PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路抑制劑在視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞增殖機(jī)制中的作用研究
發(fā)布時(shí)間:2021-11-27 08:56
目的:探討PI3K/Akt/mTOR通路是否在人眼增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變(PVR)中表達(dá)及其意義,并通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)對(duì)人D407RPE細(xì)胞系檢測(cè)PI3K、Akt、mTOR、p70S6k、4EBP-1的表達(dá),并應(yīng)用mTOR特異的抑制劑雷帕霉素(Rapamycin,RAPA,Rapa)、PI3K抑制劑LY294002對(duì)其進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性治療,對(duì)其劑量、時(shí)間及其作用機(jī)制進(jìn)行探討。方法:1.MTT方法檢測(cè)細(xì)胞抑制率取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RPE細(xì)胞以每孔5×104細(xì)胞接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,370C,5%C02條件下培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分6個(gè)實(shí)驗(yàn)組、一個(gè)對(duì)照組,雷帕霉素的濃度為:30ng/ml、90ng/ml、180ng/ml,LY294002的濃度為:15μmol/L、30μmol/L、45μmol/L分別加入6實(shí)驗(yàn)組中,分別培養(yǎng)6h,12h,24h后,用波長(zhǎng)490nm測(cè)出每孔OD值(吸光度值)。調(diào)零孔設(shè)置(DMSO、培養(yǎng)基、MTT),對(duì)照孔(DMSO、細(xì)胞、培養(yǎng)液、MTT),每組設(shè)定6個(gè)復(fù)孔。計(jì)算抑制率=[(對(duì)照-空白)-(給藥-空白)]/(對(duì)照-空白...
【文章來(lái)源】:中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
Western-blot檢測(cè)PI3K的表達(dá)
Western-blot檢測(cè)AKT的表達(dá)
Western-blot檢測(cè)mTOR的表達(dá)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雷帕霉素靶分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變中的表達(dá)及意義[J]. 才娜,劉寧寧,柳力敏,萬(wàn)超,王昕華,陳蕾. 眼科新進(jìn)展. 2010(02)
碩士論文
[1]通脈顆粒對(duì)PTCA術(shù)后再狹窄及相關(guān)炎性因子MCP-1、CCR2的影響[D]. 趙保家.遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 2011
本文編號(hào):3521950
【文章來(lái)源】:中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
Western-blot檢測(cè)PI3K的表達(dá)
Western-blot檢測(cè)AKT的表達(dá)
Western-blot檢測(cè)mTOR的表達(dá)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雷帕霉素靶分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變中的表達(dá)及意義[J]. 才娜,劉寧寧,柳力敏,萬(wàn)超,王昕華,陳蕾. 眼科新進(jìn)展. 2010(02)
碩士論文
[1]通脈顆粒對(duì)PTCA術(shù)后再狹窄及相關(guān)炎性因子MCP-1、CCR2的影響[D]. 趙保家.遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 2011
本文編號(hào):3521950
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