活化巨噬細(xì)胞對(duì)真菌性角膜炎細(xì)胞免疫狀態(tài)影響的實(shí)驗(yàn)研究
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《福建醫(yī)科大學(xué)》 2012年
活化巨噬細(xì)胞對(duì)真菌性角膜炎細(xì)胞免疫狀態(tài)影響的實(shí)驗(yàn)研究
胡穎峰
【摘要】:目的研究局部誘導(dǎo)角膜巨噬細(xì)胞活化后對(duì)真菌性角膜炎角膜、頜下淋巴結(jié)及外周血細(xì)胞免疫狀態(tài)的影響,進(jìn)一步探討機(jī)體免疫在真菌性角膜炎發(fā)生發(fā)展中的作用和地位。 方法實(shí)驗(yàn)分為三組,其中乳膠顆粒組通過角膜內(nèi)注射乳膠顆粒誘導(dǎo)活化巨噬細(xì)胞,然后與對(duì)照組一同采用角膜表層鏡片法構(gòu)建小鼠真菌性角膜炎模型,空白組為空白對(duì)照。在感染后第1、3、5、7天觀察真菌性角膜炎病程發(fā)展,進(jìn)行臨床評(píng)分;組織病理學(xué)檢測(cè)觀察角膜及頜下引流淋巴結(jié)病理學(xué)變化;免疫組化檢測(cè)角膜及頜下引流淋巴結(jié)T細(xì)胞亞群;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血T細(xì)胞亞群的變化。 結(jié)果1.乳膠顆粒組、對(duì)照組小鼠角膜均有F4/80陽性細(xì)胞的表達(dá),乳膠顆粒組較對(duì)照組陽性細(xì)胞表達(dá)量明顯增多,而空白組基本未檢測(cè)到F4/80陽性細(xì)胞的表達(dá),結(jié)果顯示乳膠顆粒組角膜巨噬細(xì)胞活化成功。 2.真菌性角膜炎早期乳膠顆粒組與對(duì)照組均表現(xiàn)為角膜水腫和局部浸潤灶的形成,未見明顯差異。病程中后期潰瘍形成并逐漸擴(kuò)大,可見大量新生血管,但乳膠顆粒組角膜后彈力層膨出及穿孔率明顯多于對(duì)照組,在感染后第3、5、7天兩組間有顯著性差別。組織病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果同臨床表現(xiàn)趨勢(shì)基本一致:乳膠顆粒組、對(duì)照組小鼠感染早期無明顯差別,均表現(xiàn)基質(zhì)膠原纖維間隙增大,少量炎癥細(xì)胞浸潤;第3、5、7天乳膠顆粒組角膜基質(zhì)板層結(jié)構(gòu)破壞普遍嚴(yán)重,炎癥細(xì)胞及新生血管明顯多于對(duì)照組。 3.免疫組織化學(xué)檢測(cè):隨著病程的發(fā)展乳膠顆粒組與對(duì)照組小鼠角膜CD3、CD4、CD8陽性細(xì)胞的表達(dá)量逐漸增多,,在第5天達(dá)到高峰,且乳膠顆粒組增多較對(duì)照組明顯,CD4/CD8比值增大(P0.01)。乳膠顆粒組與對(duì)照組頜下淋巴結(jié)隨著病程進(jìn)展CD3、CD4陽性細(xì)胞的表達(dá)量逐漸增多,在第5天達(dá)到高峰值,乳膠顆粒組增多較對(duì)照組明顯(P0.01);CD8陽性細(xì)胞表達(dá)較為平穩(wěn),CD4/CD8比值增大,兩組間未見明顯差別,。 4.外周血流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè):在病程早期外周血T細(xì)胞群未見明顯的改變,在第5天和第7天,乳膠顆粒組、對(duì)照組小鼠出現(xiàn)外周血CD4陽性細(xì)胞的表達(dá)下降,CD8陽性細(xì)胞表達(dá)增多(P0.01);CD4/CD8比值降低,與空白組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),但乳膠顆粒組與對(duì)照組之間的差別無顯著性。 結(jié)論1.通過角膜內(nèi)注射乳膠顆粒可成功誘導(dǎo)大量巨噬細(xì)胞向角膜中央遷移,活化巨噬細(xì)胞后的真菌性角膜炎局部炎性反應(yīng)加重,穿孔率升高。 2.細(xì)胞免疫在真菌性角膜炎免疫機(jī)制中起著重要的作用。巨噬細(xì)胞活化后角膜及頜下淋巴結(jié)的免疫反應(yīng)相對(duì)亢進(jìn),過度的免疫導(dǎo)致角膜損傷持續(xù)存在。 3.真菌性角膜炎病程中,出現(xiàn)全身免疫功能的低下。
【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R772.21
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