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多層面驗(yàn)證共培養(yǎng)微環(huán)境誘導(dǎo)法誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞心肌樣分化

發(fā)布時間:2017-08-29 00:29

  本文關(guān)鍵詞:多層面驗(yàn)證共培養(yǎng)微環(huán)境誘導(dǎo)法誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞心肌樣分化


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【摘要】:目的:為了多層面探討共培養(yǎng)微環(huán)境誘導(dǎo)法定向誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)心肌樣分化的可行性。方法:取第3代MSCs與原代心肌細(xì)胞(CMs)進(jìn)行共培養(yǎng)。在顯微鏡下觀察誘導(dǎo)1周后的MSCs形態(tài)學(xué)變化,用免疫熒光和實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)分別檢測誘導(dǎo)的MSCs中心肌肌鈣蛋白I(cTn I)、α-肌動蛋白(α-actin)、Nkx-2.5和GATA-4的基因表達(dá)變化情況。采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)分別檢測誘導(dǎo)組和對照組的代謝產(chǎn)物。結(jié)果:誘導(dǎo)1周后的MSCs形態(tài)呈心肌樣改變,cTn I、α-actin、Nkx-2.5和GATA-4的基因表達(dá)均明顯升高,正交最小偏二乘法判別分析(OPLS-DA)模型顯示誘導(dǎo)的MSCs代謝物向CMs轉(zhuǎn)變趨勢明顯。通過多元和單元統(tǒng)計(jì)分析篩選差異變量,根據(jù)一級質(zhì)譜和二級質(zhì)譜比對結(jié)果,最終確定12種差異代謝物。與未經(jīng)誘導(dǎo)的MSCs相比,經(jīng)誘導(dǎo)的MSCs與CMs中變化趨勢相同的差異代謝物有7種。結(jié)論:無論從形態(tài)、基因、蛋白質(zhì)還是代謝層面看,MSCs通過與CMs間接接觸共培養(yǎng)后均發(fā)生了心肌樣改變,但是與CMs仍存在差異。
【關(guān)鍵詞】:共培養(yǎng)微環(huán)境 代謝組學(xué) 心肌樣分化 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 心肌細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R54
【目錄】:
  • 英漢縮略語名詞對照4-5
  • 中文摘要5-6
  • 英文摘要6-8
  • 前言8-9
  • 1 材料和方法9-12
  • 2 結(jié)果12-18
  • 3 討論18-21
  • 全文總結(jié)21-22
  • 參考文獻(xiàn)22-25
  • 文獻(xiàn)綜述25-32
  • 參考文獻(xiàn)28-32
  • 致謝32-33
  • 碩士期間發(fā)表的論文33

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號:750374

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