目的:探討FoxM1對鼻咽癌細(xì)胞5-8F增殖遷移的影響及其可能機(jī)制。方法:將化學(xué)合成的靶向FoxM1的siRNA轉(zhuǎn)染鼻咽癌細(xì)胞5-8F（FoxMl-siRNA組）,并設(shè)立空白對照組、陰性對照組,采用RT-PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、及Western blot檢測FoxM1表達(dá)變化。采用]MTT法、FCM法、Transwell法分別檢測下調(diào)FoxM1表達(dá)對細(xì)胞增殖、周期、凋亡、侵襲遷移的影響。Western blot檢測下調(diào)FoxM1表達(dá)后β-catenin、C-Myc、CyclinDl、MMP-2、MMP-9 蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:轉(zhuǎn)染FoxMl-siRNA的5-8F細(xì)胞FoxMl mRNA和蛋白表達(dá)水平降低（P<0.05）。下調(diào)FoxM1表達(dá)可抑制5-8F細(xì)胞增殖（P<0.05）,FoxMl-siRNA組的凋亡率為（22.68±0.67）%,較陰性對照組[（11.74±1.36）%]和空白對照組[（10.94±1.52）%]顯著增加（P<0.05）,細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期。FoxMl-siRNA組遷移細(xì)胞穿膜數(shù)（100.00±10.97）明顯低于陰性對照組（246... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各紐如施轉(zhuǎn)染.，RNpqgh洽FozMlmRNA的表達(dá)

??ＦｏｘＭｌ－ｓｉＲＮＡ組Ｄ（５７０）值增長緩于陰性對照組和空白對照組（Ｐ＜０．０５，圖３），細(xì)??胞增殖受到抑制。陰性對照組和空白對照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＞〇．〇５）。??工０＇］?－？－ＦｍＭｌ－ｓｉＲＮＡ?組??＋＿?ｍ性對照組??Ｉ?５?－?空月對照組??Ｋ??〇Ｊ?；?１?；?４??時(shí)間（?ｆ／ｄ?）??ａ：Ｐ＜?０．０５，與空白對照組和陰性對照組比較??圖３ＭＴＴ法檢測下調(diào)ＦｏｘＭｌ后對５－８Ｆ細(xì)胞增殖的影響??Ｆｉｇ．２?Ｔｈｅ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ?ｃａｐａｂｉｌｉｔｉｅｓ?ｏｆ?５－８Ｆ?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＦｏｘＭｌ－ｓｉＲＮＡ?ｗｅｒｅ??ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ＭＴＴ?ａｓｓａｙ??２．３下調(diào)ＦｏｘＭｌ表達(dá)誘導(dǎo)５－８Ｆ細(xì)胞凋亡??細(xì)胞轉(zhuǎn)染４８?ｈ后采用流式細(xì)胞術(shù)檢測５－８Ｆ細(xì)胞凋亡率，結(jié)果顯示，??ＦｏｘＭｌ－ｓｉＲＮＡ組的凋亡率較陰性對照組和空白對照組明顯提高（Ｐ＜０．０５

２．３下調(diào)ＦｏｘＭｌ表達(dá)誘導(dǎo)５－８Ｆ細(xì)胞凋亡??細(xì)胞轉(zhuǎn)染４８?ｈ后采用流式細(xì)胞術(shù)檢測５－８Ｆ細(xì)胞凋亡率，結(jié)果顯示，??ＦｏｘＭｌ－ｓｉＲＮＡ組的凋亡率較陰性對照組和空白對照組明顯提高（Ｐ＜０．０５，圖４）；??陰性對照組和空白對照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＞０．０５）。??ＦｍＭｌｄＨＮＡ組?陰性對照組?空ｆｔ對照ｆｆｌ??＾ｉｒａ－ｗ?Ｉ?ｆｚ－ｏｉ?盧?１ＰＫ１?ｎ切?１０１?ｆｗｅ??氣．??ｉｔｆｉ?叫?叫?ｉ?％－?ｊ｜??ｓｔｎ?＿?＿?ｆｔ?一?Ｉ：?■?＿?＿??震?５．?■?■?■??＿？——週狀．挪砂ＩＲＬ?＾?ｄ－Ｍ——Ｉ——ｉ—??１０＂?１０＇?Ｉ０１?Ｉ０３?１０＊?＼（ｆ?１０１?Ｉ０２?ｉｏ３?１０４?１０°?１０Ｊ?Ｉ０１?１０３?１?２＿?３??Ａｎｎｃｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ?Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ?Ａｎｎｒａｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ?＾?－??Ａ：流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡；Ｂ：細(xì)胞凋亡率半定量分析１：?ＦｏｘＭｌ－ｓｉＲＮＡ組；２：陰??性對照組；３：空白對照組；ａ：Ｐ＜０．０５，與空白對照組和陰性對照組比較??圖４流式細(xì)胞術(shù)檢測下調(diào)ＦｏｘＭｌ表達(dá)后對５－８Ｆ細(xì)胞凋亡的影響??Ｆｉｇ．４?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｎ?ａｐｏｐｔｏｓｉｓ?ｒａｔｅ?ｏｆ?５－８Ｆ?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＦｏｘＭｌ－ｓｉＲＮＡ?ｗｅｒｅ??ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?Ｆｌｏｗ?ｃｙ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]叉頭結(jié)構(gòu)域抑制物6（FDI-6）通過下調(diào)細(xì)胞核FoxM1增加喉癌細(xì)胞凋亡并抑制其侵襲和遷移[J]. 劉亞男,祝琳,文韜宇,萬婕,雷越,陳鴻雁.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(05)
[2]Wnt信號通路在腫瘤調(diào)控方面的研究進(jìn)展[J]. 張世蘋,張旭.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2017(01)
[3]FoxM1和COX-2在鼻咽癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J]. 江黎珠,王棚,陳鴻雁.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(06)



本文編號：3619331