目的通過體外正常小鼠原代三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)模型和正常小鼠上皮損傷修復(fù)模型,檢測CNTF對小鼠三叉神經(jīng)節(jié)中p-STAT3的表達情況,并研究其在小鼠角膜神經(jīng)再生過程中的機制。方法體外培養(yǎng)正常小鼠原代三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,分為正常組,AGE組/Stattic組,AGE+睫狀神經(jīng)生長因子（CNTF）組/Stattic+睫狀神經(jīng)生長因子（CNTF）組,通過Western Blot檢測三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中p-STAT3的表達情況,通過免疫熒光染色檢測三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突生長變化。體內(nèi)利用鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)I型糖尿病小鼠,通過免疫熒光染色和Western Blot檢測糖尿病小鼠中p-STAT3的表達情況。正常小鼠結(jié)膜下注射藥物,分為正常對照組,Stattic組和Stattic+CNTF組,通過WesternBlot檢測小鼠三叉神經(jīng)節(jié)中p-STAT3的表達情況,并建立小鼠上皮損傷修復(fù)模型,通過熒光素鈉染色觀察CNTF對上皮及神經(jīng)修復(fù)的影響。結(jié)果在體外培養(yǎng)的三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中,與正常組相比,AGE組p-STAT3表達降低,三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突生長明顯減少（P<0.05）;與AGE組相比,加入CNTF后三叉神... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１小鼠三！神經(jīng)中ＡＧＥ的表達??

ＳＴＡＴ３和ＮＦ２００，結(jié)果＆示糖尿病小鼠Ｈ叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中熒光強度明顯減弱，表??明Ｐ－ＳＴＡＴ３的表達在糖尿病小鼠三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中較少，ＳＴＡＴ３倩號通路活化??增加〔圖２ｋ??ｐ－ＳＴＡＴ－３?ＮＦ２００?ｍｅｒｇｅ??纖??ｍｍｍ??圖２小鼠三叉神經(jīng)中ｐ－ＳＴＡＴ３的表達（免疫熒光）??２２??

分別提取正常Ｃ５７小鼠和糖尿病小鼠三叉神經(jīng)中的總蛋白，行Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ，??結(jié)果顯示，與正常Ｃ５７小鼠（０．２６６±０．０６６３）相比，糖尿病小鼠威叉神經(jīng)中ｐ－??３丁八�。潮磉_量（０．１３５５±０．０４７２）顯著下降（卩＜０．０５）（圖３）。??Ｃｏｎ?Ｄｉａ??０．００４＾?＊??ｐ－ｓｔａｔ３?二二二，?＝?￣????ｑ?０．００３－?Ｉ??＾?｜?〇?０．００２－??ｓｔａｔ３?—?￣［￣??ＧＡＰＤＨ?痛〇〇〇〇上＿＾??，???�！�，??圖３小鼠三叉神經(jīng)中ｐ－ＳＴＡＴ３的表達（Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ）??３?ＡＧＥ減弱三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突生長，ＣＮＴＦ可促進被減弱的軸突生??長??體外培養(yǎng)原代小鼠三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，分為三組，第一組直接用Ｌａｍｉｎｉｎ對８??孔板進行包被，其他兩組在包被過程中加入ＭＧ０２００｜ｉＭ，使Ｌａｍｉｎｉｎ糖基化成??為Ｌａｍｉｎｉｎ－ＡＧＥｓ，細(xì)胞收集完成后在第三組中加入ＣＮＴＦ５０ｎｇ，培養(yǎng)４８ｈ后對??三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突行免疫熒光染色

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3550856