目的:Rottlerin源于大戟科植物粗糠柴的成熟果實(shí),是一種天然的多酚化合物。已有研究報(bào)道,Rottlerin可以作為多種蛋白的抑制劑,并在許多腫瘤細(xì)胞中,Rottlerin都具有抗腫瘤生物學(xué)活性,但它的分子機(jī)制并不十分明確。Notch1在許多癌癥中都扮演著一個(gè)癌基因的角色,因此,如果能使Notch1失活,那應(yīng)該是治療人類(lèi)癌癥的一個(gè)重要策略。在此,我們探究Rottlerin對(duì)鼻咽癌細(xì)胞的抗腫瘤的活性,以及是否通過(guò)抑制Notch1的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)。方法:1、通過(guò)CTG檢測(cè)Rottlerin對(duì)鼻咽癌細(xì)胞的增殖影響;2、采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)Rottlerin對(duì)鼻咽癌細(xì)胞的凋亡和周期的影響;3、通過(guò)劃痕愈合和Transwell實(shí)驗(yàn),檢測(cè)Rottlerin對(duì)鼻咽癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力的影響;4、采用Western blot實(shí)驗(yàn),檢測(cè)Rottlerin對(duì)鼻咽癌細(xì)胞的Notch1蛋白表達(dá)的影響;5、轉(zhuǎn)染Notch1的c DNA或si RNA,使Notch1蛋白過(guò)表達(dá)或者被敲低,從而進(jìn)一步確定Rottlerin抑制鼻咽癌細(xì)胞發(fā)展的分子機(jī)制。結(jié)果:1、Rottlerin可以抑制CNE1和CNE2細(xì)胞的增殖,... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Rottlerin抑制鼻咽癌細(xì)胞的生長(zhǎng)

果 Rottlerin通過(guò)下調(diào) Notch1 的表達(dá)發(fā)揮其抗。對(duì)細(xì)胞用不同濃度的 Rottlein 處理 48小時(shí) 和 72小時(shí)后，檢測(cè)細(xì)胞。**P<0.01，與對(duì)照組對(duì)比。2、Rottlerin 可以誘導(dǎo)鼻咽癌細(xì)胞的凋亡和阻滯鼻咽癌細(xì)胞的周期接著，我們探討 Rottlerin 對(duì)鼻咽癌細(xì)胞 CNE1 和 CNE2 凋亡的影們?cè)?CNE1和 CNE2 細(xì)胞中分別加入 1μM 和 2μM 的 Rottlerin，作用胞，用凋亡試劑盒中 PI-FITC 染色對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理，通過(guò)流式細(xì)胞現(xiàn)，CNE1 細(xì)胞在 1μM Rottlerin 作用 48h 后，細(xì)胞的凋亡從 16.4.88%，并且 CNE2 細(xì)胞在 2μ M Rottlerin 作用 48h 后，細(xì)胞的凋亡到 19.14%，如圖 2 所示�？梢�(jiàn)，Rottlerin 可以促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞 CNE亡發(fā)生。CNE1 cells

Rottlerin 通過(guò)下調(diào) Notch1 的表達(dá)發(fā)揮其抗鼻咽癌的作用 結(jié)果隨后，我們來(lái)探究 Rottlerin 對(duì)鼻咽癌細(xì)胞 CNE1 和 CNE2 周期的影響，同樣，我們?cè)?CNE1和 CNE2 細(xì)胞中分別加入 1μM 和 2μM 的 Rottlerin，作用 48h后，收細(xì)胞，用 70%乙醇固定，次日，用 PI染色對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理，通過(guò)流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)，CNE1 細(xì)胞在 1μM Rottlerin 作用 48h后，細(xì)胞周期的 G1期從 60.5%增長(zhǎng)到 71.93%，2μM 的 Rottlerin 作用 48h 后，G1 期的百分比占到了 89.76%，并且 CNE2細(xì)胞在 2μM Rottlerin 作用 48h 后，細(xì)胞的周期的 G1 期從 51.58%增長(zhǎng)到72.5%，4μM 的 Rottlerin 作用 48h 后，G1 期的百分比占到了 79.26%，如圖 3 所示。由此可見(jiàn)，在 Rottlerin 作用下，細(xì)胞的周期被阻滯在了 G1 期。CNE1 cells

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Cancer Therapy with Phytochemicals: Present and Future Perspectives[J]. Muobarak J.Tuorkey.  Biomedical and Environmental Sciences. 2015(11)



本文編號(hào)：3622720