發(fā)布時間：2017-08-24 17:08

  本文關(guān)鍵詞：異甘草素對自發(fā)性高血壓大鼠腦基底動脈平滑肌細胞大電導(dǎo)鈣激活鉀通道的作用

  更多相關(guān)文章： 腦基底動脈 異甘草素 平滑肌細胞 大電導(dǎo)鈣激活鉀通道 環(huán)磷酸鳥苷 膜片鉗 ELISA

【摘要】：目的:研究異甘草素(Isoliquiritigenin,ISL)對自發(fā)性高血壓大鼠(Spontaneously hypertension rats,SHR)腦基底動脈血管平滑肌細胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(Large conductance Ca-activated K 2++channel,BKCa)的調(diào)節(jié)作用。方法:在使用異甘草素干預(yù)處理前后,用尾動脈測壓儀觀察SHR血壓變化;依次用10-5mol/L苯腎上腺素(phenylephrine,PE)、10-5 mol/L苯腎上腺素和10-4 mol/L異甘草素、10-5mol/L苯腎上腺素分別對SHR腦基底動脈灌流后,腦基底動脈的直徑應(yīng)用壓力型小動脈儀進行測量;用全細胞膜片鉗技術(shù)研究SHR腦基底動脈平滑肌細胞(VSMC)BKCa通道電流的變化;用ELISA技術(shù)觀察SHR腦基底動脈內(nèi)c GMP水平變化。結(jié)果:(1)ISL干預(yù)前SHR血壓是(218.3±1.6)mm Hg,與WKY血壓(119±2.1)mm Hg相比,兩者具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(p0.01,n=6)。與ISL干預(yù)前相比,ISL灌胃(12mg/kg.d)14天后SHR血壓降至(119.2±1.9)mm Hg(p0.01,n=6),但與WKY血壓沒有明顯差異;(2)含有PE(10-5 mol/L)的PSS液體在壓力型小動脈測量儀水浴槽內(nèi)持續(xù)對血管段進行灌流,待血管段收縮狀態(tài)穩(wěn)定后,再用含有ISL(10-4 mol/L)和PE(10-5 mol/L)的PSS液體持續(xù)灌流沖洗,血管舒張達到穩(wěn)定狀態(tài)后,給予含PE(10-5 mol/L)的PSS液體再次持續(xù)灌流沖洗,記錄血管直徑分別為:(235.6±26)μm、(309.2±25)μm和(241.1±27)μm,提示ISL舒張SHR腦基底動脈(n=6,p0.01);(3)單個腦基底動脈平滑肌細胞鉗制電壓在-40 m V,外向電流在刺激電壓-40~-20 m V區(qū)間內(nèi)無顯著變化,10-4 mol/L ISL在0-60 m V區(qū)間內(nèi)可以呈電壓依賴性增強腦基底動脈平滑肌細胞外向電流(n=6,p0.05);(4)在0、10-7、10-6、10-5、10-4和3×10-4 mol/L異甘草素作用下,平滑肌細胞+60m V時的外向電流分別是(144±25)p A、(156±24)p A、(173±24)p A、(211±21)p A、(252±21)p A和(262±20)p A。除10-7 mol/L異甘草素組和對照組沒有明顯差異外,其余各組均呈濃度依賴性增強外向電流,提示ISL呈濃度依賴性增強腦基底動脈平滑肌細胞外向電流(n=6,p0.05),且增強平滑肌細胞外向電流的EC50為9.5μmol/L;(5)異甘草素干預(yù)后的SHR平滑肌細胞外向電流(+60m V)從(212.1±32)p A增加到(283.2±28)p A(p0.01,n=6),用10-3 mol/L四乙胺(TEA,BKCa通道阻斷劑)灌流3min后,SHR平滑肌細胞在+60m V時的外向電流減小到(143.4±21)p A(p0.05,n=6)。該結(jié)果提示異甘草素增強的平滑肌細胞外向電流由BKCa通道介導(dǎo);(6)預(yù)灌流10-5 mol/L亞甲藍(MB,可溶性鳥苷酸環(huán)化酶阻斷劑)3min后,異甘草素增強的平滑肌細胞外向電流(+60m V)從(324.3±74)p A減小到(171.9±42)p A(p0.05,n=6),與對照組(163.9±43)p A相比沒有統(tǒng)計學(xué)差異。該結(jié)果提示異甘草素增強的外向電流主要由可溶性鳥苷酸環(huán)化酶(Soluble Guanylyl Cyclase,s GC)介導(dǎo);(7)在正常電極內(nèi)液下,給予10-4 mol/L ISL預(yù)灌流3 min后,腦基底動脈VSMC的外向電流(+60m V)由(191.1±31)p A增加至(381±35)p A(n=6,p0.01)。在電極內(nèi)液中加入20μmol/L BAPTA-AM(選擇性鈣離子螯合劑),再給予10-4 mol/L ISL預(yù)灌流3 min后,腦基底動脈VSMC的外向電流(+60m V)由(76.7±18)p A增加至(151.4±19)p A(n=6,p0.01)。該結(jié)果提示BAPTA-AM可以明顯抑制各組平滑肌細胞的生理外向電流,但對異甘草素增強腦基底動脈VSMC外向電流的比率無顯著影響;(8)異甘草素干預(yù)14d后,SHR腦基底動脈內(nèi)c GMP水平由(31.4±3.8)pmol/mg protein增加至(78.7±12.7)pmol/mg protein(p0.05,n=6),與WKY(66.0±7.4)pmol/mg protein相比沒有統(tǒng)計學(xué)差異。該結(jié)果提示異甘草素可明顯增加SHR腦基底動脈內(nèi)c GMP含量。結(jié)論:異甘草素可能通過增加SHR腦基底動脈內(nèi)c GMP含量,增強平滑肌細胞BKCa電流,血管平滑肌細胞發(fā)生超極化,舒張腦基底動脈,使SHR血壓降低。
【關(guān)鍵詞】：腦基底動脈 異甘草素 平滑肌細胞 大電導(dǎo)鈣激活鉀通道 環(huán)磷酸鳥苷 膜片鉗 ELISA
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R544.1
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-11
• 縮略詞表11-12
• 前言12-14
• 材料與方法14-22
• 1 材料14-16
• 1.1 實驗動物14
• 1.2 主要實驗儀器14-15
• 1.3 主要實驗試劑、耗材15-16
• 2 方法16-21
• 2.1 大鼠尾動脈血壓測定16
• 2.2 溶液及主要實驗藥品的配制16-17
• 2.3 標本制備17-18
• 2.4 異甘草素對SHR模型的干預(yù)18-19
• 2.5 玻璃微電極的制備19
• 2.6 全細胞膜片鉗記錄方法19
• 2.7 壓力型小動脈測量儀技術(shù)19
• 2.8 ELISA技術(shù)19-21
• 3 統(tǒng)計學(xué)處理21-22
• 結(jié)果22-31
• 1. 異甘草素降低SHR血壓22
• 2. 異甘草素舒張SHR腦基底動脈22-23
• 3. 異甘草素增強腦基底動脈平滑肌細胞外向電流具有電壓依賴性23-25
• 4. 異甘草素增強腦基底動脈平滑肌細胞外向電流具有濃度依賴性25-26
• 5 異甘草素增強的腦基底動脈VSMC外向電流可能由BKCa通道介導(dǎo)26-27
• 6. 異甘草素增強腦基底動脈VSMC外向電流由sGC介導(dǎo)27-28
• 7. BAPTA-AM抑制各組平滑肌細胞的生理外向電流，，但對異甘草素誘導(dǎo)增強的外向電流比率無顯著影響28-30
• 8. 異甘草素增加腦基底動脈血管內(nèi)cGMP含量30-31
• 討論31-35
• 結(jié)論35-36
• 展望36-37
• 參考文獻37-41
• 文獻綜述41-49
• 參考文獻46-49
• 致謝49-50
• 作者簡歷50-51
• 導(dǎo)師評閱表51

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馮斯婷;唐其柱;易方方;羅浩;王騰;;異甘草素對豚鼠心室肌細胞L型鈣通道的影響[J];武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年01期

2 揭紅波;;淺談心血管疾病的發(fā)病機理與預(yù)防[J];中外醫(yī)療;2011年12期

3 邱妍妍;毛亮;譚曉秋;曾曉榮;楊艷;;人腸系膜動脈平滑肌sGCα和sGCβ基因表達水平檢測方法的建立[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2011年02期

4 田偉偉;王蕊;張傳林;趙磊;馬克濤;李麗;司軍強;;異甘草素增強大鼠腦基底動脈平滑肌細胞BK_(Ca)電流[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2014年12期

5 田慶來;官月平;張波;劉會洲;;甘草有效成分的藥理作用研究進展[J];天然產(chǎn)物研究與開發(fā);2006年02期

6 潘雪;曾曉榮;楊艷;;血管平滑肌鈣信號研究進展[J];國際病理科學(xué)與臨床雜志;2005年06期

7 李漢高;李芳萍;張雪梅;;大電導(dǎo)鈣激活鉀通道對平滑肌的調(diào)控作用研究進展[J];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2011年01期

8 陳輝;趙文強;劉應(yīng)才;劉慧芳;潘金生;曾曉榮;;槲皮素對原發(fā)性高血壓患者腸系膜動脈平滑肌細胞鈣激活鉀通道活性的影響[J];中華高血壓雜志;2008年08期

9 高雪巖;王文全;魏勝利;李衛(wèi)東;;甘草及其活性成分的藥理活性研究進展[J];中國中藥雜志;2009年21期

10 張傳林;王蕊;馬克濤;司軍強;李麗;;大黃素增強SD大鼠腦基底動脈平滑肌細胞BK_(Ca)電流[J];中國藥理學(xué)通報;2013年09期

本文編號：732492