目的:鼻咽癌是世界范圍內(nèi)尤其是我國潮汕地區(qū)最為常見的頭頸部腫瘤之一,起病隱匿而致大多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)較晚,預后較為兇險。目前對鼻咽癌的治療以放療為主化療為輔,盡管治療手段的飛速發(fā)展,可對于患者5年生存率并沒有顯著提高。更為甚者鼻咽癌的發(fā)病機制仍不甚明了。近年來眾多研究顯示長鏈非編碼RNA（Longnon-coding RNA,lncRNA）對于生命活動的調(diào)節(jié)功能具有及其重要意義,因此本研究擬主要研究lncRNAPCAT7與鼻咽癌之間的關系。探討PCAT7在鼻咽癌中的表達變化,明確PCAT7對鼻咽癌細胞生物學活性的影響,并探討其在鼻咽癌發(fā)生發(fā)展中所涉及的潛在分子機制。方法:第一部分:本研究選取50例鼻咽癌患者的手術取得的腫瘤組織作為實驗組,并以其腫瘤組織鄰近的正常組織（經(jīng)病理檢查確認）作為對照組,通過實時定量PCR（qRT-PCR）檢測鼻咽癌組織中l(wèi)ncRNAPCAT7的表達。隨后,本研究通過6種鼻咽癌細胞系和1種正常鼻咽上皮細胞系在細胞水平進一步展開研究:培養(yǎng)鼻咽癌細胞系 CNE-2,HNE-1,C666-1,NONE-1,SUNE-1,CNE-1 作為癌性細胞實驗組,人鼻咽上皮細胞NP-6... 

【文章來源】：武漢大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２?ＰＣＡＴ７在鼻咽癌細胞系中表達上調(diào)

ｑＲＴ－ＰＣＲ?實驗檢測?６?組鼻咽癌細胞系（ＣＮＥ－２，?ＨＮＥ－１，Ｃ６６６－１，ＨＯＮＥ－１，??ＳＵＮＥ－１，?ＣＮＥ－１）和１組對照組上皮細胞系（ＮＰ－６９）中ＰＣＡＴ７的表達水平。??結果如圖１．２所示，ＰＣＡＴ７在所有鼻咽癌細胞系中的表達均比在ＮＰ－６９中顯著增??高。ＰＣＡＴ７在ＣＮＥ－１中的水平增加了?７．３７倍，而在ＳＵＮＥ－１中的表達水平更高，??增加了?８．３６?倍，在?ＣＮＥ－２，ＨＮＥ－１，Ｃ６６６－１，?ＨＯＮＥ－１?細胞中分別增加了?３．５４、??４．７７、５．５２、３．６７倍，因此，本研宄選擇ＣＮＥ－１和ＳＵＮＥ－１這兩種細胞進行后續(xù)??實驗的研究。??１。１?＊??丨Ｌｉｉｉｉｌｌ??ＮＰ－６９?ＣＮＥ－２?ＨＮＥ－Ｉ?Ｃ６６６－Ｉ?ＨＯＭＥ－１?ＣＮＥ－１?ＳＵＮＥ－１??圖１．２?ＰＣＡＴ７在鼻咽癌細胞系中表達上調(diào)。ｑＲＴ－ＰＣＲ實驗檢測了?６株鼻咽癌細胞系和１株對??１７??

?－ＧＡＡＣＡＴＧＣＡＧＴＣＴＡＧＧＡＡＣＣＧＧＣＡ－３，的ｓｉＲＮＡ－１具有最為顯著的基因沉默??效應，可使目的基因的表達減少約７５％（圖１．４），能夠滿足實驗需求，因此ｓｉＲＮＡ－１??被用作后續(xù)實驗的研宄。??１．２ｔ??Ｚ??？２?１０－??Ｓ?＊??Ｃ．?０．８－?★?Ｔ??￥?ｉＴ?＊?Ｔ?丄??￥?Ｉ?。６－?Ｔ?丄?＊??＾ｂ?丄?＊工??ＣＪ?０．４－?丄??｜?＊?工??ｇ?。２－霸?Ｉ??０．０－Ｉ??—???ｓ＾Ｘ?ＳＷＶ?ｓｖｒ、??￣ＣＮＥ－１?ＳＩＮＥ－１??圖１．４轉(zhuǎn)染各組ｓｉＲＮＡ后ＣＮＥ－Ｉ和ＳＵＮＥ－ｌ細胞的ｌｎｃＲＮＡＰＣＡＴ７的相對表達量??Ｆｉｇｕｒｅ?１．４?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ＰＣＡＴ７?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ａｆｔｅｒ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ．?ｓｈ－ＰＣＡＴ７＃ｌ．?ｓｈ－ＰＣＡＴ７＃２．??ｏｒ?ｓｈ－ＰＣＡＴ７＃３?ｉｎ?ＣＮＥ－１?ａｎｄ?ＳＵＮＥ－ｌｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ．?＊Ｐ?＜?０．０５．?Ｍｅａｎｓ?士?ＳＥＭ?ａｒｅ?ｓｈｏｗｎ．?Ａｓｓａｙｓ??ｗｅｒｅ?ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ?ｉｎ?ｔｒｉｐｌｉｃａｔｅ．?Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｗａｓ?ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ?ｕｓｉｎｇ?ｓｔｕｄｅｎｔ?Ｗｅｓｔ．??１．３．６?ＩｎｃＲＮＡ?ＰＣＡＴ７－ｓｉＲＮＡ干擾作用可抑制鼻咽癌細胞增殖和克隆形成??本實驗采用ＣＣＫ－８法檢測鼻咽癌細胞系ＣＮＥ－１和ＳＵＮＥ－１在轉(zhuǎn)染ｓｉＲＮ后??細胞增殖的改變。我們把實驗分為ｓｈ－ＰＣＡＴ７組合ｓｈ－ＮＣ組

【參考文獻】：
期刊論文
[1]miR-149促進鼻咽癌細胞侵襲和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)變（英文）[J]. 羅朝輝,張李洋,李征,江琛,代亞飛,劉曉萍,鄭瑛,俞海波,向娟娟,李桂源.  中南大學學報(醫(yī)學版). 2011(07)
[2]Ⅲ、Ⅳ a期鼻咽癌患者放療同期化療加輔助化療的療效[J]. 胡巧英,劉鵬,王磊,付真富.  癌癥. 2007(04)



本文編號：3572838