目的鼻咽癌是我國華南地區(qū)和東南亞國家最普遍的惡性腫瘤之一，發(fā)病分布呈明顯的地區(qū)差異性，由于其發(fā)病部位隱匿且早期發(fā)病癥狀不明顯，許多患者確診時(shí)已處于晚期，嚴(yán)重危害人類的健康和影響人類的生活水平。然而，鼻咽癌的發(fā)病機(jī)制仍不十分明確。最近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，抑癌基因在鼻咽癌中起著更為重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)，CYFIP1（cytoplasmic FMRPinteracting proteins1,胞漿FMRP相互作用蛋白1）基因和抑癌基因P53相似，其表達(dá)下調(diào)在多數(shù)癌癥的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。本研究旨在探討CYFIP1基因在鼻咽癌中的表達(dá)情況及其下調(diào)機(jī)制。方法1.采用熒光相對定量PCR技術(shù)檢測鼻咽癌組織和慢性黏膜炎癥組織中CYFIP1基因mRNA的表達(dá)水平，并分析其與臨床資料的關(guān)系。2.利用甲基化特異性PCR技術(shù)（MS-PCR）檢測鼻咽癌和慢性黏膜炎癥組織中CYFIP1基因啟動(dòng)子區(qū)域甲基化水平，并分析其與該基因mRNA表達(dá)的關(guān)系。3.采用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)檢測鼻咽癌和慢性黏膜炎癥組織中CYFIP1基因微衛(wèi)星位點(diǎn)雜合性缺失（LOH）狀態(tài)，并分析LOH與CYFIP1基因mRNA表達(dá)的關(guān)系。結(jié)果... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

甲基化PCR原理

結(jié)果在鼻咽癌中的表達(dá)情況目的基因qRT-PCR 引物是否符合預(yù)期設(shè)計(jì)，所以對 CYFIP1 脂糖凝膠電泳，而后在紫外燈光下成像分析，結(jié)果YFIP1(119bp)和內(nèi)參基因 18S(253bp)均在預(yù)期的位并且周圍無明顯的雜帶。說明本實(shí)驗(yàn)的 qRT-PCR1 2Marker 18S CYFIP1 18S CYFIP1

圖 3 內(nèi)參照 18S 和目的基因 CYFIP1 qRT-PCR 擴(kuò)增曲線解曲線中所形成的熔解曲線是反應(yīng) PCR 產(chǎn)物特異性的重要線均是明顯的單一主峰，表明 PCR 產(chǎn)物特異性良性產(chǎn)物和二聚體。 18S 基因的擴(kuò)增效率比較稀釋的原理得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，即 PCR 的擴(kuò)增效率。圖IP1 和內(nèi)參基因 18S 的擴(kuò)增效率基本相同，我們可以算目的基因 mRNA 的相對表達(dá)量。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Epigenetics of hepatocellular carcinoma:Role of microRNA[J]. Sharad Khare,Qiong Zhang,Jamal A Ibdah.  World Journal of Gastroenterology. 2013(33)



本文編號：3315361