目的:探討過表達微小RNA（microRNA-7,miRNA-7）對鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）5-8F細胞增殖能力的抑制作用及其與表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor,EGFR）/磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,也稱Akt）通路的關(guān)聯(lián)情況。方法:利用脂質(zhì)體試劑Lipofectamine 2000將miRNA-7模擬物轉(zhuǎn)染入人鼻咽癌5-8F細胞中;采用real-time PCR法檢測轉(zhuǎn)染后各組細胞中miRNA-7的表達情況;CCK-8法檢測細胞增殖能力變化;細胞平板克隆形成實驗觀察轉(zhuǎn)染后細胞克隆能力變化情況;real-time PCR法檢測EGFR/PI3K/Akt通路各mRNA表達水平的變化;Western blotting法檢測EGFR/PI3K/AKT通路各蛋白表達水平的變化。結(jié)果:real-time PCR結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染miRNA-7模擬物組細胞中的miRNA-7表達水平顯著高于無關(guān)... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2014,30(10)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
    2 主要方法
        2.1 細胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染效率的檢測
        2.2 Real-time PCR檢測miRNA-7的表達
        2.3 CCK-8法檢測細胞增殖能力
        2.4 平板克隆法檢測細胞克隆形成情況
        2.5 Real-time PCR檢測各mRNA的表達
        2.6 Western blotting檢測各蛋白的表達
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
    1細胞轉(zhuǎn)染情況
    2 miRNA-7在5-8F細胞中的表達情況
    3 miRNA-7抑制5-8F細胞增殖情況
    4 miRNA-7對細胞平板克隆形成的影響
    5 miRNA-7對EGFR、PI3K及Akt mRNA表達的影響
    6 miRNA-7對EGFR/PI3K/Akt通路各蛋白表達的影響
討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]上調(diào)miR-187*表達對人結(jié)腸癌細胞株增殖活性的影響[J]. 張麗靜,劉博,趙增仁,樊智彬,田延鋒.  中國病理生理雜志. 2013(11)
[2]EGFR與c-Kit蛋白的表達與鼻咽癌原發(fā)瘤的進展相關(guān)[J]. 奚少彥,吳秋良,宗永生,雍娟娟,梁建中,侯景輝,盧佳斌.  中國病理生理雜志. 2012(04)



本文編號：3109231