人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡、膠質(zhì)細(xì)胞活化及神經(jīng)炎癥的干預(yù)作用
發(fā)布時(shí)間:2021-04-21 05:59
目的:觀察尾靜脈注射人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡、膠質(zhì)細(xì)胞活化及炎癥因子TNF-α表達(dá)的影響,探討其對(duì)早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞損傷的干預(yù)作用。方法:將70只4周齡、健康雄性SD大鼠,隨機(jī)分為正常組12只,糖尿病組58只。采用單次腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)的方法誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型,成模后定期觀察及監(jiān)測(cè)大鼠血糖和體重的變化情況。高糖、高脂飼養(yǎng)5個(gè)月后將糖尿病組大鼠隨機(jī)分為DM組、DM+PBS組、DM+hUCMSCs組。DM+hUCMSCs組經(jīng)尾靜脈單次注射1ml hUCMSCs,DM+PBS組經(jīng)尾靜脈單次注射1ml PBS液,DM組不作任何處理,觀察1月后全部處死并取材進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。分別采用TUNEL檢測(cè)視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡,免疫組織化學(xué)染色、Western-blot檢測(cè)視網(wǎng)膜膠質(zhì)細(xì)胞纖維酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表達(dá);ELISA檢測(cè)視網(wǎng)膜炎癥因子TNF-α的表達(dá)。結(jié)果:1.TUNEL檢測(cè)視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡:正常組大鼠視網(wǎng)膜各層未見凋亡細(xì)胞,各層細(xì)胞排列整齊,正常視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞核呈藍(lán)色著染;DM組及DM...
【文章來源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
材料和方法
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 hUCMSCs
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.3 主要儀器設(shè)備及耗材
1.4 主要試劑
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 DM動(dòng)物模型建立及分組
2.2 DM大鼠尾靜脈注射
2.3 石蠟切片的制作
2.4 TUNEL法檢測(cè)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡
2.5 免疫組織化學(xué)染色法測(cè)定視網(wǎng)膜GFAP蛋白的表達(dá)
2.6 Western-blot檢測(cè)視網(wǎng)膜GFAP蛋白表達(dá)量
2.7 ELISA檢測(cè)視網(wǎng)膜炎癥因子TNF-α的含量
3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
1 DM大鼠全身情況
2 TUNEL檢測(cè)視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡
3 免疫組織化學(xué)染色及Western-blot檢測(cè)視網(wǎng)膜GFAP蛋白的表達(dá)
4 ELISA檢測(cè)視網(wǎng)膜炎癥因子TNF-α的表達(dá)量
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝
本文編號(hào):3151198
【文章來源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
材料和方法
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 hUCMSCs
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.3 主要儀器設(shè)備及耗材
1.4 主要試劑
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 DM動(dòng)物模型建立及分組
2.2 DM大鼠尾靜脈注射
2.3 石蠟切片的制作
2.4 TUNEL法檢測(cè)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡
2.5 免疫組織化學(xué)染色法測(cè)定視網(wǎng)膜GFAP蛋白的表達(dá)
2.6 Western-blot檢測(cè)視網(wǎng)膜GFAP蛋白表達(dá)量
2.7 ELISA檢測(cè)視網(wǎng)膜炎癥因子TNF-α的含量
3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
1 DM大鼠全身情況
2 TUNEL檢測(cè)視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡
3 免疫組織化學(xué)染色及Western-blot檢測(cè)視網(wǎng)膜GFAP蛋白的表達(dá)
4 ELISA檢測(cè)視網(wǎng)膜炎癥因子TNF-α的表達(dá)量
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝
本文編號(hào):3151198
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