背景與目的:老年性黃斑變性（Age-related macular degeneration,AMD）是西方國家老年人不可逆的視力損傷、甚至致盲的重要眼底疾病[1]。近年來,隨著我國經(jīng)濟的發(fā)展、人民生活水平的不斷提高,以及人口老齡化的加劇,AMD已逐漸成為導(dǎo)致我國老年人群嚴(yán)重視力損傷的首要原因,直接影響老年人的身心健康和生活質(zhì)量。根據(jù)眼底萎縮性改變或脈絡(luò)膜新生血管（choroidal neovascularization,CNV）形成等不同的臨床特征,AMD目前主要分為干性AMD和濕性AMD兩大類。晚期干性AMD患者廣泛的視網(wǎng)膜色素上皮和光感受器損傷以及濕性AMD患者新生血管引起的滲出、出血及瘢痕都會造成患者嚴(yán)重的視力損害。因此,深入研究AMD發(fā)生和發(fā)展機制,探索新的預(yù)防和治療途徑,已成為當(dāng)前我國及世界眼科發(fā)展所面臨的重大問題以及研究熱點。目前AMD的發(fā)病機制尚未明確,一般認(rèn)為遺傳因素和環(huán)境因素的綜合作用啟動了該病的發(fā)生,衰老和氧化應(yīng)激引起了早期病變,炎癥引導(dǎo)視網(wǎng)膜由生理性老化向不可逆的病理性損傷轉(zhuǎn)變,這些因素互相協(xié)同、影響,交叉作用,共同參與AMD的病理過程。近年來多項研究提示視網(wǎng)膜... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
    一、AMD的流行病學(xué)概述
    二、AMD的分型與治療進(jìn)展
    三、多種因素參與AMD的病理過程
    四、光損傷是AMD的重要環(huán)境致病因素
    五、小膠質(zhì)細(xì)胞在AMD慢性光損傷中的作用尚未定論
    六、炎性小體在視網(wǎng)膜免疫損傷中的作用漸受重視
第一部分 慢性低能量藍(lán)光誘導(dǎo)C57BL/6小鼠視網(wǎng)膜光損傷的實驗研究
    一、實驗材料
        1.實驗材料、試劑
        2.主要儀器
        3.實驗動物
        4.主要光照設(shè)備搭建配置
    二、實驗方法
        1.實驗分組
        2.實驗動物的準(zhǔn)備
        3.動物麻醉
        4.視網(wǎng)膜閃光視網(wǎng)膜電圖記錄(Flashelectroretinogram,F-ERG)
        5.小鼠眼球取材
        6.石蠟切片制備
        7.冰凍切片制備
        8.HE染色和視網(wǎng)膜厚度測量
        9.IBA-1免疫熒光染色
        10.統(tǒng)計學(xué)分析
    三、實驗結(jié)果
        1.藍(lán)光照射C57BL/6小鼠3月后F-ERG波幅下降
        2.藍(lán)光照射C57BL/6小鼠3月后視網(wǎng)膜外核層厚度變薄
        3.藍(lán)光照射C57BL/6小鼠1月、3月后視網(wǎng)膜內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞的活化
第二部分 CCR2基因敲除對慢性低能量藍(lán)光誘導(dǎo)的小鼠視網(wǎng)膜光損傷的保護作用..
    一、實驗材料
        1.實驗材料、試劑
        2.主要儀器
        3.實驗動物
        4.主要光照設(shè)備搭建配置
    二、實驗方法
        1.實驗分組
        2.實驗動物的準(zhǔn)備
        3.動物麻醉
        4.PCR基因鑒定
        5.視網(wǎng)膜閃光視網(wǎng)膜電圖記錄(Flashelectroretinogram,F-ERG)
        6.小鼠眼球取材
        7.石蠟切片制備
        8.冰凍切片制備
        9.HE染色和視網(wǎng)膜厚度測量
        10.TUNE視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡檢測
        11.IBA-1免疫熒光染色
        12.統(tǒng)計學(xué)分析
    三、實驗結(jié)果
        1.CCR2基因敲除降低低能量藍(lán)光照后小鼠視網(wǎng)膜內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞的活化量
        2.CCR2基因敲除保護低能量藍(lán)光照導(dǎo)致的小鼠視網(wǎng)膜功能損傷
        3.CCR2基因敲除保護低能量藍(lán)光照導(dǎo)致的小鼠視網(wǎng)膜形態(tài)損傷
        4.CCR2基因敲除保護低能量藍(lán)光照導(dǎo)致的小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡
第三部分 小膠質(zhì)細(xì)胞通過NLRP3途徑介導(dǎo)小鼠視網(wǎng)膜光損傷的機制研究
    一、實驗材料
        1.實驗材料、試劑
        2.主要儀器
        3.實驗動物
        4.主要光照設(shè)備搭建配置
    二、實驗方法
        1.實驗分組
        2.實驗動物的準(zhǔn)備
        3.動物麻醉
        4.小鼠眼球取材
        5.冰凍切片制備
        6.IBA-1、NLRP3、IL-1β免疫熒光染色
        7.Westernblot
        8.統(tǒng)計學(xué)分析
    三、實驗結(jié)果
        1.CCR2基因敲除降少視網(wǎng)膜內(nèi)IBA-1、NLRP3的共染
        2.CCR2基因敲除降少視網(wǎng)膜內(nèi)NLRP3、IL-1β的表達(dá)
        3.CCR2基因敲除降低視網(wǎng)膜內(nèi)NLRP3相關(guān)炎癥因子的表達(dá)
討論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    REFERENCES
附錄
攻讀學(xué)位期間取得學(xué)術(shù)成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Inhibitory effect of CCR3 signal on alkali-induced corneal neovascularization[J]. Wen-Juan Zhou 1,Gao-Qin Liu 1,2,Long-Biao Li 1,Xue-Guang Zhang 2,Pei-Rong Lu 1,2 1 Department of Ophthalmology,the First Affiliated Hospital of Soochow University,Suzhou 215006,Jiangsu Province,China 2 Jiangsu Institute of Clinic Immunology,the First Affiliated Hospital of Soochow University,Suzhou 215006,Jiangsu Province,China.  International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2012(03)



本文編號：3480506