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miR-485-5p通過下調FOSL2表達影響鼻咽癌細胞增殖和凋亡

發(fā)布時間:2021-05-01 00:13
  目的探討微小RNA-485-5p(miR-485-5p)對鼻咽癌細胞增殖和凋亡的影響及作用機制。方法選取2016年5月~2018年4月本院行手術治療的36例鼻咽癌患者癌組織為研究對象,對應癌旁組織距離腫瘤邊緣>3cm作為對照組。RT-qPCR檢測鼻咽癌組織和對應的癌旁組織中miR-485-5p和FOS樣抗原2(FOSL2)mRNA水平,Pearson相關性分析鼻咽癌組織中miR-485-5p和FOSL2 mRNA表達相關性。以人永生化鼻咽上皮細胞系NP69為對照,RT-qPCR檢測鼻咽癌細胞系6-10B和5-8F中miR-485-5p和FOSL2 mRNA表達水平,Western Blot檢測FOSL2蛋白水平。將5-8F細胞分為miR-NC組、miR-485-5p組、si-NC組、si-FOSL2組、miR-485-5p+pcDNA3.0組和miR-485-5p+pcDNA3.0-FOSL2組,MTT實驗、流式細胞術、Western Blot分別檢測各組5-8F細胞增殖、凋亡及Cyclin D1、p21、Bcl-2和Bax表達。雙熒光素酶報告基因實驗驗證miR-485-5p與F... 

【文章來源】:西部醫(yī)學. 2020,32(09)

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 資料與方法
    1.1 一般資料
    1.2 細胞和實驗試劑
    1.3 實驗方法
        1.3.1 實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測miR-485-5p和FOSL2 mRNA水平
        1.3.2 細胞培養(yǎng)
        1.3.3 細胞轉染及分組
        1.3.4 MTT檢測細胞增殖
        1.3.5 流式細胞儀檢測細胞凋亡
        1.3.6 蛋白印跡(Western Blot)檢測細胞中FOSL2、Cyclin D1、p21、Bcl-2和Bax蛋白表達
        1.3.7 雙熒光素酶報告基因檢測實驗
    1.4 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 鼻咽癌組織和細胞系中miR-485-5p和FOSL2表達
    2.2 過表達miR-485-5p對鼻咽癌5-8F細胞增殖和凋亡的影響
    2.3 低表達FOSL2對鼻咽癌5-8F細胞增殖和凋亡的影響
    2.4 miR-485-5p靶向負調控FOSL2表達
    2.5 過表達FOSL2降低過表達miR-485-5p對鼻咽癌5-8F細胞增殖和凋亡的影響
3 討論
4 結論



本文編號:3169758

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