膽脂瘤的增殖較常氧增殖更為迅速,這與真性腫瘤的研究相一致。通過Sperman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),膽脂瘤骨質(zhì)破壞程度與HIF-1α的表達之前存在等級相關(guān)性,且呈正相關(guān),相關(guān)性較強,即HIF-1α陽性表達程度越高,脂質(zhì)瘤骨質(zhì)破壞程度越高。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]寬頻聲導抗測試聲能吸收率對兒童分泌性中耳炎診斷的研究[J]. 李理,童步升.  安徽醫(yī)科大學學報. 2019(01)
[2]上皮細胞增殖和凋亡在中耳膽脂瘤發(fā)病學的意義（附33例報告）[J]. 祝威,黃冬雁,井玲,張鳳蘭.  臨床耳鼻咽喉科雜志. 2001(07)

博士論文
[1]磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路在中耳膽脂瘤發(fā)病機制中的作用研究[D]. 劉偉.中南大學 2012



本文編號：3629594