RNAi沉默HPC2對(duì)鼻咽癌細(xì)胞遷移侵襲的影響及分子機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2021-07-30 08:41
目的探討HPC2在鼻咽細(xì)胞遷移侵襲中的作用及機(jī)制。方法選取鼻咽癌5-8F細(xì)胞,采用小RNA干擾技術(shù)沉默HPC2的表達(dá)后,分3組進(jìn)行功能實(shí)驗(yàn),即Scrambled陰性對(duì)照組、#1 siRNA-HPC2組和#2 siRNA-HPC2組,運(yùn)用劃痕實(shí)驗(yàn)比較細(xì)胞遷移愈合速率,Transwell檢測(cè)比較各組細(xì)胞侵襲能力,Western blot法檢測(cè)EMT通路關(guān)鍵分子的變化。結(jié)果與對(duì)照組比較,HPC2沉默組的細(xì)胞遷移愈合速率及侵襲能力降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05)。從機(jī)制研究上發(fā)現(xiàn),HPC2沉默后,Snail下調(diào),MMP9下調(diào)。結(jié)論沉默HPC2表達(dá)能降低鼻咽癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力,機(jī)制上可能通過(guò)HPC2/snail/MMP9軸發(fā)揮作用。
【文章來(lái)源】:醫(yī)學(xué)研究雜志. 2020,49(08)
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【部分圖文】:
在鼻咽癌5-8F細(xì)胞轉(zhuǎn)染靶向HPC2的siRNA后HPC2的mRNA和蛋白水平檢測(cè)
3.沉默HPC2后對(duì)鼻咽癌細(xì)胞侵襲能力的影響:用Transwell小室檢測(cè)比較5-8F細(xì)胞侵襲能力,72h后光鏡下觀(guān)察發(fā)現(xiàn),對(duì)照組穿膜細(xì)胞數(shù)為320±32,#1siRNA-HPC2轉(zhuǎn)染組細(xì)胞數(shù)為190±28,#2siRNA-HPC2轉(zhuǎn)染組細(xì)胞數(shù)為138±21。與對(duì)照組比較,siRNA-HPC2沉默組的細(xì)胞穿膜數(shù)減少,侵襲性下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,圖3)。圖3 沉默HPC2后對(duì)鼻咽癌細(xì)胞侵襲能力的影響(結(jié)晶紫,×100)
圖2 沉默HPC2基因?qū)?-8F細(xì)胞劃痕愈合能力的影響4.靶向沉默HPC2后對(duì)EMT信號(hào)通路的影響:轉(zhuǎn)染HPC2對(duì)5-8F細(xì)胞中EMT關(guān)鍵分子Snail、E-cadherin及MMp9表達(dá)的影響。Western blot法檢測(cè)結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,兩個(gè)siRNA-HPC2轉(zhuǎn)染組的轉(zhuǎn)錄因子Snail下調(diào),上皮標(biāo)志物E-cadherin表達(dá)上調(diào),轉(zhuǎn)移標(biāo)志物MMP9下調(diào),提示HPC2沉默后5-8F細(xì)胞的EMT信號(hào)通路抑制,轉(zhuǎn)移活性下降。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]The prevalence and prevention of nasopharyngeal carcinoma in China[J]. Malcolm J. Simons. 癌癥. 2011(02)
本文編號(hào):3311090
【文章來(lái)源】:醫(yī)學(xué)研究雜志. 2020,49(08)
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【部分圖文】:
在鼻咽癌5-8F細(xì)胞轉(zhuǎn)染靶向HPC2的siRNA后HPC2的mRNA和蛋白水平檢測(cè)
3.沉默HPC2后對(duì)鼻咽癌細(xì)胞侵襲能力的影響:用Transwell小室檢測(cè)比較5-8F細(xì)胞侵襲能力,72h后光鏡下觀(guān)察發(fā)現(xiàn),對(duì)照組穿膜細(xì)胞數(shù)為320±32,#1siRNA-HPC2轉(zhuǎn)染組細(xì)胞數(shù)為190±28,#2siRNA-HPC2轉(zhuǎn)染組細(xì)胞數(shù)為138±21。與對(duì)照組比較,siRNA-HPC2沉默組的細(xì)胞穿膜數(shù)減少,侵襲性下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,圖3)。圖3 沉默HPC2后對(duì)鼻咽癌細(xì)胞侵襲能力的影響(結(jié)晶紫,×100)
圖2 沉默HPC2基因?qū)?-8F細(xì)胞劃痕愈合能力的影響4.靶向沉默HPC2后對(duì)EMT信號(hào)通路的影響:轉(zhuǎn)染HPC2對(duì)5-8F細(xì)胞中EMT關(guān)鍵分子Snail、E-cadherin及MMp9表達(dá)的影響。Western blot法檢測(cè)結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,兩個(gè)siRNA-HPC2轉(zhuǎn)染組的轉(zhuǎn)錄因子Snail下調(diào),上皮標(biāo)志物E-cadherin表達(dá)上調(diào),轉(zhuǎn)移標(biāo)志物MMP9下調(diào),提示HPC2沉默后5-8F細(xì)胞的EMT信號(hào)通路抑制,轉(zhuǎn)移活性下降。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]The prevalence and prevention of nasopharyngeal carcinoma in China[J]. Malcolm J. Simons. 癌癥. 2011(02)
本文編號(hào):3311090
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