目的雖然穿透性角膜移植（penetrating keratoplasty,PKP）手術(shù)較其他器官移植手術(shù)成功率要高,但術(shù)后排斥反應(yīng)在手術(shù)失敗原因中仍占首位。間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的Exosomes（mesenchymal stem cells derived exosomes,MSCs-exo）可以表達(dá)來(lái)源細(xì)胞免疫功能,參與免疫調(diào)控。在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,本研究應(yīng)用MSCs-exo對(duì)大鼠角膜移植免疫排斥模型進(jìn)行治療,觀(guān)察不同路徑、不同劑量、不同時(shí)間給予MSCs-exo對(duì)角膜移植排斥反應(yīng)發(fā)生和轉(zhuǎn)歸的干預(yù)情況,明確exosomes治療途徑及治療機(jī)理。方法1.全血貼壁法分離培養(yǎng)Wistar大鼠骨髓來(lái)源MSCs,并鑒別Wistar大鼠骨髓來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞。分離提純并鑒別MSCs來(lái)源Exosomes,BCA法測(cè)定蛋白濃度,按需配置exosomes濃度。2.Wistar大鼠提供供體植片,Lewis大鼠作為受體,構(gòu)建大鼠穿透性角膜移植免疫排斥動(dòng)物模型。隨機(jī)分為以下幾組:A組:模型組（亦為空白對(duì)照組）。B組:術(shù)后結(jié)膜下注射MSCs組。C組:術(shù)后結(jié)膜下注射PBS組。D組:術(shù)后結(jié)膜下注射MSCs來(lái)源Exosome... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：108 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

MSCs細(xì)胞

成脂分化

圖 1A. MSCs 細(xì)胞 圖 1B. 成脂分化 圖 1C. 成骨分化1.2.3 間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源 exosomes 的鑒定1.2.3.1 MSCs-exo 的電鏡觀(guān)察掃描電鏡下觀(guān)察超速離心方法獲得微粒的形態(tài)，可見(jiàn)其具有 exosomes 典型電鏡表現(xiàn)，粒子純度較高，電鏡下呈圓形或茶托型或一側(cè)凹陷的半球形的雙層模樣結(jié)構(gòu)（圖 2）。1.2.3.2 MSCs-exo 的粒子直徑測(cè)算隨機(jī)選取 15 個(gè)電鏡下具有典型形態(tài)的 Exosomes 截圖，根據(jù)標(biāo)尺記錄其直徑。發(fā)現(xiàn)粒子直徑大小范圍在 45nm~100nm 之間（圖 2）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Biology of chronic graft-vs-host disease:Immune mechanisms and progress in biomarker discovery[J]. Richard B Presland.  World Journal of Transplantation. 2016(04)
[2]Mechanism of immune tolerance induced by donor derived immature dendritic cells in rat high-risk corneal transplantation[J]. Xiao-Wei Gao,Yan Fu,Wen-Jing Li,An-Jie Du,Xia Li,Xu-Dong Zhao.  International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2013(03)



本文編號(hào)：3277106