本文關(guān)鍵詞：C3G基因?qū)9C2心肌細(xì)胞凋亡和增殖的影響

  更多相關(guān)文章： CG 心肌細(xì)胞 凋亡 增殖 P-ERK/蛋白 bcl-相關(guān)X蛋白質(zhì)

【摘要】：目的探討C3G基因?qū)9C2心肌細(xì)胞凋亡、增殖的影響及其機(jī)制。方法構(gòu)建RNA干擾慢病毒,購買p CXN2-Flag空質(zhì)粒和p CXN2-Flag-h C3G過表達(dá)人C3G m RNA質(zhì)粒。分別用空白試劑、陰性慢病毒、C3G si RNA慢病毒、C3G si RNA慢病毒+空質(zhì)粒、C3G si RNA慢病毒+h C3G質(zhì)粒隨機(jī)感染和轉(zhuǎn)染H9C2心肌細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)被隨機(jī)分為5個組,即空白對照組、陰性對照組、沉默C3G組、沉默C3G+空質(zhì)粒組和沉默C3G+過表達(dá)人C3G組。轉(zhuǎn)染質(zhì)粒72h后,采用RTPCR法檢測目的基因C3G m RNA的表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)檢測H9C2心肌細(xì)胞的凋亡情況,MTT比色法測定細(xì)胞增殖率,Western blotting檢測細(xì)胞C3G、p-ERK1/2、Bax及Flag的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果陰性對照組和沉默C3G組經(jīng)嘌呤霉素篩選,85%以上細(xì)胞被綠色熒光蛋白標(biāo)記,提示細(xì)胞被慢病毒感染。與空白對照組和陰性對照組比較,沉默C3G組和沉默C3G+空質(zhì)粒組的細(xì)胞中Bax蛋白表達(dá)水平和細(xì)胞凋亡率均明顯增加(P0.01,P0.05),且這兩組細(xì)胞C3G m RNA、C3G蛋白、p-ERK1/2蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞增殖率均明顯降低(P0.01,P0.05);與沉默C3G組和沉默C3G+空質(zhì)粒組比較,沉默C3G+過表達(dá)人C3G組的細(xì)胞中Bax蛋白表達(dá)水平和細(xì)胞凋亡率明顯降低(P0.01,P0.05),且細(xì)胞中C3G m RNA、C3G蛋白、p-ERK1/2蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞增殖率則明顯增加(P0.01,P0.05)。結(jié)論沉默C3G基因能有效抑制細(xì)胞的增殖,促進(jìn)H9C2心肌細(xì)胞凋亡;過表達(dá)C3G基因能逆轉(zhuǎn)沉默C3G基因?qū)9C2心肌細(xì)胞的影響,表現(xiàn)為細(xì)胞凋亡減少,增殖明顯,其機(jī)制可能與C3G基因?qū)-ERK1/2蛋白和促凋亡分子Bax的調(diào)控有關(guān)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院老年病科;
【關(guān)鍵詞】： CG 心肌細(xì)胞 凋亡 增殖 P-ERK/蛋白 bcl-相關(guān)X蛋白質(zhì)
【基金】：國家臨床重點(diǎn)�？平ㄔO(shè)項(xiàng)目(國衛(wèi)辦醫(yī)函[2013]544號) 重慶市衛(wèi)生局醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(2009-2-290,04-2-154) 重慶市科委自然科學(xué)基金計(jì)劃資助項(xiàng)目(CSTC2007BB5276)~~
【分類號】：R542.2
【正文快照】： 大量動物模型及心臟病患者的心肌組織學(xué)研究表明,各種心肌疾病中均存在心肌細(xì)胞凋亡現(xiàn)象[1],它是導(dǎo)致心臟功能惡化、各種慢性心衰的主要因素[2-3]。目前,關(guān)于心肌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制還在探索階段。近年來大量研究證明C3G參與心臟的發(fā)育、生長等多個過程[4-6]。我們前期研究發(fā)

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7 張建龍;尼莫地平對大鼠急性心肌缺血損傷的保護(hù)作用及其對心肌細(xì)胞凋亡的影響[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2007年

8 萬莉;冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白在心肌細(xì)胞凋亡中的保護(hù)作用[D];南昌大學(xué);2012年

9 聶園園;外源性視黃酸誘導(dǎo)乳鼠心肌細(xì)胞凋亡的研究[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2012年

10 孟祥熙;組蛋白去乙酰化酶抑制劑對50%TBSAⅢ°燙傷大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響及相關(guān)機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

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