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華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文應(yīng)用GSTpull-down篩查HSF4b相互作用蛋白姓名:甘冠騎申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):遺傳學(xué)指導(dǎo)教師:劉木根2011-01-26華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文 I 摘要白內(nèi)障是最重要的人類(lèi)眼科疾病,是人類(lèi)失明的最主要原因。熱休克蛋白4(HSF4)屬于熱休克轉(zhuǎn)錄因子(HSFs)家族,該家族成員可在熱或其它應(yīng)***況時(shí),激活熱休克反應(yīng)基因,調(diào)控細(xì)胞正常的生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程。HSF4基因是一個(gè)白內(nèi)障致病基因,其突變可引起先天性白內(nèi)障和年齡相關(guān)性白內(nèi)障。HSF4有兩種可變剪接本,編碼不同的亞型HSF4a和HSF4b,這兩種剪接轉(zhuǎn)錄本可能具有不同的功能,其中HSF4b在晶狀體中高度表達(dá),被認(rèn)為與白內(nèi)障發(fā)生高度相關(guān)。盡管幾個(gè)不同的研究小組制備了knock-out小鼠,但目前對(duì)HSF4突變引起白內(nèi)障的分子機(jī)制仍不清楚。發(fā)現(xiàn)HSF4基因的相互作用蛋白,對(duì)于揭示HSF4突變導(dǎo)致白內(nèi)障形成的分子機(jī)理具有重要意義。我們實(shí)驗(yàn)室克隆了HSF4的cDNA全長(zhǎng)序列,并構(gòu)建了晶狀體細(xì)胞cDNA文庫(kù)。應(yīng)用酵母雙雜交篩選,我們得到一些與HSF4b可能存在相互作用的蛋白,其中包括鋅指轉(zhuǎn)錄因子143(ZNF143),藍(lán)白斑實(shí)驗(yàn)表明這兩個(gè)基因存在相互作用。本研究中,我們首先選用GST pull-down試驗(yàn),來(lái)驗(yàn)證是否HSF4b與ZNF143存在相互作用。我們構(gòu)建了能表...
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本文編號(hào):172517
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