目的:Rottlerin源于大戟科植物粗糠柴的成熟果實,是一種天然的多酚化合物。已有研究報道,Rottlerin可以作為多種蛋白的抑制劑,并在許多腫瘤細(xì)胞中,Rottlerin都具有抗腫瘤生物學(xué)活性,但它的分子機(jī)制并不十分明確。Notch1在許多癌癥中都扮演著一個癌基因的角色,因此,如果能使Notch1失活,那應(yīng)該是治療人類癌癥的一個重要策略。在此,我們探究Rottlerin對鼻咽癌細(xì)胞的抗腫瘤的活性,以及是否通過抑制Notch1的表達(dá)來實現(xiàn)。方法:1、通過CTG檢測Rottlerin對鼻咽癌細(xì)胞的增殖影響;2、采用流式細(xì)胞儀檢測Rottlerin對鼻咽癌細(xì)胞的凋亡和周期的影響;3、通過劃痕愈合和Transwell實驗,檢測Rottlerin對鼻咽癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力的影響;4、采用Western blot實驗,檢測Rottlerin對鼻咽癌細(xì)胞的Notch1蛋白表達(dá)的影響;5、轉(zhuǎn)染Notch1的c DNA或si RNA,使Notch1蛋白過表達(dá)或者被敲低,從而進(jìn)一步確定Rottlerin抑制鼻咽癌細(xì)胞發(fā)展的分子機(jī)制。結(jié)果:1、Rottlerin可以抑制CNE1和CNE2細(xì)胞的增殖,... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Rottlerin抑制鼻咽癌細(xì)胞的生長

果 Rottlerin通過下調(diào) Notch1 的表達(dá)發(fā)揮其抗。對細(xì)胞用不同濃度的 Rottlein 處理 48小時 和 72小時后，檢測細(xì)胞。**P<0.01，與對照組對比。2、Rottlerin 可以誘導(dǎo)鼻咽癌細(xì)胞的凋亡和阻滯鼻咽癌細(xì)胞的周期接著，我們探討 Rottlerin 對鼻咽癌細(xì)胞 CNE1 和 CNE2 凋亡的影們在 CNE1和 CNE2 細(xì)胞中分別加入 1μM 和 2μM 的 Rottlerin，作用胞，用凋亡試劑盒中 PI-FITC 染色對細(xì)胞進(jìn)行處理，通過流式細(xì)胞現(xiàn)，CNE1 細(xì)胞在 1μM Rottlerin 作用 48h 后，細(xì)胞的凋亡從 16.4.88%，并且 CNE2 細(xì)胞在 2μ M Rottlerin 作用 48h 后，細(xì)胞的凋亡到 19.14%，如圖 2 所示�？梢�，Rottlerin 可以促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞 CNE亡發(fā)生。CNE1 cells

Rottlerin 通過下調(diào) Notch1 的表達(dá)發(fā)揮其抗鼻咽癌的作用 結(jié)果隨后，我們來探究 Rottlerin 對鼻咽癌細(xì)胞 CNE1 和 CNE2 周期的影響，同樣，我們在 CNE1和 CNE2 細(xì)胞中分別加入 1μM 和 2μM 的 Rottlerin，作用 48h后，收細(xì)胞，用 70%乙醇固定，次日，用 PI染色對細(xì)胞進(jìn)行處理，通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)，CNE1 細(xì)胞在 1μM Rottlerin 作用 48h后，細(xì)胞周期的 G1期從 60.5%增長到 71.93%，2μM 的 Rottlerin 作用 48h 后，G1 期的百分比占到了 89.76%，并且 CNE2細(xì)胞在 2μM Rottlerin 作用 48h 后，細(xì)胞的周期的 G1 期從 51.58%增長到72.5%，4μM 的 Rottlerin 作用 48h 后，G1 期的百分比占到了 79.26%，如圖 3 所示。由此可見，在 Rottlerin 作用下，細(xì)胞的周期被阻滯在了 G1 期。CNE1 cells

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Cancer Therapy with Phytochemicals: Present and Future Perspectives[J]. Muobarak J.Tuorkey.  Biomedical and Environmental Sciences. 2015(11)



本文編號：3622720