基質(zhì)金屬蛋白酶3對急性眼高壓后大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞存活的影響
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《中南大學(xué)》 2014年
基質(zhì)金屬蛋白酶3對急性眼高壓后大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞存活的影響
胡涂
【摘要】:目的:(1)研究正常大鼠視網(wǎng)膜中基質(zhì)金屬蛋白酶3(Matrix metalloproteinase3, MMP3)的定位以及在急性眼高壓后大鼠視網(wǎng)膜中的表達情況,(2)檢測MMP3對急性眼高壓后視網(wǎng)膜節(jié)細胞存活的影響。 方法:所有的SD大鼠被隨機分成正常對照組、假手術(shù)組、急性眼高壓組、急性眼高壓+藥物組和急性眼高壓+溶劑組。急性眼高壓組的大鼠前房通過注射無菌生理鹽水升高眼內(nèi)壓至110mmHg并維持60min后緩慢降壓;急性眼高壓+藥物組和急性眼高壓+溶劑組大鼠在前房注射生理鹽水前30min腹腔注射NNGH (N-Isobutyl-N-(4-methoxyphenylsulfonyl)glycyl hydroxamic acid,一種MMP3高靈敏度抑制劑)和3%DMSO,之后以1次/8h給藥1d。;對照組大鼠不做任何處理;假手術(shù)組大鼠刺穿角膜后壓力維持在20mmHg,不加壓。動物分別存活6h、1d、3d、7d后處死。用western blotting、免疫組織化學(xué)、免疫熒光和免疫熒光雙標來檢測MMP3在正常成年大鼠視網(wǎng)膜中的分布和它對急性眼高壓后視網(wǎng)膜節(jié)細胞存活的影響。 結(jié)果: 1:MMP3在正常成年大鼠視網(wǎng)膜中其陽性產(chǎn)物主要分布在神經(jīng)纖維層、節(jié)細胞層、內(nèi)網(wǎng)層、內(nèi)核層和外網(wǎng)層的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞中。MMP3陽性產(chǎn)物在節(jié)細胞層與NeuN陽性產(chǎn)物明顯雙標;在內(nèi)核層邊緣部與部分Calbindin陽性產(chǎn)物和Parvalbumin陽性產(chǎn)物雙標;在內(nèi)網(wǎng)層和內(nèi)核層與PKC-α陽性產(chǎn)物雙標;MMP3陽性產(chǎn)物在內(nèi)外網(wǎng)層與Synaptophysin陽性產(chǎn)物明顯雙標;而在外核層MMP3的陽性產(chǎn)物與Rhodopsin陽性產(chǎn)物沒有明顯雙標;在節(jié)細胞層和神經(jīng)纖維層中,MMP3與GFAP陽性產(chǎn)物明顯雙標,與部分GS陽性產(chǎn)物雙標;在內(nèi)網(wǎng)層中,與部分CD11b陽性產(chǎn)物雙標。 2:急性眼高壓后MMP3的表達在早期呈現(xiàn)升高的趨勢,在3d時達到頂峰,然后下降。 3:NNGH干預(yù)后,大鼠視網(wǎng)膜中MMP3的表達在急性高眼壓1d和3d時與單純高眼壓組相比明顯降低,而大鼠視網(wǎng)膜中的節(jié)細胞數(shù)目在急性高眼壓3d時與單純高眼壓組相比明顯增加。 結(jié)論: MMP3定位于成年大鼠視網(wǎng)膜的神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞中,急性眼高壓后大鼠視網(wǎng)膜MMP3表達上調(diào),可能參與視網(wǎng)膜節(jié)細胞的丟失。
【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:中南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R775
【目錄】:
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