目的探討鼻咽癌靶向肽（NTP）修飾的重組人血管內(nèi)皮抑素（rES）對鼻咽癌裸鼠移植瘤生長的影響,為鼻咽癌的靶向治療提供新思路。方法合成pET-28a-rES與pET-28a-rES-NTP質(zhì)粒,并通過大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)制備rES與rES-NTP重組蛋白,聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）和蛋白質(zhì)免疫印跡（WB）鑒定重組蛋白。建立人鼻咽癌CNE1細(xì)胞裸鼠移植瘤模型,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測重組蛋白注射后不同時間點(diǎn)在腫瘤組織中的含量。將致瘤成功的裸鼠隨機(jī)分為對照組、rES組、rES-NTP組3組,3組分別隔日尾靜脈注射100μL的生理鹽水、rES重組蛋白（15 mg/kg）、rES-NTP重組蛋白（15 mg/kg）,共給藥4周。測量移植瘤的體積與重量;免疫組織化學(xué)染色法檢測移植瘤中CD31的表達(dá);熒光定量PCR、WB檢測移植瘤中VEGF、HIF-1ɑmRNA與蛋白質(zhì)的表達(dá)。結(jié)果 rES與rES-NTP重組蛋白的理論分子量分別為22.48 kd、23.33 kd,經(jīng)SDS-PAGE與WB鑒定正確。尾靜脈注射后5 min、30 min、1 h、3 h、6 h時,rES-NTP組在腫瘤組織中的含量... 

【文章來源】：西部醫(yī)學(xué). 2020,32(09)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞與動物
    1.2 主要試劑和儀器
    1.3 方法
        1.3.1 質(zhì)粒的構(gòu)建
        1.3.2 蛋白的表達(dá)與鑒定
        1.3.3 動物模型的構(gòu)建
        1.3.4 實(shí)驗(yàn)分組
        1.3.5 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測重組蛋白在腫瘤組織中的含量
        1.3.6 移植瘤體積與重量的測量
        1.3.7 免疫組織化學(xué)染色法檢測移植瘤中CD31的表達(dá)
        1.3.8 蛋白質(zhì)免疫印跡檢測移植瘤中VEGF與HIF-1ɑ的表達(dá)
        1.3.9 熒光定量PCR檢測移植瘤中VEGF與HIF-1ɑ的表達(dá)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 rES-NTP質(zhì)粒的構(gòu)建與重組蛋白的表達(dá)
    2.2 rES-NTP重組蛋白的靶向驗(yàn)證
    2.3 3組腫瘤生長體積和重量的差異
    2.4 3組腫瘤組織中CD31表達(dá)的差異
    2.5 3組腫瘤組織中VEGF及HIF-1ɑ表達(dá)的差異
3 討論
4 結(jié)論與啟示


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3182528