本文關(guān)鍵詞：綠原酸對視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞氧化損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：研究綠原酸（chlorogenic acid，CGA）對過氧化氫（Hydrogen peroxide）處理的人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（ARPE-19）細(xì)胞抗氧化損傷的保護(hù)作用，為將來臨床上利用綠原酸治療老年黃斑變性提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：過氧化氫(H2O2)以濃度和時間梯度作用于ARPE-19，通過MTT法檢測細(xì)胞活性，建立ARPE-19細(xì)胞氧化損傷模型。采用MTT法檢測CGA對ARPE-19細(xì)胞的增殖及毒性作用。實(shí)驗(yàn)分3組：正常對照組，H2O2模型組，CGA+H2O2干預(yù)組。應(yīng)用紫外分光光度計法測定細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的變化；Hoechst33258染色及流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果：1．H2O2以濃度和時間梯度誘導(dǎo)ARPE-19細(xì)胞凋亡，建立氧化損傷模型適宜條件為500μmol/L的H2O2作用HRPE細(xì)胞24h。2.綠原酸各濃度組ARPE-19細(xì)胞活性與空白對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；綠原酸各濃度干預(yù)組細(xì)胞活性較H2O2模型組高，，在CGA濃度為100μmol/L,活性最高，選此濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。3.與正常對照組相比，H2O2模型組SOD活性、GSH含量下降， MDA含量增加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；與H2O2模型組相比，CGA干預(yù)組的SOD活性及GSH含量均升高，MDA含量下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。4.與正常對照組比較，H2O2模型組的凋亡率顯著增加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；與H2O2模型組比較，CGA干預(yù)組的凋亡率下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論：H2O2可以對ARPE-19細(xì)胞產(chǎn)生氧化損傷，引起細(xì)胞凋亡，CGA對ARPE-19細(xì)胞無促增殖及毒性作用并對ARPE-19細(xì)胞的氧化損傷有保護(hù)作用，可以降低H2O2誘導(dǎo)的ARPE-19細(xì)胞凋亡率；
【關(guān)鍵詞】：綠原酸 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 氧化損傷 凋亡
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R774.5
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-9
• 第1章 引言9-11
• 第2章 材料與方法11-18
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料11-13
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞11
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑11
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器11-12
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)主要試劑配制12-13
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法13-17
• 2.2.1 細(xì)胞傳代培養(yǎng)13
• 2.2.2 MTT 法檢測細(xì)胞活力13-14
• 2.2.3 實(shí)驗(yàn)分組14-15
• 2.2.4 Annexin V-FITC/PI 檢測細(xì)胞凋亡15
• 2.2.5 Hoechst33258 染色觀察細(xì)胞凋亡15-16
• 2.2.6 細(xì)胞氧化應(yīng)激指標(biāo)的測定16-17
• 2.3 統(tǒng)計學(xué)分析17-18
• 第3章 結(jié)果18-27
• 3.1 過氧化氫對細(xì)胞活力的影響18-20
• 3.1.1 H_2O_2濃度對 ARPE-19 細(xì)胞活力的影響18-19
• 3.1.2 H_2O_2 作用時間對 ARPE-19 細(xì)胞活力的影響19-20
• 3.2 綠原酸對 ARPE-19 細(xì)胞增殖的影響20-21
• 3.3 綠原酸對 H_2O_2氧化損傷 ARPE-19 細(xì)胞活性的影響21-23
• 3.4 Annexin V-FITC 檢測 ARPE-19 細(xì)胞凋亡23-24
• 3.5 Hoechst33258 染色觀察細(xì)胞凋亡24-25
• 3.6 綠原酸對 H_2O_2氧化損傷 ARPE-19 細(xì)胞 SOD 活性、MDA 含量、GSH 含量的影響25-27
• 第4章 討論27-32
• 4.1 ARPE-19 細(xì)胞氧化損傷模型的建立27-28
• 4.2 綠原酸對 ARPE-19 細(xì)胞增殖的影響28-29
• 4.3 綠原酸對 H_2O_2誘導(dǎo)的 ARPE-19 細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)29-32
• 第5章 結(jié)論32-33
• 致謝33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果38-39
• 綜述39-47
• 參考文獻(xiàn)45-47

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號：334702