目的:通過(guò)糖尿病大鼠和體外模擬人角膜緣干細(xì)胞高糖環(huán)境,探討高糖引起的角膜緣干細(xì)胞的遷移能力和細(xì)胞表型轉(zhuǎn)變,并探究P物質(zhì)促進(jìn)糖尿病角膜病變創(chuàng)傷后修復(fù)的分子機(jī)制。研究方法:1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn):取30只SPF大鼠進(jìn)行糖尿病造模,15只為糖尿病組,15只為P物質(zhì)組。另取15只SPF大鼠為對(duì)照組,刮除三組大鼠角膜上皮觀察上皮創(chuàng)傷愈合情況,并進(jìn)行HE染色和波形蛋白（Vimentin）、β連環(huán)蛋白（β-catenin）及P63蛋白的免疫組化染色。2細(xì)胞及分子實(shí)驗(yàn):取人角膜緣干細(xì)胞進(jìn)行高糖培養(yǎng)24小時(shí)后,加入P物質(zhì),48小時(shí)后劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell分析檢測(cè)對(duì)照組、高糖組和P物質(zhì)組角膜緣干細(xì)胞的增殖及遷移功能,western-blot及細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)角膜緣干細(xì)胞波形蛋白（Vimentin）、β連環(huán)蛋白（β-catenin）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP9）、吻蛋白（FAK）及胰島素樣生長(zhǎng)因子1（IGF-1）的表達(dá)及胞內(nèi)定位。免疫共沉淀法檢測(cè)IGFBP—IGF-1復(fù)合體的濃度探討P物質(zhì)促進(jìn)IGF-1信號(hào)通路的作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1.糖尿病大鼠在刮除角膜上皮后,愈合速度較正常對(duì)照組明顯延遲,在24h時(shí)原已修復(fù)... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．角膜上皮愈合面積百分比圖??正常組大鼠刮除上皮后，上皮修復(fù)迅速，在４８ｈ即完成上皮修復(fù)

而糖尿病大鼠的角膜上皮明顯變薄，表層上皮缺失或僅殘留１層，翼狀上??｜?皮細(xì)胞形態(tài)各異、細(xì)胞連接疏松、排列紊亂，基底細(xì)胞層細(xì)胞失去其原有高柱??狀細(xì)胞形態(tài)，細(xì)胞變小，呈多邊形或短柱狀，排列紊亂。（圖３）??２３??

角膜基底細(xì)胞層可見(jiàn)Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和卩－ｃａｔｅｎｉｎ蛋白高表達(dá)，而表層上皮和翼狀上皮??層表達(dá)量極低。而糖尿病大鼠的角膜基底細(xì)胞的Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表達(dá)??明顯降低，其表達(dá)量與表層上皮和翼狀上皮層類似。（圖４）??２４??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2型糖尿病患者角膜知覺(jué)改變及其影響因素[J]. 季迅達(dá),朱皓皓,許速.  中國(guó)實(shí)用眼科雜志. 2007 (12)
[2]共焦顯微鏡觀察糖尿病性視網(wǎng)膜病變患者角膜細(xì)胞的變化[J]. 馬山,孫先勇,張杰,劉秀花,吳國(guó)慶.  中國(guó)實(shí)用眼科雜志. 2013 (05)



本文編號(hào)：3289755