兔角膜內(nèi)皮損傷組織工程修復(fù).pdf
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兔角膜內(nèi)皮損傷的組織工程修復(fù) 摘要 眼球外壁的前1/6透明圓盤狀結(jié)構(gòu)為角膜,主要起到保護(hù)眼球和作為屈光介
質(zhì)的作用。角膜從前向后分為5層:上皮層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層和內(nèi)
皮層,其中,內(nèi)皮層由單層扁平或低立方內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,通過其Na+一K+ATP酶
的“泵”功能維持角膜的“脫水狀態(tài)”。成年角膜內(nèi)皮細(xì)胞不能再生,細(xì)胞受損
后由鄰近細(xì)胞擴(kuò)大、移行填補(bǔ)。當(dāng)細(xì)胞密度下降到其臨界值 700個(gè)/mm 時(shí),
角膜功能失代償、角膜水腫渾濁,嚴(yán)重時(shí)致盲即為角膜內(nèi)皮盲。目前,全世界有
1100萬角膜內(nèi)皮盲患者,,而臨床唯一有效的角膜內(nèi)皮盲治療手段是穿透性角膜
移植術(shù),即角膜移植。但異體角膜移植存在著免疫排斥反應(yīng)和供體缺乏等限制因
素。因此,研究者們致力于組織工程角膜內(nèi)皮的構(gòu)建。目前,常用的種子細(xì)胞包
括:角膜內(nèi)皮細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞和具有干細(xì)胞性質(zhì)的成體細(xì)胞;常
用的生物材料支架包括異體或異種角膜或角膜板層、天然或合成高分子材料。本
實(shí)驗(yàn)旨在通過以殼聚糖基水凝膠為支架、以體外培養(yǎng)的兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞為種子細(xì)
胞構(gòu)建組織工程角膜內(nèi)皮并對(duì)兔角膜內(nèi)皮損傷模型進(jìn)行組織工程修復(fù),為角膜內(nèi)
皮盲的治療提供依據(jù)。 本實(shí)驗(yàn)主要進(jìn)行了以下幾方面工作: 1 殼聚糖基水凝膠的毒性研究:對(duì)大鼠長(zhǎng)期腹腔注射殼聚糖基水凝膠,
通過監(jiān)測(cè)大鼠一般臨床狀況,測(cè)定肝臟、腎臟、脾臟相關(guān)血清生化指標(biāo)、臟器系
數(shù),觀察病理切片等手段,評(píng)價(jià)該水凝膠對(duì)大鼠主要臟器的亞慢性毒性;以殼聚
糖基水凝膠浸提液培養(yǎng)兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞,評(píng)價(jià)該水凝膠對(duì)兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞的毒
性。 2 兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)化:以含有幾種
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