目的:觀察機(jī)體死后角膜內(nèi)皮在不同死亡間隔和溫度下結(jié)構(gòu)和功能的改變并探究機(jī)體死后角膜內(nèi)皮細(xì)胞的存活機(jī)制。方法:C57BL/6小鼠脫頸處死后,尸體分別置于4℃冰箱中和25℃室內(nèi),放置12h、24h、48h、72h。在不同的死亡間隔（PMI）下,對小鼠眼前節(jié)進(jìn)行裂隙燈檢查,抽取房水做細(xì)菌培養(yǎng);通過眼球石蠟切片蘇木素-伊紅（HE）染色、角膜內(nèi)皮N-cadherin和Na+-K+-ATPase免疫熒光染色、角膜內(nèi)皮掃描電鏡（SEM）來觀察角膜內(nèi)皮結(jié)構(gòu)和功能的改變;利用Live and dead染色評估角膜內(nèi)皮活細(xì)胞率并通過標(biāo)記凋亡細(xì)胞的TUNEL染色和程序性壞死標(biāo)記物P-RIP3（the receptor-interacting protein family）的免疫熒光染色對細(xì)胞的死亡方式進(jìn)行探究。利用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)（RNA-seq）及 quantitative Real-time RT-PCR（q-RT-PCR）來檢測機(jī)體死后12h兔角膜內(nèi)皮基因表達(dá)譜的變化。通過腹腔注射治療性TNF-α抗體,依那西普,觀察其對死后小鼠角膜內(nèi)皮的保護(hù)作用。結(jié)果:小鼠死后,低溫維持了眼球的正常形態(tài)和一定的前房深度... 

【文章來源】：廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?ＴＮＦＲ１激活后的信號通路＿??Ｆｉｇ．１．１?Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ａｆｔｅｒ?ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＴＮＦＲ１．??

圖３．１?ｍＲＮＡ建庫簡要流程??備；??分析??基本分析和高級分析�；痉治�，表達(dá)量分析，差異基因分析等；和通路／疾病富集，差異基因共文結(jié)果部分用到的分析方法作一分析??

２４ｈ角膜厚度開始下降，至７２ｈ甚至比正常組更��；值得注意的是，隨著死亡時??間的延長，角膜上皮僅最表層細(xì)胞脫落，細(xì)胞層數(shù)并未出現(xiàn)明顯減少，僅細(xì)胞體??積減�。▓D４．２）。以上眼部的死后組織學(xué)變化規(guī)律均重復(fù)三次以上。??以上結(jié)果說明低溫維持了眼球正常的形態(tài)至７２ｈ，延緩了自溶、腐敗等過程??對其結(jié)構(gòu)的破壞；而常溫下４８ｈ前房即出現(xiàn)細(xì)菌，眼球出現(xiàn)嚴(yán)重的萎縮變形，預(yù)??示著腐敗自溶的過程開始。??３２??


本文編號：3245671