本文關(guān)鍵詞：視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞放射損傷后miRNAs的差異表達(dá)及靶基因預(yù)測(cè)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《浙江大學(xué)》 2013年

視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞放射損傷后miRNAs的差異表達(dá)及靶基因預(yù)測(cè)

朱美娟  

【摘要】：[目的]研究不同劑量的x放射線對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGCs)生存率的影響；初步篩查x放射線照射后的RGCs中差異表達(dá)的miRNAs,并預(yù)測(cè)其靶基因。 [方法]用OGy、2Gy、4Gy、Gy、8Gy的X放射線照射生長(zhǎng)24h的RGCs,每日在倒置相差顯微鏡下觀察各組細(xì)胞的密度和形態(tài)變化。MTT法檢測(cè)照射后第5天各組RGCs的存活率。應(yīng)用miRNA芯片檢測(cè)6Gy和0GyX放射線照射后第3天的RGCs中差異表達(dá)的miRNAs。qRT-PCR驗(yàn)證芯片結(jié)果的準(zhǔn)確性。應(yīng)用Targetscan和microRNAorg兩種靶基因預(yù)測(cè)軟件預(yù)測(cè)表達(dá)差異較明顯的5種miRNAs的靶基因。 [結(jié)果] X線照射后前4天各組的細(xì)胞密度和細(xì)胞形態(tài)均無明顯差別,但第5天,4Gy、6Gy和8Gy照射組的細(xì)胞密度降低,細(xì)胞形態(tài)也發(fā)生了變化。MTT示4Gy、6Gy和8Gy照射組的細(xì)胞存活率比OGy對(duì)照組明顯降低(p0.01)。miRNA芯片結(jié)果顯示6Gy照射組中差異表達(dá)的miRNAs有37個(gè),其中上調(diào)的有16種,下調(diào)的有31種。其中6種miRNAs (miR-192、-34a*、-877、-34c、-34a、-22)上調(diào)1.5倍以上,6種miRNAs (miR-212、-338、-219-5p、-503、-210、miR-505*)下調(diào)至0.667倍以下。qRT-PCR證明芯片的結(jié)果可靠。靶基因軟件預(yù)測(cè)的5種miRNAs的靶基因參與細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)育、分化、凋亡和抗凋亡等過程。 [結(jié)論]8Gy的x放射線能造成RGCs損傷；總劑量6GY的x放射線能夠引起RGCs中一些miRNAs的表達(dá)變化；差異表達(dá)的miRNAs可能通過調(diào)控其靶基因參與在RGCs的放射損傷過程中。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R774.1
【目錄】：

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本文編號(hào)：174267