本文關(guān)鍵詞：硫化氫對急性心肌缺血大鼠心肌細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 硫化氫 急性心肌缺血損傷 糖原合成酶激酶-3β β-連環(huán)蛋白 SB216763 凋亡 大鼠

【摘要】：第一部分急性心肌缺血大鼠心肌glycogen synthase kinase-3β/β-catenin信號通路蛋白的變化目的:觀察大鼠急性心肌缺血過程中心肌組織GSK-3β及β-catenin蛋白表達(dá)水平的變化。方法:1健康雄性SD大鼠(270±20g)40只,隨機(jī)分成5組:(1)假手術(shù)組;(2)缺血2h組;(3)缺血3h組;(4)缺血6h組;(5)缺血9h組。通過結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支(LAD)建立急性心肌缺血模型。大鼠麻醉后連接心電圖,記錄術(shù)前II導(dǎo)聯(lián)心電圖,消毒手術(shù)區(qū)域,術(shù)后2min再次記錄心電圖的變化,以S-T段較術(shù)前抬高0.15mv以上作為造模成功。假手術(shù)組大鼠只穿線不結(jié)扎。2缺血組分別于缺血后2h、3h、6h和9h用Powerlab8/s多通道生理記錄儀記錄各組大鼠的平均動脈壓(MAP)、左室發(fā)展壓(LVDP)、左室舒張末壓(LVEDP)、左室壓力變化速率(dp/dtmax,dp/dtmin)。3取血分離血清,測定乳酸脫氫酶(LDH)活性。4取心臟,HE染色觀察心肌組織形態(tài)學(xué)變化。5蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測p-GSK-3β、t-GSK-3β和β-catenin蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1與假手術(shù)組大鼠比較,心肌缺血3h、6h、9h時,MAP、LVDP、dp/dtmax、dp/dtmin均明顯降低(P0.01),LVEDP顯著升高(P0.01);2與假手術(shù)組大鼠比較,心肌缺血3h、6h、9h血清中LDH活性均顯著升高(P0.01);3假手術(shù)組大鼠心肌細(xì)胞排列整齊,著色均勻。心肌缺血6h及缺血9h組大鼠心臟部分區(qū)域心肌纖維橫紋不齊或消失,核偏移甚至裂解消失,有炎癥因子滲出;4各組大鼠心肌組織中t-GSK-3β的表達(dá)無顯著變化,與假手術(shù)組大鼠比較,缺血3h、6h、9h組大鼠心肌p-GSK-3β、p-GSK-3β/t-GSK-3β、β-catenin蛋白表達(dá)水平均顯著降低(P0.01)。第二部分硫化氫通過glycogen synthase kinase-3β/β-catenin信號途徑介導(dǎo)心肌損傷后抗細(xì)胞凋亡作用目的:觀察硫化氫外源性供體硫氫化鈉(Sodium hydrosulfide,Na HS)對大鼠急性心肌缺血組織細(xì)胞凋亡的影響,并探討其相關(guān)作用機(jī)制。方法:1健康雄性SD大鼠(270±20g)56只,隨機(jī)分成7組:(1)假手術(shù)組;(2)心肌缺血組;(3)心肌缺血+Na HS低劑量(0.78mg/kg,i.p.)組;(4)心肌缺血+Na HS中劑量(1.56mg/kg,i.p.)組;(5)心肌缺血+Na HS高劑量(3.12mg/kg,i.p.)組;(6)心肌缺血+SB216763(0.6mg/kg,i.v.)組;(7)心肌缺血+溶劑對照(1%DMSO,2ml/kg,i.v.)組。各組大鼠均于缺血3h給藥,術(shù)后6h處死并取材。通過結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支建立急性心肌缺血模型。假手術(shù)組大鼠只穿線不結(jié)扎。2用Powerlab8/s多通道生理記錄儀記錄各組大鼠平均動脈壓(MAP)、左室發(fā)展壓(LVDP)、左室舒張末壓(LVEDP)、左室壓力變化速率(dp/dtmax,dp/dtmin)。3取血分離血清,測定乳酸脫氫酶(LDH)活性。4取心臟,HE染色觀察心肌組織形態(tài)學(xué)變化。5 TUNEL染色檢測心肌細(xì)胞凋亡率。6 Western blot檢測p-GSK-3β、t-GSK-3β、β-catenin、Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)水平。免疫組織化學(xué)法(IHC)測定β-catenin、Bax和Bcl-2表達(dá)。結(jié)果:1與假手術(shù)組大鼠比較,心肌缺血組大鼠MAP、LVDP、dp/dtmax、dp/dtmin均顯著降低(P0.01),LVEDP顯著升高(P0.01)。與心肌缺血組大鼠比較,心肌缺血+Na HS低、中、高劑量組大鼠MAP、LVDP、dp/dtmax、dp/dtmin均顯著升高(P0.05或P0.01),LVEDP顯著降低(P0.01);2與假手術(shù)組大鼠比較,心肌缺血組大鼠血清LDH活性顯著升高(P0.01)。與心肌缺血組比較,心肌缺血+Na HS低、中、高劑量組大鼠血清LDH活性顯著降低(P0.05或P0.01);3 HE染色光鏡觀察心肌組織形態(tài)學(xué)變化:假手術(shù)組大鼠心肌細(xì)胞排列整齊,著色均勻。心肌缺血組大鼠部分區(qū)域心肌纖維橫紋不齊或消失,核偏移甚至裂解消失,有炎性因子滲出,心肌缺血+Na HS低、中、高劑量組大鼠也有心肌細(xì)胞變性的改變,但程度較缺血組輕;4與假手術(shù)組大鼠比較,心肌缺血組大鼠心肌細(xì)胞凋亡率、Bax表達(dá)水平顯著升高(P0.01),Bcl-2表達(dá)水平顯著降低(P0.01)。與心肌缺血組大鼠比較,心肌缺血+Na HS低、中、高劑量組大鼠心肌細(xì)胞凋亡率、Bax表達(dá)水平顯著降低(P0.05或P0.01),Bcl-2表達(dá)水平顯著升高(P0.05或P0.01);5與假手術(shù)組大鼠比較,心肌缺血組p-GSK-3β、p-GSK-3β/t-GSK-3β、β-catenin表達(dá)水平均顯著降低(P0.01)。與心肌缺血組大鼠比較,心肌缺血+Na HS低、中、高劑量組大鼠心肌p-GSK-3β、p-GSK-3β/t-GSK-3β、β-catenin表達(dá)水平均顯著升高(P0.05或P0.01);6與心肌缺血+溶劑對照組大鼠比較,心肌缺血+SB組大鼠心肌組織中p-GSK-3β與β-catenin表達(dá)均顯著增加(P0.01),此外心肌缺血+SB組大鼠可顯著升高M(jìn)AP、LVDP、dp/dtmax、dp/dtmin(P0.01),降低LVEDP(P0.01),降低血清中LDH活性(P0.01),降低心肌細(xì)胞凋亡率以及Bax/Bcl-2水平(P0.01)。結(jié)論:1在急性心肌缺血大鼠心肌組織中t-GSK-3β表達(dá)水平無明顯變化,而p-GSK-3β和β-catenin表達(dá)水平均顯著降低。2硫化氫可顯著減輕急性心肌缺血引起的心肌細(xì)胞凋亡。3硫化氫的抗心肌細(xì)胞凋亡作用機(jī)制可能與GSK-3β/β-catenin信號途徑有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：硫化氫 急性心肌缺血損傷 糖原合成酶激酶-3β β-連環(huán)蛋白 SB216763 凋亡 大鼠
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R54
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 引言12-13
• 第一部分 急性心肌缺血大鼠心肌glycogen synthase kinase-3β/β-catenin信號通路蛋白的變化13-34
• 前言13-14
• 材料與方法14-19
• 結(jié)果19-20
• 附圖20-27
• 附表27-29
• 討論29-31
• 小結(jié)31-32
• 參考文獻(xiàn)32-34
• 第二部分 硫化氫通過glycogen synthase kinase-3β/β-catenin信號途徑介導(dǎo)心肌損傷后抗細(xì)胞凋亡作用34-59
• 前言34-35
• 材料與方法35-40
• 結(jié)果40-42
• 附圖42-52
• 附表52-54
• 討論54-55
• 小結(jié)55-56
• 參考文獻(xiàn)56-59
• 結(jié)論59-60
• 綜述 糖原合成酶激酶-3β 在心血管疾病中的研究進(jìn)展60-75
• 參考文獻(xiàn)68-75
• 致謝75-76
• 個人簡歷76

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 林蔚;孟凡玲;趙靜;白旭東;;超聲心動圖對大鼠急性心肌梗死的評價作用[J];中國超聲醫(yī)學(xué)雜志;2012年01期

2 張雄;李昱;;姜黃素通過抑制GSK-3β的活性防治AD的體外研究[J];中國藥理學(xué)通報;2009年11期

3 苗冬梅;曹瑞華;劉源;王東曉;王瑞芳;秦宇紅;陳剛;;高頻超聲心動圖對心肌梗死大鼠左心室重構(gòu)的動態(tài)研究[J];中國康復(fù)理論與實踐;2009年04期

4 張宇紅;葉民;汪錫金;王剛;楊紅旗;馬建芳;王志全;陳生弟;;紅景天甙對帕金森病模型小鼠PI3K/蛋白激酶B信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響[J];臨床神經(jīng)病學(xué)雜志;2008年02期

5 楊國勛;劉唐威;鐘國強(qiáng);李金軼;;心電圖在家兔急性心肌梗死診斷中的應(yīng)用[J];廣西醫(yī)學(xué);2007年08期

6 蔣青松;黃燮南;周岐新;楊貴忠;戴支凱;吳芹;石京山;;鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶信號通路參與PGF_(2α)誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大[J];中國病理生理雜志;2007年07期

7 孫莉;李樹青;;高血壓致左室肥厚的發(fā)生機(jī)制及其治療進(jìn)展[J];中國心血管病研究雜志;2007年04期

8 景宏美;秦曉同;李曉飛;李愛林;劉才旺;瞿玲謙;;腦鈉肽與高血壓左室肥厚的關(guān)系[J];中國心血管病研究雜志;2006年10期

，

本文編號：776464