本文關(guān)鍵詞：枸杞蛋白酶解液對(duì)SHR大鼠的降壓效果研究

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【摘要】：目的:高血壓是心血管疾病發(fā)病的最重要危險(xiǎn)因素之一。對(duì)血壓的控制是降低心腦血管疾病的發(fā)病率、致殘率和死亡率的有效措施。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制肽是通過(guò)影響腎素-血管緊張素系統(tǒng)和激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)而調(diào)節(jié)機(jī)體血壓的。合成的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑是目前用于治療高血壓的重要藥物,食物蛋白源性ACE抑制肽因其安全性高成為活性肽研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)堿提酸沉法,從枸杞中提取枸杞蛋白,并利用蛋白酶分解所得枸杞蛋白酶解液,觀察其對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠的降壓效果,為制備天然枸杞ACE抑制肽和臨床防治高血壓病提供理論依據(jù)。方法:選取10-11周齡,體重240-280g的雄性高血壓大鼠(SHR)40只和正常Wistar-Kyoto(WKY)大鼠8只,經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)1W后,根據(jù)所測(cè)基礎(chǔ)血壓及體重,按隨機(jī)數(shù)字隨機(jī)分為6組(每組8只),分別為:WKY正常對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組、低劑量組(枸杞蛋白酶解液40mg/kg)、中劑量組(枸杞蛋白酶解液80mg/kg)和高劑量組(枸杞蛋白酶解液100mg/kg)。實(shí)驗(yàn)組經(jīng)灌胃給予不同濃度的枸杞蛋白酶解液,陰性對(duì)照組和WKY正常對(duì)照組灌胃給予相應(yīng)劑量的蒸餾水,陽(yáng)性對(duì)照組灌胃給予10mg/kg卡托普利。各組動(dòng)物每日灌胃1次,實(shí)驗(yàn)周期為9W,實(shí)驗(yàn)期內(nèi)各組動(dòng)物自由進(jìn)食飲水。采用無(wú)創(chuàng)多通道尾動(dòng)脈測(cè)壓實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)于每周在固定時(shí)間測(cè)量大鼠清醒狀態(tài)下的尾動(dòng)脈SBP、DBP和心率,每次測(cè)血壓3次,取3次測(cè)定的平均值為該測(cè)試點(diǎn)的血壓和心率值。比較各組大鼠血壓變化,同時(shí)觀察大鼠的毛色、激惹度、飲水量等。飼養(yǎng)結(jié)束后,戊巴比妥鈉麻醉,腹主動(dòng)脈取血,采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定大鼠血漿中血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的含量,Real-time PCR法比較WKY、SHR大鼠心臟和腎臟組織中ACE、AT1R、ACE2和MasR mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果:(1)大鼠的一般行為觀察:實(shí)驗(yàn)期間,WKY組的大鼠鼠毛有光澤,雙眼靈活有神,行動(dòng)敏捷,對(duì)周圍變化反應(yīng)靈敏;SHR大鼠鼠毛無(wú)光澤且飲水量多,同時(shí)在提尾或捉持頸部時(shí),抵抗劇烈、尖叫、暴跳,同籠大鼠頻繁打斗、咬人等攻擊性。SHR大鼠經(jīng)兩周治療后,精神狀態(tài)好轉(zhuǎn),毛發(fā)逐漸有光澤。(2)大鼠進(jìn)食量、體重及心率變化:SHR大鼠的進(jìn)食量均明顯高于WKY(P0.05),但SHR大鼠間進(jìn)食量無(wú)明顯差異(P0.05)。實(shí)驗(yàn)前,各組大鼠的體重,兩兩比較差異無(wú)顯著性(P0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),與WKY相比,SHR大鼠各組的體重均明顯下降(P0.05),但各組之間心率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。(3)大鼠臟器質(zhì)量與臟器系數(shù):與WKY組相比較,各組SHR大鼠心臟系數(shù)、腎臟系數(shù)和肝臟系數(shù)均明顯升高(P0.05);但肺臟系數(shù)和脾臟系數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。(4)枸杞蛋白酶解液對(duì)SHR大鼠血壓的影響:實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí),SHR大鼠各組血壓均明顯高于WKY組(P0.05),但SHR大鼠各組間無(wú)明顯差異(P0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),與陰性對(duì)照組相比較,陽(yáng)性對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組大鼠血壓明顯降低。(5)枸杞蛋白酶解液對(duì)SHR大鼠血漿AngⅡ含量的影響:與WKY組比較,陰性對(duì)照組和高劑量組的AngⅡ含量均顯著升高;與陰性對(duì)照組比較,低劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組的AngⅡ含量均顯著下降(P0.05);中、高劑量組的AngⅡ含量均無(wú)明顯差異(P0.05)。(6)WKY、SHR大鼠腎臟組織中ACE、AT1R、ACE2和MasR mRNA的表達(dá)水平:與WKY組(1.000±0.085)相比,陰性對(duì)照組(2.624±0.631)、中劑量組(2.287±1.716)和高劑量組(2.396±0.632)大鼠腎臟中ACEmRNA表達(dá)水平均顯著升高(P0.05);與陰性對(duì)照組相比(2.624±0.631),陽(yáng)性對(duì)照組(1.230±0.540)和低劑量組(1.260±0.643)ACEmRNA表達(dá)水平均顯著降低(P0.05);與WKY組相比,SHR大鼠腎臟中ACE2mRNA表達(dá)水平均顯著下降(P0.05),與陰性對(duì)照組(0.427±0.085)相比,陽(yáng)性對(duì)照組(0.659±0.134)和低劑量組(0.601±0.134)ACE2mRNA表達(dá)水平均顯著升高(P0.05);ATIR受體,Mas受體mRNA表達(dá)分別與ACE、ACE2mRNA表達(dá)趨勢(shì)基本一致,但沒(méi)有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:1、枸杞蛋白酶解液對(duì)SHR有一定程度的降壓作用。2、枸杞蛋白酶解液可能通過(guò)調(diào)節(jié)ACE-AngII-AT1通路和ACE2-Ang(1-7)-Mas通路的平衡達(dá)到降壓效果。
【關(guān)鍵詞】：枸杞蛋白 酶解液 ACE抑制肽 降血壓
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R544.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 中英文縮略詞表10-12
• 前言12-16
• 材料與方法16-26
• 1 實(shí)驗(yàn)材料16-17
• 2 研究方法17-26
• 研究結(jié)果26-41
• 1 大鼠一般情況26-29
• 2 大鼠血壓29-35
• 3 枸杞蛋白酶解液對(duì)SHR血漿AngⅡ含量的影響35-36
• 4 大鼠心臟、腎臟組織中ACE，，AT1R，ACE2和MasR mRNA表達(dá)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析36-41
• 討論41-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-54
• 綜述54-63
• 參考文獻(xiàn)58-63
• 致謝63-64
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文64-65
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷65

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本文編號(hào)：929550