第三代LMP1 CAR-T細胞的制備及對鼻咽癌細胞殺傷作用研究
發(fā)布時間:2021-12-19 01:57
鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是耳鼻咽喉頭頸外科最常見的惡性腫瘤,常因病灶復發(fā)和頭頸部淋巴結轉移而影響患者生存質量。目前放療為鼻咽癌治療的首選,但是由于鼻咽癌早期癥狀并不典型,患者往往錯過治療的最佳階段,徹底清除鼻咽癌細胞存在較大困難。以T細胞過繼治療為基礎發(fā)展而來的嵌合抗原受體(chimeric antigen receptor,CAR)T細胞治療技術因其特有的靶向性,特異性殺傷腫瘤細胞成為腫瘤免疫治療的“新貴”。目前,以CD19為標靶的代表性CAR-T細胞治療血液系統惡性腫瘤(特別是B細胞前體急性淋巴細胞白血。┤〉妹黠@的療效,并被美國FDA批準上市。雖有CD19 CAR-T細胞順利治愈復發(fā)性腦膠質瘤的個案,然而大部分實體瘤缺少特異性靶標和體內免疫逃逸機制,始終是CAR-T細胞應用于實體瘤必須攻克的兩大難點。研究表明,鼻咽癌可由EB病毒感染所致。EB病毒介導鼻咽上皮細胞非極化,通過對EMT通路的調控誘導鼻咽部上皮細胞的轉化,干擾正常鼻粘膜細胞的生理功能,促進鼻咽癌細胞的增殖、遷移、侵襲,并且抑制其凋亡。EB病毒潛伏膜蛋白1(latent memb...
【文章來源】:南京醫(yī)科大學江蘇省
【文章頁數】:69 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
LMP1CAR慢病毒表達載體的構建
1 CAR 慢病毒表達載體在 X-293T 細胞中的表達。泳道;泳道 2:CD19 CAR 轉染的 X-293T 細胞;泳道 3:LT 細胞。e expression of LMP1 CAR lentiviral expression vector in cted X-293T cells; 2: X-293T cells transfected by CD19 CActed by LMP1 CAR.
圖 1:T 細胞與 LMP1 CAR-T 細胞表面抗原的檢測胞術檢測鼻咽癌細胞表面抗原 LMP1 的表達數期生長的鼻咽癌細胞 CNE1、CNE2、HONE1、C666-1 人 LMP1 抗體,二抗選擇 FITC 標記鼠源抗羊的熒光抗體照,流式細胞術檢測鼻咽癌細胞表面抗原 LMP1 的表達檢測鼻咽癌的結果如圖紅色曲線,同型對照抗體檢測結果果表明,鼻咽癌細胞 CNE1 中 LMP1 的表達與同型對照LMP1 高表達;鼻咽癌細胞 CNE2 與 C666-1 中 LMP1 的表分,為 LMP1 低表達;而鼻咽癌細胞 HONE1 與 SUNE1 對照抗體并不能區(qū)分,為 LMP1 低表達甚至不表達(圖 2)擇 LMP1 高表達的鼻咽癌細胞株 CNE1,LMP1 低表達的及 LMP1 不表達的鼻咽癌細胞株 HONE1 用于后續(xù)的研究
【參考文獻】:
期刊論文
[1]宮頸癌細胞高遷移率族警報素的分泌與腫瘤浸潤淋巴細胞的相關性[J]. 李晶,魏楓,楊帆,鄭禹,趙華,任秀寶. 中國腫瘤生物治療雜志. 2017(03)
[2]T cells expressing a LMP1-specific chimeric antigen receptor mediate antitumor effects against LMP1-positive nasopharyngeal carcinoma cells in vitro and in vivo[J]. Xiaojun Tang,Yan Zhou,Wenjie Li,Qi Tang,Renjie Chen,Jin Zhu,Zhenqing Feng. The Journal of Biomedical Research. 2014(06)
本文編號:3543560
【文章來源】:南京醫(yī)科大學江蘇省
【文章頁數】:69 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
LMP1CAR慢病毒表達載體的構建
1 CAR 慢病毒表達載體在 X-293T 細胞中的表達。泳道;泳道 2:CD19 CAR 轉染的 X-293T 細胞;泳道 3:LT 細胞。e expression of LMP1 CAR lentiviral expression vector in cted X-293T cells; 2: X-293T cells transfected by CD19 CActed by LMP1 CAR.
圖 1:T 細胞與 LMP1 CAR-T 細胞表面抗原的檢測胞術檢測鼻咽癌細胞表面抗原 LMP1 的表達數期生長的鼻咽癌細胞 CNE1、CNE2、HONE1、C666-1 人 LMP1 抗體,二抗選擇 FITC 標記鼠源抗羊的熒光抗體照,流式細胞術檢測鼻咽癌細胞表面抗原 LMP1 的表達檢測鼻咽癌的結果如圖紅色曲線,同型對照抗體檢測結果果表明,鼻咽癌細胞 CNE1 中 LMP1 的表達與同型對照LMP1 高表達;鼻咽癌細胞 CNE2 與 C666-1 中 LMP1 的表分,為 LMP1 低表達;而鼻咽癌細胞 HONE1 與 SUNE1 對照抗體并不能區(qū)分,為 LMP1 低表達甚至不表達(圖 2)擇 LMP1 高表達的鼻咽癌細胞株 CNE1,LMP1 低表達的及 LMP1 不表達的鼻咽癌細胞株 HONE1 用于后續(xù)的研究
【參考文獻】:
期刊論文
[1]宮頸癌細胞高遷移率族警報素的分泌與腫瘤浸潤淋巴細胞的相關性[J]. 李晶,魏楓,楊帆,鄭禹,趙華,任秀寶. 中國腫瘤生物治療雜志. 2017(03)
[2]T cells expressing a LMP1-specific chimeric antigen receptor mediate antitumor effects against LMP1-positive nasopharyngeal carcinoma cells in vitro and in vivo[J]. Xiaojun Tang,Yan Zhou,Wenjie Li,Qi Tang,Renjie Chen,Jin Zhu,Zhenqing Feng. The Journal of Biomedical Research. 2014(06)
本文編號:3543560
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