目的：觀察IL-33及其相關(guān)的前炎癥因子在真菌性角膜炎角膜上皮中的表達(dá),探討IL-33/ST2信號通路在真菌性角膜炎免疫反應(yīng)中的作用及意義。方法：（1）2011年9月至2013年7月就診于青島大學(xué)附屬醫(yī)院并行角膜移植術(shù)的真菌性角膜炎患者30例（30眼）為實(shí)驗(yàn)組。健康供體角膜30例（30眼）為對照組,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測IL-33蛋白水平的表達(dá)（2）原代培養(yǎng)的正常人角膜上皮細(xì)胞為對照組,煙曲霉菌菌絲刺激組為實(shí)驗(yàn)組,分別于刺激后不同時(shí)間點(diǎn)檢測IL-33及相關(guān)前炎癥因子的表達(dá)。真菌刺激前用外源合成的人IL-33、S-ST2和MAPK/p38信號通路的阻斷劑SB203580預(yù)處理細(xì)胞,觀察相關(guān)前炎癥因子的表達(dá)變化。分別用熒光定量PCR、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和免疫組織化學(xué)染色法檢測各因子mRNA及蛋白水平的表達(dá)。結(jié)果：（1）IL-33在真菌性角膜炎患者角膜上皮組織中蛋白水平的表達(dá)明顯多于正常人（2）煙曲霉菌菌絲刺激角膜上皮細(xì)胞后IL-33及相關(guān)前炎癥因子TNF-α. IL-6mRNA及蛋白表達(dá)均升高,各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（3）外源合成的人IL-33預(yù)處理細(xì)胞后TNF-α、I... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第1章 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 研究資料
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及菌種
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)所需試劑及耗材
            1.1.3.1 獲取角膜組織所需材料
            1.1.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)所需試劑材料
            1.1.3.3 真菌培養(yǎng)所需試劑
            1.1.3.4 real-time RT-PCR所需試劑及耗材
            1.1.3.5 免疫組織化學(xué)染色所需試劑
            1.1.3.6 ELISA試劑盒
        1.1.4 主要儀器
    1.2 研究方法
        1.2.1 人角膜上皮組織切片制備
        1.2.2 煙曲霉菌菌絲抗原刺激液的制備
        1.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.4 Real-time RT-PCR
        1.2.5 免疫組織化學(xué)染色
        1.2.6 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)
    1.3 結(jié)果觀察及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第2章 結(jié)果
    2.1 煙曲霉菌的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果
    2.2 IL-33在真菌性角膜炎患者角膜上皮中的表達(dá)
    2.3 真菌刺激角膜上皮細(xì)胞產(chǎn)生IL-33
    2.4 真菌刺激的角膜上皮細(xì)胞通過IL-33/ST2產(chǎn)生前炎癥因子
    2.5 MAPK/p38信號通路參與了IL-33的誘導(dǎo)
第3章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]The roles of surfactant protein D during Aspergillus fumigatus infection in human corneal epithelial cells[J]. Cheng-Ye Che, Wen-Yan Jia, Qiang Xu, Na Li, Li-Ting Hu, Nan Jiang, Jing Lin, Qing Wang, Gui-Qiu Zhao Department of Ophthalmology, the Affiliated Hospital of Qingdao University, Qingdao 266003, Shandong Province, China.  International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2012(01)
[2]Effects of COX-2 inhibitor NS-398 on IL-10 expression in rat fungal keratitis[J]. Na Li,Cheng-Ye Che,Li-Ting Hu,Jing Lin,Qing Wang,Gui-Qiu Zhao Department of Ophthalmology,the Affiliated Hospital of Qingdao University,Qingdao 266003,Shandong Province,China.  International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2011(02)
[3]穿透性角膜移植治療高危真菌性角膜潰瘍51例（英文）[J]. 趙桂秋,姜楠,胡麗婷,車成業(yè).  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(18)
[4]人角膜上皮細(xì)胞Toll樣受體介導(dǎo)的炎性細(xì)胞因子的表達(dá)[J]. 高建魯,吳欣怡.  中華眼科雜志. 2006(07)
[5]鐮刀菌和曲霉菌性角膜潰瘍的組織病理學(xué)特點(diǎn)[J]. 白海青,金梅玲,趙桂秋,孫為榮.  中華眼科雜志. 2004(05)
[6]我國角膜基礎(chǔ)和臨床研究的現(xiàn)狀及發(fā)展[J]. 謝立信.  中華眼科雜志. 2010 (10)

博士論文
[1]白細(xì)胞介素33在角膜上皮細(xì)胞免疫炎癥反應(yīng)中的作用[D]. 林靜.青島大學(xué) 2013
[2]Toll樣受體介導(dǎo)的TSLP在過敏性結(jié)膜炎中的作用和調(diào)控機(jī)制研究[D]. 張麗麗.青島大學(xué) 2013

碩士論文
[1]Mincle在大鼠角膜上皮抗煙曲霉菌感染固有免疫階段作用的研究[D]. 陳文俊.青島大學(xué) 2013
[2]Dectin-1受體在真菌性角膜炎角膜上皮中的表達(dá)[D]. 李翠.青島大學(xué) 2012



本文編號：3434354