本文選題：光損傷　切入點(diǎn)：色素上皮　出處：《遵義醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文

【摘要】：目的探討藍(lán)光導(dǎo)致人視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)細(xì)胞胞內(nèi)鈣離子濃度變化；L-型鈣通道亞基α1D基因表達(dá)的變化；RPE分泌VEGF, bFGF及PEDF的變化及其與L-型鈣通道神經(jīng)內(nèi)分泌亞型(α1D)亞基蛋白表達(dá)變化之間的關(guān)系。以及二氫吡啶類(lèi)化合物(Dihydropyridines, DHPs)硝苯地平、(-)Bay K8644是否可以干預(yù)。 方法將第四代體外培養(yǎng)的人RPE細(xì)胞隨機(jī)分為4組,A組：對(duì)照組；B組：光照組；C組：光照+硝苯地平組；D組：光照+(-)Bay K8644組,用2000±5001ux藍(lán)光照射體外培養(yǎng)的人RPE細(xì)胞6h,24h終止培養(yǎng),酶聯(lián)免疫法測(cè)定細(xì)胞分泌的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vascular endothelial cell growth factor, VEGF)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor, bFGF),色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor, PEDF);蛋白免疫印跡(Western blot)技術(shù)檢測(cè)L-型鈣通道α1D亞基的蛋白表達(dá)；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶聯(lián)反應(yīng)(RT-RCR)與熒光定量PCR技術(shù)分析L-型鈣通道神經(jīng)內(nèi)分泌亞基α1DmRNA的表達(dá)；用激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度。 結(jié)果(1)RPE細(xì)胞分泌功能變化：VEGF：光照組與光照+(-)Bay K8644組高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000,0.000)；光照+(-)Bay K8644組VEGF濃度高于光照組(P=0.000)；光照+硝苯地平組低于光照組和對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000,0.001)。bFGF：光照組,光照+(-)Bay K8644組高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.019,0.000)；光照+硝苯地平組bFGF濃度低于光照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)；光照+(-)BayK8644組bFGF濃度高于光照組(P=0.006)光照+硝苯地平組與對(duì)照組比較bFGF差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.078)。PEDF：光照組、光照+硝苯地平組、光照+(-)Bay K8644組與對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.318,0.411,0.860)；光照+硝苯地平組、光照+(-)Bay K8644組與光照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.856,0.243)；光照+(-)Bay K8644組與光照+硝苯地平組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.321) (2)RPE細(xì)胞L-型鈣通道α1D亞基蛋白表達(dá)的變化：光照組、光照+(-)Bay K8644組α1D亞基/βactinIOD值均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000,0.000)；光照+(-)Bay K8644組高于光照+硝苯地平組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。聚丙烯酰胺凝膠顯示光照組和光照+(-)Bay K8644組α1D亞基蛋白表達(dá)高于對(duì)照組與光照+硝苯地平組。 (3)各組RPE細(xì)胞L-型鈣通道α1D亞基蛋白表達(dá)量與RPE細(xì)胞分泌VEGF濃度存在正相關(guān),相關(guān)函數(shù)為Y=0.7377X+0.4392,(Y為VEGF濃度,X為α1D亞基蛋白表達(dá)量),相關(guān)系數(shù)r有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(r=0.674,F=8.333,P=0.016),各組RPE細(xì)胞L-型鈣通道α1D亞基蛋白表達(dá)量與RPE細(xì)胞分泌bFGF濃度相關(guān)函數(shù)為Y=0.0739X+0.2466, (Y為bFGF濃度,X為α1D亞基蛋白表達(dá)量),相關(guān)系數(shù)r無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.537,F=4.061,P=0.072)。 (4)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化：光照組、(-)BayK8644組、光照+(-)BayK8644組RPE胞內(nèi)鈣離子熒光強(qiáng)度高于無(wú)光照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000,0.000,0.000),硝苯地平組低于無(wú)光照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000),光照+硝苯地平組與無(wú)光照組相比較,硝苯地平組與光照+硝苯地平組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000,0.000),(-)BayK8644組與光照+(-)BayK8644組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.155)。 (5)α1D亞基mRNA的表達(dá)：光照組、光照+(-)Bay K8644組與光照+硝苯地平組α1D亞基mRNA均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.023,0.006,0.010)；光照+(-)Bay K8644組高于光照組與光照+硝苯地平組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.032,0.039)；光照+硝苯地平組與光照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.459)。 結(jié)論(1)藍(lán)光照射導(dǎo)致人RPE細(xì)胞L-型鈣通道α1D亞基mRNA及蛋白表達(dá)量升高,VEGF,bFGF分泌量增加,α1D亞基蛋白表達(dá)與分泌VEGF量之間呈正相關(guān)；(2)鈣通道抑制劑硝苯地平可以使人RPE細(xì)胞α1D亞基蛋白表達(dá)降低,VEGF, bFGF分泌減少,而該通道激動(dòng)劑(-)Bay K8644使人RPE細(xì)胞α1D亞基蛋白表達(dá)上調(diào),VEGF, bFGF分泌增多。(3)鈣離子濃度升高參與藍(lán)光照射導(dǎo)致體外培養(yǎng)的人RPE細(xì)胞的損傷過(guò)程。
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【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：R774.1

【參考文獻(xiàn)】

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1 蔡善君,嚴(yán)密,張軍軍,毛詠秋;藍(lán)光對(duì)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞線粒體膜電位及細(xì)胞色素C的影響[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2005年01期

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本文編號(hào)：1720762