目的:觀察B7-H1在喉鱗狀細胞癌（Laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）患者腫瘤組織中成纖維細胞（Cancer associated fibroblasts,CAFs）上的表達情況。探討通過調(diào)控CAFs中B7-H1的表達,研究腫瘤微環(huán)境（Tumor microenvironment,TME）中B7-H1對腫瘤細胞增殖遷移及免疫逃避的影響。通過本研究為調(diào)控機體T細胞的免疫治療應(yīng)用于LSCC治療提供了理論基礎(chǔ)。為減少患者由于傳統(tǒng)治療所造成的頭頸器官及其功能損害,提供新的思路。方法:收集20例確診為喉鱗狀細胞癌的患者標本,及其正常切緣喉標本,進行冰凍切片,免疫熒光染色,鏡下觀察B7-H1表達。通過標本消化分離培養(yǎng)喉鱗狀細胞癌腫瘤相關(guān)成纖維細胞（CAFs）及正常成纖維細胞（Normal fibroblasts,NFs）,并進行純化及熒光鑒定。通過流式檢測純化的CAFs及NFs中B7-H1的表達。根據(jù)結(jié)果以si RNA轉(zhuǎn)染下調(diào)CAFs的B7-H1表達,并通過RT-PCR檢測B7-H1在m RNA水平的表達。通過增殖實驗及劃痕實驗比較CAFs與B7H1-s... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

上圖紅色箭頭所指：成纖維細胞

圖 1 上圖紅色箭頭所指：成纖維細胞。培養(yǎng)與純化鑒定檢測結(jié)果.1.喉鱗狀細胞癌腫瘤相關(guān)成纖維細胞 CAFs 的原代培養(yǎng)結(jié)果組織消化分離所得的 CAFs 經(jīng)過 3 代培養(yǎng)，NFs 經(jīng)過 2 代培養(yǎng)后純化。

分 共刺激分子 B7-H1 在喉鱗癌腫瘤相關(guān)成纖維細胞中的表達及其免疫功以細胞免疫熒光實驗檢測得到：CAFs 及 NFs 均為波形蛋白（vimentin）陽紅色，而 CAFs 還為α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA，CAFs 特異性蛋白）陽綠色。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3277565