發(fā)布時間：2017-03-22 21:10

  本文關(guān)鍵詞：載睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子-PEG-PLGA微泡聯(lián)合超聲對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分載睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子PEG-PLGA超聲微泡的制備及其特性檢測 目的： 1、采用雙乳化法制備載睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子（CNTF）的聚乙二醇-乳酸/羥基乙酸共聚物（PEG-PLGA）超聲微泡。 2、檢測該微泡的粒徑、Zeta電位、平均包封率、平均載藥量及體外釋藥特性。 方法： 1、采用雙乳化法以PEG-PLGA為膜材制備包裹睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)的PEG-PLGA的超聲微泡造影劑，簡稱為CNTF-PEG-PLGA。 2、應(yīng)用光學(xué)顯微鏡、透射電子顯微鏡分析微泡結(jié)構(gòu)及藥物分布情況；Malvern激光粒徑測量儀測定微泡粒徑及Zeta電位；ELISA法檢測微泡的包封率、載藥量及體外釋放行為。 結(jié)果： CNTF-PEG-PLGA超聲微泡造影劑形態(tài)圓整，表面光滑，透射電子顯微鏡下觀察無明顯粘連破損現(xiàn)象；激光粒徑儀檢測其平均粒徑為312.5nm，Zeta電位-(25.9±0.8)mv；平均包封率62.35％，平均載藥量0.298μg/mg；24h微泡有明顯的突釋現(xiàn)象，藥物釋放率為35.59％，之后微泡表現(xiàn)為溫和緩慢的持久釋放，28d時釋放百分率達(dá)93.6%。 結(jié)論：采用雙乳化法成功制備了載睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子-PEG-PLGA超聲微泡造影劑，該微泡粒徑小、均勻，具有緩釋長效特性。 第二部分載CNTF-PEG-PLGA微泡聯(lián)合超聲對視神經(jīng)損傷大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護作用 目的： 探討載CNTF-PEG-PLGA微泡聯(lián)合超聲對視神經(jīng)損傷大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGCs）的保護作用。 方法： 隨機選取SD大鼠145只（雙眼兼用），將其分為7組：A組正常對照組、B組單純損傷組、C組CNTF藥物組、D組超聲+CNTF藥物組、E組載CNTF-PEG-PLGA微泡組、F組超聲+空白PEG-PLGA微泡組、G組超聲+CNTF-PEG-PLGA微泡組。采用視神經(jīng)鉗夾法制作大鼠視神經(jīng)損傷模型。造模前7天，應(yīng)用熒光金（FG）逆行標(biāo)記法對所有組大鼠RGCs進行標(biāo)記，造模后1w、2w、4w分別計數(shù)各組大鼠RGCs存活數(shù)，視網(wǎng)膜組織病理切片觀察視網(wǎng)膜的形態(tài)結(jié)構(gòu)改變，評價載藥微泡及聯(lián)合超聲的安全性；造模后3d、1w、2w、4w生長相關(guān)蛋白-43（GAP-43）免疫組織化學(xué)染色，觀察大鼠視網(wǎng)膜GAP-43的表達(dá)情況，表達(dá)強度以平均光密度(AOD)表示。 結(jié)果： 逆行熒光金標(biāo)記RGCs結(jié)果顯示，視神經(jīng)損傷后1w、2w，G組、E組、D組及C組平均RGCs計數(shù)均高于B組和F組（P0.05)；視神經(jīng)損傷后4w，G組平均RGCs計數(shù)仍高于B組和F組（P0.05)；在每個觀察時間點G組平均RGCs計數(shù)均顯著高于其他各損傷組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)，但仍低于A組（P0.05）。正常大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層GAP-43蛋白有少量表達(dá)，，內(nèi)叢狀層微弱表達(dá)；造模后各損傷組GAP-43表達(dá)均呈不同程度增強，主要位于神經(jīng)纖維層、節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)叢狀層。傷后3d，各損傷組GAP-43表達(dá)開始增強，傷后1w、2w、4w，G組GAP-43表達(dá)均明顯高于其他各組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。視網(wǎng)膜組織病理切片示，傷后各組大鼠視網(wǎng)膜RGCs均有不同程度排列疏松紊亂，空泡化，細(xì)胞數(shù)目減少。G組大鼠視網(wǎng)膜RGCs空泡化現(xiàn)象較其它各損傷組輕，細(xì)胞數(shù)目較多。玻璃體腔注射微泡后視網(wǎng)膜未見明顯炎性細(xì)胞浸潤現(xiàn)象及局灶性壞死。 結(jié)論： 載睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子PEG-PLGA微泡聯(lián)合超聲能夠增強藥物對視神經(jīng)損傷大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護作用，延長藥物作用時間。
【關(guān)鍵詞】：睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 聚乙二醇 乳酸/羥基乙酸共聚物 超聲微泡 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 超聲 超聲微泡 生長相關(guān)蛋白-43
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R774.1
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 摘要6-9
• ABSTRACT9-13
• 前言13-16
• 第一部分 載睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 PEG-PLGA 超聲微泡的制備及其特性檢測16-30
• 1. 材料與方法16-19
• 2. 結(jié)果19-20
• 討論20-24
• 參考文獻24-28
• 附圖28-30
• 第二部分 載 CNTF-PEG-PLGA 微泡聯(lián)合超聲對視神經(jīng)損傷大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護作用30-47
• 1. 材料與方法30-35
• 2. 結(jié)果35-38
• 討論38-41
• 參考文獻41-43
• 附圖43-47
• 全文總結(jié)47
• 課題創(chuàng)新性、不足之處及后續(xù)研究工作設(shè)想47-49
• 文獻綜述49-56
• 參考文獻53-56
• 致謝56-57
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文57-58

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號：262231