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  本文關(guān)鍵詞：柚皮素銅配合物、β-環(huán)糊精包合物對(duì)激光誘發(fā)大鼠脈絡(luò)膜新生血管形成的抑制作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《南京中醫(yī)藥大學(xué)》 2014年

柚皮素銅配合物、β-環(huán)糊精包合物對(duì)激光誘發(fā)大鼠脈絡(luò)膜新生血管形成的抑制作用

邵雁  

【摘要】：目的觀察柚皮素銅配合物、β-環(huán)糊精包合物對(duì)激光誘發(fā)的大鼠脈絡(luò)膜新生血管形成的抑制作用,并研究其作用機(jī)理。 方法選取50只(100眼)雄性Brown-Norway大鼠,其中40只建立大鼠脈絡(luò)膜新生血管模型,10只(20眼)作正常對(duì)照。動(dòng)物模型,隨機(jī)分為模型對(duì)照組和3個(gè)不同給藥對(duì)照組,每組10只。建立模型后,實(shí)驗(yàn)組大鼠均給予相等劑量的柚皮素、柚皮素銅配合物、β-環(huán)糊精包合物(20mg/kg/d)腹腔注射,正常對(duì)照組不給藥。各組于造模后30d,常規(guī)處死動(dòng)物,摘取眼球后,去除前節(jié),取視網(wǎng)膜-脈絡(luò)膜-鞏膜復(fù)合體標(biāo)本,在熒光顯微鏡下計(jì)算脈絡(luò)膜新生血管的面積；免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜中新生血管局部VEGF、COX-2的表達(dá)；real time-PCR及Western blot方法檢測(cè)各組大鼠脈絡(luò)膜組織中VEGF、 COX-2、PI3K、MAPK、MMP-2、MMP-9mRNA轉(zhuǎn)錄與蛋白的表達(dá)；采用差異蛋白組學(xué)檢測(cè)各組蛋白質(zhì)的表達(dá)差異。 結(jié)果 1.柚皮素與銅離子形成的配合物易溶于DMSO,柚皮素和β-CD形成了穩(wěn)定的包合物使柚皮素的水溶性提高了11.8倍,兩者提高了柚皮素的生物利用度。 2.模型動(dòng)物CNV觀察及面積計(jì)算(×103μm2):模型對(duì)照組為34.56±1.76、柚皮素組為20.90±1.47、柚皮素銅配合物組為13±1.43、柚皮素p-CD包合物組為13.24±1.33。各個(gè)實(shí)驗(yàn)組大鼠新生血管的面積均相對(duì)減少,柚皮素、柚皮素銅配合物及p-CD組面積明顯小于模型對(duì)照組(P0.05、0.01),柚皮素銅配合物及p-CD組均小于柚皮素組(P0.05)。但是,柚皮素銅配合物、p-CD包合物組相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05); 3.免疫組織化學(xué)檢查顯示：組織光凝區(qū)有瘢痕形成及棕黃色陽(yáng)性顆粒細(xì)胞表達(dá),模型對(duì)照組光凝區(qū)呈現(xiàn)大量棕色顆粒,COX-2、VEGF高表達(dá)；柚皮素組、柚皮素銅配合物組及β-CD包合物組,光凝區(qū)棕色顆粒減少,COX-2、VEGF表達(dá)弱陽(yáng)性。 4.RT-PCR:模型組mRNA表達(dá)相較于正常組明顯增強(qiáng),兩組間差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05、0.01)；與模型對(duì)照組相比,各實(shí)驗(yàn)組基因表達(dá)水平均有所下降,柚皮素銅配合物及p-CD包合物組下降幅度大于柚皮素組,除P38MAPK外,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P0.05)；柚皮素銅配合物與β-CD包合物兩組間相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 5.Western blotting:各組間的蛋白表達(dá)存在一定的差異性,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05、0.01)；模型組蛋白表達(dá)水平均高于正常對(duì)照組,差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05、0.01)；柚皮素銅配合物、β-CD包合物組蛋白表達(dá)低于柚皮素組,除P38MAPK、PI3K、MMP-2外,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但兩組之間無(wú)顯著性差異(P0.05)。 6.蛋白質(zhì)組分析：各組間蛋白質(zhì)表達(dá)具有較大的差異,除柚皮素銅配合物與β-CD包合物組外,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P0.05)。 結(jié)論相較于柚皮素,合成的銅配合物提高了其生物活性,β-CD包合物顯著增強(qiáng)了藥物的水溶性,兩者抑制CNV的作用增強(qiáng)；觀察到柚皮素銅配合物、β-CD包合物圍繞COX-2對(duì)相關(guān)信號(hào)通道及細(xì)胞因子表達(dá)的影響,在一定程度上,COX-2可調(diào)節(jié)VEGF、MMP-2、MMP-9的表達(dá),影響PI3K、MAPK信號(hào)通路的活化；從宏觀到微觀層面闡明了柚皮素銅配合物、β-CD包合物抑制CNV形成發(fā)展的作用及相關(guān)機(jī)制。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R773.4
【目錄】：

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7 邵雁;柚皮素銅配合物、β-環(huán)糊精包合物對(duì)激光誘發(fā)大鼠脈絡(luò)膜新生血管形成的抑制作用[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

8 楊運(yùn)周;柚皮素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的腦保護(hù)機(jī)理研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2006年

9 朱宏平;柚皮素對(duì)K562/A02細(xì)胞P-gp的影響及其與NF-κB的關(guān)聯(lián)研究[D];南昌大學(xué);2014年

10 白雪;柚皮素對(duì)大鼠局灶性腦缺血損傷的保護(hù)作用及對(duì)NOD2、RIP2、NF-κB、MMP-9和claudin-5表達(dá)影響的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

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